实验二动物性食品中有毒有害化学物质的检测 [实验目的]掌栀动物性食品中铅、镉、汞、砷等有毒有害元素和硝酸盐（亚硝酸盐） 苯并()芘、黄曲霉毒素等有毒有害化合物的国家标准测定方法的原理，熟悉常用方法的 基本操作，了解不同方法适用范围和基本操作。 GB2762一2012《食品安全国家标准食品中污染物的限量》中对动物性食品中铅、镉、 汞、砷、铬、亚硝酸盐 (硝酸盐 苯并)花、N二甲基亚硝胺等有毒有害化学物质的松 测方法及限量进行了规定，由于本实验指导篇幅所限，在本部分只列出了动物性食品常见及 对人类健康危害较大的几种有毒有害元素和有毒有害化合物的检测方法进行了介绍，对同 一种物质的检测所列举的方法均为现行国家标准方法，可根据具体情况选择使用。 一、动物性食品中铅的测定 GBT5009.12一2010《食品安全国家标准食品中铅的测定》适用于食品中铅的测定 本标准检出限：石墨炉原子吸收光谱法为0.005mgkg:氢化物原子荧光光谱法固体试 样为0.005mgkg,液体试样为0.001mgkg:火焰原子吸收光谱法为0.1mgkg:比色法为 25mo。单扫描极法为0085m (一）石墨炉原子吸收光谱法（第一法） 1.原理试样经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，电热原子化后 吸收283.3m共振线，在一定浓度范围，其吸收值与铅含量成正比，与标准系列比较定 量。 2.试剂和材料除非另有规定，本方法所使用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的 级水。 (1)硝酸：优级纯。 (2)过硫酸铵 (3)过氧化氢(30%)。 (4)高氯酸：优级纯。 (5)硝酸(1+1)：取50mL硝酸慢慢加入50mL水中 (6)硝酸(0.5molL)：取32mL硝酸加入50mL水中，稀释至100mL (7)硝酸(1mo1L)：取6.4mL硝酸加入50mL水中，稀释至100mL。 (8)磷酸二氢铵溶液(20gL)：称取2.0g磷酸二氢铵，以水溶解稀释至100mL。 (9)混合酸：硝酸+高氨酸(9+1)。取9份硝酸与1份高氯酸混合。 (10)铅标准储备液：准确称取1.000g金属铅(99.99% 分次加少量硝参加封 溶解，总量不超过37mL,移入1000mL容量瓶，加水至刻度。混匀。此溶液每毫升含 1.0mg铅。 (11)铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液1.0mL于100mL容量瓶中，加硝酸 至刻度。如此经多次稀释成每毫升含10.0ng、20.0ng、40.0ng、60.0ng、80.0ng铅的标 准使用液。 3仪知沿 (1)原子吸收光谱仪：附石墨炉及铅空心阴极灯。 (2)马弗炉。 (3)天平：感量为1mg
实验二 动物性食品中有毒有害化学物质的检测 [实验目的] 掌握动物性食品中铅、镉、汞、砷等有毒有害元素和硝酸盐（亚硝酸盐）、 苯并（a）芘、黄曲霉毒素等有毒有害化合物的国家标准测定方法的原理，熟悉常用方法的 基本操作，了解不同方法适用范围和基本操作。 GB2762—2012《食品安全国家标准 食品中污染物的限量》中对动物性食品中铅、镉、 汞、砷、铬、亚硝酸盐（硝酸盐）、苯并（a）芘、N-二甲基亚硝胺等有毒有害化学物质的检 测方法及限量进行了规定，由于本实验指导篇幅所限，在本部分只列出了动物性食品常见及 对人类健康危害较大的几种有毒有害元素和有毒有害化合物的检测方法进行了介绍，对同 一种物质的检测所列举的方法均为现行国家标准方法，可根据具体情况选择使用。 一、动物性食品中铅的测定 GB/T 5009.12—2010《食品安全国家标准 食品中铅的测定》适用于食品中铅的测定。 本标准检出限：石墨炉原子吸收光谱法为 0.005 mg/kg；氢化物原子荧光光谱法固体试 样为 0.005 mg/kg，液体试样为 0.001 mg/kg；火焰原子吸收光谱法为 0.1 mg/kg；比色法为 0.25 mg/kg。单扫描极谱法为 0.085 mg/kg。 （一）石墨炉原子吸收光谱法（第一法） 1. 原理 试样经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，电热原子化后 吸收283.3 nm 共振线，在一定浓度范围，其吸收值与铅含量成正比，与标准系列比较定 量。 2. 试剂和材料 除非另有规定，本方法所使用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的 一级水。 （1）硝酸：优级纯。 （2）过硫酸铵。 （3）过氧化氢（30%）。 （4）高氯酸：优级纯。 （5）硝酸（1＋1）：取 50 mL 硝酸慢慢加入 50 mL 水中。 （6）硝酸（0.5 mol/L）：取 3.2 mL 硝酸加入 50 mL 水中，稀释至 100 mL。 （7）硝酸（l mo1/L）：取 6.4 mL 硝酸加入 50 mL 水中，稀释至 100 mL。 （8）磷酸二氢铵溶液（20 g/L）：称取 2.0 g 磷酸二氢铵，以水溶解稀释至 100 mL。 （9）混合酸：硝酸+高氯酸（9+1）。取 9 份硝酸与 1 份高氯酸混合。 （10）铅标准储备液：准确称取 1.000 g 金属铅（99.99%），分次加少量硝酸，加热 溶解，总量不超过 37 mL，移入 1 000 mL 容量瓶，加水至刻度。混匀。此溶液每毫升含 1.0 mg 铅。 （11）铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液 1.0 mL 于 100 mL 容量瓶中，加硝酸 至刻度。如此经多次稀释成每毫升含 10.0 ng、20.0 ng、40.0 ng、60.0 ng、80.0 ng 铅的标 准使用液。 3. 仪器和设备 （1）原子吸收光谱仪：附石墨炉及铅空心阴极灯。 （2）马弗炉。 （3）天平：感量为 1 mg
(4)干燥恒温箱 (5)瓷坩埚。 (6)压力清解器 、压力消解罐或压力溶弹 (7)可调式电热板、可调式电炉。 4.分析步骤 (1)试样预处理：在采样和制备过程中，应注意不使试样污染：鱼类、肉类及蛋类 等水分含量高的鲜样，用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。 (2)试样消解（可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解） ①压力消解罐消解法：称取1g~2g试样（精确到0.001g, 含脂肪高的试 <1g,鲜样<2g或按压力消解罐使用说明书称取试样)于聚四氟乙烯内罐，加硝酸2 mL~4mL浸泡过夜。再加过氧化氢2mL~3mL(总量不能超过罐容积的1/3)。盖好 内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120℃~140℃保持3h~4h,在箱内自然冷却 至室温，用滴管将消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10mL~25mL容量 瓶中，用水少量多次洗涤罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用：同时作试 剂空 ②干法灰化：称取1g~5g试样（精确到0.001g,根据铅含量而定）于瓷坩埚 中，先小火在可调式电热板上炭化至无烟，移入马弗炉500℃±25℃灰化6h~8h,冷 却。若个别试样灰化不彻底，则加1mL混合酸在可调式电炉上小火加热，反复多次直 到消化完全 放净 用硝酸将灰分溶解，用滴管将试样 消化液洗入或过滤入（视消 后试样的盐分而定)10ml 25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于 容量瓶中并定容至刻度，混匀备用：同时作试剂空白。 ③过硫酸铵灰化法：称取1g~5g试样（精确到0.001g)于瓷坩埚中，加2mL~ 4mL硝酸浸泡1h以上，先小火炭化，冷却后加2.00g一3.00g过硫酸铵盖于上面，继 续炭化至不目烟，转入马弗炉，500℃±25C恒温2h, 再升至800℃， 保持20m .冷 却，加2ml~3mL硝酸， 用滴管将试样消化液洗入或过滤入 (视消化后试样的盐分而 定)10mL一25L容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容 至刻度，混匀备用：同时作试剂空白。 ④湿式消解法：称取试样1g一5g(精确到0001g)于锥形瓶或高脚烧杯中，放数 粒玻璃珠 ,加10L混合酸，加盖浸泡过夜，加一小漏斗于电炉上消解，若变棕黑色 再加混合酸，直至冒白烟 消化液呈无色透明或略带黄色，放冷 ,用滴管将试样消化液 入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10L~25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤锥 形瓶或高脚烧杯，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用：同时作试剂空白。 (3)测定 ①仪器条件：根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为波长283.3m 0.2nm~1.0nm 灯电流5mA~7mA,干燥温度120C, 0s:灰化温度450℃，持续15 s20s,原子化温度：1700℃ ~2300℃，持续4s~5s,背景校正为氘灯或塞曼效应 ②标准曲线绘制：吸取以上配制的铅标淮使用液10.0gmL(或·gL),20.0 ng/ml(或μg/1L）,40.0ng/mL(或μg/1),60.0ng/mL(或μg/L),80.0ng/mlL (或μL)各10μL,注入石墨炉，测得其吸光值并求得吸光值与浓度关系的一元线 性回归方程。 ③试样测定：分别吸取样液和试剂空白液各10L, 注入石墨炉，测得其吸光 值，代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中铅含量。 ④基体改进剂的使用：对有干扰试样，则注入适量的基体改进剂磷酸二氢铵溶液 (一般为5μL或与试样同量)消除干扰。绘制铅标准曲线时也要加入与试样测定时等
（4）干燥恒温箱。 （5）瓷坩埚。 （6）压力消解器、压力消解罐或压力溶弹。 （7）可调式电热板、可调式电炉。 4. 分析步骤 （1）试样预处理：在采样和制备过程中，应注意不使试样污染；鱼类、肉类及蛋类 等水分含量高的鲜样，用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。 （2）试样消解（可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解） ① 压力消解罐消解法：称取 1 g～2 g 试样（精确到 0.001 g，干样、含脂肪高的试样 ＜1 g，鲜样＜2 g 或按压力消解罐使用说明书称取试样）于聚四氟乙烯内罐，加硝酸 2 mL～4 mL 浸泡过夜。再加过氧化氢 2 mL～3 mL（总量不能超过罐容积的 1/3）。盖好 内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120℃～140℃保持 3 h～4 h，在箱内自然冷却 至室温，用滴管将消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10 mL～25 mL 容量 瓶中，用水少量多次洗涤罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试 剂空白。 ② 干法灰化：称取 1 g～5 g 试样（精确到 0.001 g，根据铅含量而定）于瓷坩埚 中，先小火在可调式电热板上炭化至无烟，移入马弗炉 500℃±25℃灰化 6 h～8 h，冷 却。若个别试样灰化不彻底，则加 1 mL 混合酸在可调式电炉上小火加热，反复多次直 到消化完全，放冷，用硝酸将灰分溶解，用滴管将试样消化液洗入或过滤入（视消化 后试样的盐分而定）10 mL～25 mL 容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于 容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。 ③ 过硫酸铵灰化法：称取 1 g～5 g 试样（精确到 0.001 g）于瓷坩埚中，加 2 mL～ 4 mL 硝酸浸泡 1 h 以上，先小火炭化，冷却后加 2.00 g～3.00 g 过硫酸铵盖于上面，继 续炭化至不冒烟，转入马弗炉，500℃±25℃恒温 2 h，再升至 800℃，保持 20 min，冷 却，加 2 mL～3 mL 硝酸，用滴管将试样消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而 定）10 mL～25 mL 容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容 至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。 ④ 湿式消解法：称取试样 1 g～5 g（精确到 0.001 g）于锥形瓶或高脚烧杯中，放数 粒玻璃珠，加 10 mL 混合酸，加盖浸泡过夜，加一小漏斗于电炉上消解，若变棕黑色， 再加混合酸，直至冒白烟，消化液呈无色透明或略带黄色，放冷，用滴管将试样消化液洗 入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10 mL～25 mL 容量瓶中，用水少量多次洗涤锥 形瓶或高脚烧杯，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。 （3）测定 ① 仪器条件：根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为波长 283.3 nm，狭缝 0.2 nm～1.0 nm，灯电流 5 mA～7 mA，干燥温度 120℃，20 s；灰化温度 450℃，持续 15 s～20 s，原子化温度：1700℃～2300℃，持续 4 s～5 s，背景校正为氘灯或塞曼效应。 ② 标准曲线绘制：吸取以上配制的铅标准使用液 10.0 ng/mL（或 μg/L），20.0 ng/mL（或 μg/L），40.0 ng/mL（或 μg/L），60.0 ng/mL（或 μg/L），80.0 ng/mL （或 μg/L）各 10 μL，注入石墨炉，测得其吸光值并求得吸光值与浓度关系的一元线 性回归方程。 ③ 试样测定：分别吸取样液和试剂空白液各 10 μL，注入石墨炉，测得其吸光 值，代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中铅含量。 ④ 基体改进剂的使用：对有干扰试样，则注入适量的基体改进剂磷酸二氢铵溶液 （一般为 5 μL 或与试样同量）消除干扰。绘制铅标准曲线时也要加入与试样测定时等
量的基体改进剂磷酸二氢铵溶液。 5.结果计算试样中铅含量按式(2-11)进行计算。 X=a-c)x×1000 …(2--1) m×1000×1000 式中：X一试样中铅含量，单位为毫克每千克或毫克每升(mgkg或mgL): c1一测定样液中铅含量，单位为纳克每毫升(ngmL): 空白液中铅含量，单位为纳克每毫升(gmL): 试样消化液定量总体积，单位为毫升(mL) m一试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL)。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数 字。 6.精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均 值的20%。 (二)氢化物原子荧光光谱法（第二法） 1.原理试样经酸热清化后，在酸性介质中，试样中的铅与明氢化钠(NaBH4)或硼氢 化钾(KBH4)反应生成挥发性铅的氢化物(PbH)。以氩气为载气，将氢化物导入电热石英 原子化器中原子化，在特制铅空心阴极灯 照射下，基态铅原 子被激发至高能态：在去活化回 到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与铅含量成正比，根据标准系列进行定量 2.试剂和材料 (1)硝酸十高氯酸混合酸(9+1)：分别量取硝酸900mL,高氯酸100mL,混匀。 (2)盐酸溶液(1+1)：量取250mL盐酸倒入250mL水中，混匀。 (3)草酸溶液(10gL):称取1.0g草酸，加水溶解至100mL,混匀 (4)铁化钾KFe(CN)溶液(1OOg/L):称取10.0g铁氰化钾，加水溶解并稀释 至100mL,混匀。 (5)氢氧化钠溶液(2gL)：称取2.0g氢氧化钠，溶于1L水中，混匀。 (6)硼氢化钠(NaBH)溶液(10e/L):称取5.0g氢化纳溶于500mL氢氧化钠溶液 (2L)中，混匀，用前现配。 (7)铅标准储备液(1.0mgmL)。 (8)铅标准应用液(1.0gmL)：精确吸取铅标准储备液(1.0mgmL),逐级稀释至 1.0 ug/mL. 3位器 (1)原子荧光光度计 (2)铅空心阴极灯 (3)电热板 (4)天平：感量为1mg 4.分析步骤 (1)试样清化：称取固体试样02g-2g,液体试样2.00g(mL)一1000g(mL)(均 精确到0.001 置于50mL~100mL消化容器中（锥形瓶 然后加入硝酸+高氯酸混合 酸(9+1)混合酸5mL一10mL摇匀浸泡，放置过夜。次日置于电热板上加热消解，至消 夜呈淡黄色或无色（如消解过程色洋较深，稍冷补加少量硝酸，继续消解），稍冷加入20L 水再继续加热赶酸，至消解液0.5mL~1.0mL止，冷却后用少量水转入25mL容量瓶中，并 加入盐酸(1+1)0.5mL,草酸溶液(10gL)0.5mL,摇匀，再加入铁氰化钾(100gL) 1.00mL,用水准确稀释定容至25mL,摇匀，放置30min后测定。同时做试剂空白
