第31讲 第十章吸光光度法 第2讲 第四节吸光光度法分析条件的选择 显色反应及其条件的选择 (一)显色反应和显色剂 1显色反应 在分光光度分析中,将试样中被测组分转变成 有色化合物的反应叫显色反应。显色反应可分两大 类,即络合反应和氧化还原反应,而络合反应是最 主要的显色反应。与被测组分化合成有色物质的试 剂称为显色剂。同一组分常可与若干种显色剂反应, 生成若干有色化合物,其原理和灵敏度亦有差别。 一种被测组分究竞应该用哪种显色反应,可根据所 需标准加以选择
第31讲 第十章 吸光光度法 第2讲 ⚫第四节 吸光光度法分析条件的选择 ⚫一、显色反应及其条件的选择 ⚫（一）显色反应和显色剂 ⚫ 1.显色反应 ⚫ 在分光光度分析中，将试样中被测组分转变成 有色化合物的反应叫显色反应。显色反应可分两大 类，即络合反应和氧化还原反应，而络合反应是最 主要的显色反应。与被测组分化合成有色物质的试 剂称为显色剂。同一组分常可与若干种显色剂反应， 生成若干有色化合物，其原理和灵敏度亦有差别。 一种被测组分究竞应该用哪种显色反应，可根据所 需标准加以选择
第31讲 第十章吸光光度法 第2讲 ●选择显色反应的一般标准 (1)选择性要好。一种显色剂最好只与一种被测组 分起显色反应,这样干扰就少。或者干扰离子容易 消除、或者显色剂与被测组分和干扰离子生成的 有色化合物的吸收峰相隔较远 (2)灵敏度要高。由于吸光光度法一般是测定微量 组分的,灵敏度高的显色反应有利于微量组分酌测 定。灵敏度的高低可苁摩尔吸光系数值的大小来判 断,K值大灵敏度高,否则灵敏度低。恒应注意,灵 敏度高的显色反应,并不一定选择性就好,对于高 含量的组分不一定要选用灵敏度高的显色反应。 (3)对比度要大。即如果显色剂有颜色,则有色化合 物与显色剂的最大吸收波长的差别要大,一般要求 在60nm以上
⚫选择显色反应的一般标准 : ⚫(1) 选择性要好。一种显色剂最好只与一种被测组 分起显色反应，这样干扰就少。或者干扰离子容易 被消除、或者显色剂与被测组分和干扰离子生成的 有色化合物的吸收峰相隔较远。 ⚫ (2)灵敏度要高。由于吸光光度法一般是测定微量 组分的，灵敏度高的显色反应有利于微量组分酌测 定。灵敏度的高低可从摩尔吸光系数值的大小来判 断，κ值大灵敏度高，否则灵敏度低。但应注意，灵 敏度高的显色反应，并不一定选择性就好，对于高 含量的组分不一定要选用灵敏度高的显色反应。 ⚫(3)对比度要大。即如果显色剂有颜色，则有色化合 物与显色剂的最大吸收波长的差别要大，一般要求 在60nm以上。 第31讲 第十章 吸光光度法 第2讲
第31讲 第十章吸光光度法 第2讲 ●(4)有色化合物的组成要恒定,化学性质要稳 定。有色化合物的组成若不确定,测定的再 现性就较差。有色化合物若易受空气的氧化、 日光的照射而分解,就会引入测量误差 5)显色反应的条件要易于控制。如果条件 要求过于严格,难以控制,测定结果的再现 性就差
⚫ (4)有色化合物的组成要恒定,化学性质要稳 定。有色化合物的组成若不确定，测定的再 现性就较差。有色化合物若易受空气的氧化、 日光的照射而分解，就会引入测量误差。 ⚫ (5)显色反应的条件要易于控制。如果条件 要求过于严格，难以控制，测定结果的再现 性就差。 第31讲 第十章 吸光光度法 第2讲
第31讲 第十章吸光光度法 第2讲 2显色剂 (1)无机显色剂 许多无机试剂能与金属离子起显色反应,如Cu2+ 与氨水形成深蓝色的络离子 Cu(NH4)42,SCN与Fe3 形成红色的络合物 Fe(scn2或Fe(SCN}3等。但是多 数无机显色剂的灵敏度和选择性都不高,其中性能较 好,目前还有实用价值的有硫氰酸盐、钼酸铵、氨水 和过氧化氢等 (2)有机显色剂 许多有机试剂,在一定条件下,能与金属离子 生成有色的金属螯合物(具有环状结构的络合物)
⚫2.显色剂 ⚫(1)无机显色剂 ⚫ 许多无机试剂能与金属离子起显色反应，如Cu2+ 与氨水形成深蓝色的络离子Cu(NH4 ) 4 2+ ，SCN-与Fe3+ 形成红色的络合物Fe(SCN)2+或Fe(SCN)6 3-等。但是多 数无机显色剂的灵敏度和选择性都不高，其中性能较 好，目前还有实用价值的有硫氰酸盐、钼酸铵、氨水 和过氧化氢等。 ⚫(2)有机显色剂 ⚫ 许多有机试剂，在一定条件下，能与金属离子 生成有色的金属螯合物(具有环状结构的络合物)。 第31讲 第十章 吸光光度法 第2讲
第31讲 第十章吸光光度法 第2讲 将金属螯合物应用于光度分析中的优点是: 1.大部分金属螯合物都呈现鲜明的颜色,摩 尔吸光系数大于104,因而测定的灵敏度很高; 2.金属螯合物都很稳定,一般离解常数都很 小,而且能抗辐射; 3.专用性强,绝大多数有机整合剂,在一定 条件下,只与少数或其一种金属离子络合,而且同 种有机螯合剂与不同的金属离子络合时,生成具 有特征颜色的螯合物
将金属螯合物应用于光度分析中的优点是： 1．大部分金属螯合物都呈现鲜明的颜色，摩 尔吸光系数大于104 ，因而测定的灵敏度很高； 2．金属螯合物都很稳定，一般离解常数都很 小，而且能抗辐射； 3．专用性强，绝大多数有机整合剂，在一定 条件下，只与少数或其一种金属离子络合，而且同 一种有机螯合剂与不同的金属离子络合时，生成具 有特征颜色的螯合物 第31讲 第十章 吸光光度法 第2讲