量的基体改进剂磷酸二氢铵溶液。 5. 结果计算 试样中铅含量按式（2-1-1）进行计算。 X＝ 1000 1000 ( ) 1000 0 1 m c c V …………………………………（2-1-1） 式中：X ——试样中铅含量，单位为毫克每千克或毫克每升（mg/kg或mg/L）； c1 ——测定样液中铅含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）； c0——空白液中铅含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）； V——试样消化液定量总体积，单位为毫升（mL）； m——试样质量或体积，单位为克或毫升（g 或 mL）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数 字。 6. 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均 值的20 %。 （二）氢化物原子荧光光谱法（第二法） 1. 原理 试样经酸热消化后，在酸性介质中，试样中的铅与硼氢化钠（NaBH4）或硼氢 化钾（KBH4）反应生成挥发性铅的氢化物（PbH4）。以氩气为载气，将氢化物导入电热石英 原子化器中原子化，在特制铅空心阴极灯照射下，基态铅原子被激发至高能态；在去活化回 到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与铅含量成正比，根据标准系列进行定量。 2. 试剂和材料 （1）硝酸＋高氯酸混合酸（9+1）：分别量取硝酸900 mL，高氯酸100 mL，混匀。 （2）盐酸溶液（1＋1）：量取250 mL盐酸倒入250 mL水中，混匀。 （3）草酸溶液（10 g/L）：称取1.0 g草酸，加水溶解至100 mL，混匀。 （4）铁氰化钾[K3Fe（CN）6]溶液（100 g／L）：称取10.0 g铁氰化钾，加水溶解并稀释 至100 mL，混匀。 （5）氢氧化钠溶液（2 g/L）：称取2.0 g氢氧化钠，溶于1 L水中，混匀。 （6）硼氢化钠（NaBH4）溶液（10 g/L）：称取5.0 g硼氢化钠溶于500 mL氢氧化钠溶液 （2 g/L）中，混匀，用前现配。 （7）铅标准储备液（1.0 mg/mL）。 （8）铅标准应用液（1.0 μg/mL）：精确吸取铅标准储备液（1.0 mg/mL），逐级稀释至 1.0 μg/mL。 3. 仪器 （1）原子荧光光度计。 （2）铅空心阴极灯。 （3）电热板。 （4）天平：感量为1 mg。 4. 分析步骤 （1）试样消化：称取固体试样0.2 g～2 g，液体试样2.00 g（mL）～10.00 g（mL）（均 精确到0.001 g），置于50 mL～100 mL消化容器中（锥形瓶），然后加入硝酸＋高氯酸混合 酸（9＋1）混合酸5 mL～10 mL摇匀浸泡，放置过夜。次日置于电热板上加热消解，至消化 液呈淡黄色或无色（如消解过程色泽较深，稍冷补加少量硝酸，继续消解），稍冷加入20 mL 水再继续加热赶酸，至消解液0.5 mL～1.0 mL止，冷却后用少量水转入25 mL容量瓶中，并 加入盐酸（1＋1）0.5 mL，草酸溶液（10 g/L）0.5 mL，摇匀，再加入铁氰化钾（100 g/L） 1.00 mL，用水准确稀释定容至25 mL，摇匀，放置30 min后测定。同时做试剂空白
(2)标准系列制备：取25mL的容量瓶7支，依次准确加入铅标准应用液(1.00uemL) 0mL、0.125mL、025mL、0.50mL、0.75mL、1.00mL、1.25mL(各相当于铅浓度0.0n 5.0 ng/mL 10.0 ng/mL 20.0 ng/mL 、30.0ngml 40.ng/mL 后，加入0.5mL盐酸(1+1)和0.5mL草酸溶液(10g/L)摇匀，再加入铁氰化钾溶液(100 gL)1.0mL,用水稀释至刻度，摇匀。放置30min后待测。 (3)利定 ①仪器参考条件：负高压：323V:铅空心阴极灯电流：75mA:原子化器：炉温750℃ 800℃，炉高8mm:氢气流流速：载气800 min:屏蔽气： 10O0 mL/min:加还原剂时间； 7.0s:读数时间：15s:延迟时间：0s:测量方式：标准曲线法：读数方式：峰面积：进样 体积：2.0mL。 ②测量方式：设定好仪器的最佳条件，逐步将炉温升至所需温度，稳定10mn~20 m后开始测量：连续用标准样空白和试样消化液，试样测定结果按式2-1-2)计算。 5.结果计算试样中铅含量按式(2-1-2)进行计算。 x=(I-Co)xV x1000 (2-1-2) m×1000×1000 式中：X一试样中铅含量，单位为毫克每千克或毫克每升(mgkg或mgL): CI- _试样消化液测定浓度，单位为纳古每亭升(/ml) 试剂空白液测定浓度，单位为纳克每毫升(ngmL) 试样消化液定量总体积，单位为毫升(mL): 试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL)。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 6.结密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均 值的10 (三)火焰原子吸收光谱法（第三法） 1.原理试样经处理后，铅离子在一定H条件下与二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC) 形成络合物，经4甲基2戊酮(MBK)茶取分离，导入原子吸收光谱仪中，经火焰原子化 后，吸收2833m共振线，其吸收量与铅的含量成正比，与标准系列比较定量 2.试剂和材料 (1)混合酸 :硝酸十高氯酸(9十1D。 (2)硫酸铵溶液(300gL)：称取30.0g硫酸铵(NH4)2S0,用水溶解并加水至100 (3)柠檬铵溶液(250gL):称取25.0g柠檬酸铵，用水溶解并加水至100mL。 (4)浪百里粉蓝水溶液(1几) (5) 上乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)溶液(50gL)：称取5g二乙基二硫代氨基 甲酸钠，用水溶解并加水至100mL。 (6)氨水(1+1)。 (7)4甲基-2-戊酮(MBK)。 (8)铅标准溶液 ①铅标准储备液：精密称取1.000g金属铅(99.99%)分次加少量硝酸。(1+1)加热溶 解，总量不超过37ml 移入1000mL容量瓶， 加水至刻度。此溶液每毫升含1.0mg铅 ②铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液1.0mL于10OmL容量瓶中，加硝酸(0.5moML 或硝酸(1.0molL)至刻度。如此经多次稀释成每毫升含10.0ng,20.0ng,40.0ng,60.0ng, 80.0ng铅的标准使用液
（2）标准系列制备：取25 mL的容量瓶7支，依次准确加入铅标准应用液（1.00 μg/mL） 0 mL、0.125 mL、0.25 mL、0.50 mL、0.75 mL、1.00 mL、1.25 mL（各相当于铅浓度0.0 ng/mL、 5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL、30.0 ng/mL、40.0 ng/mL、50.0 ng/mL）用少量水稀释 后，加入0.5 mL盐酸（1＋1）和0.5 mL草酸溶液（10 g/L）摇匀，再加入铁氰化钾溶液（100 g/L）1.0 mL，用水稀释至刻度，摇匀。放置30 min后待测。 （3）测定 ① 仪器参考条件：负高压：323 V；铅空心阴极灯电流：75 mA；原子化器：炉温750℃～ 800℃，炉高8 mm；氩气流流速：载气800 mL/min；屏蔽气：1000 mL/min；加还原剂时间： 7.0 s；读数时间：15 s；延迟时间：0 s；测量方式：标准曲线法；读数方式：峰面积；进样 体积：2.0 mL。 ② 测量方式：设定好仪器的最佳条件，逐步将炉温升至所需温度，稳定10 min～20 min后开始测量：连续用标准样空白和试样消化液，试样测定结果按式2-1-2）计算。 5. 结果计算 试样中铅含量按式（2-1-2）进行计算。 X＝ 1000 1000 ( ) 1000 0 1 m c c V …………………………（2-1-2） 式中：X ——试样中铅含量，单位为毫克每千克或毫克每升（mg/kg或mg/L）； c1 ——试样消化液测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； c0——试剂空白液测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； V——试样消化液定量总体积，单位为毫升（mL）； m——试样质量或体积，单位为克或毫升（g或mL）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 6. 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均 值的10%。 （三）火焰原子吸收光谱法（第三法） 1. 原理 试样经处理后，铅离子在一定pH条件下与二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDTC） 形成络合物，经4-甲基-2-戊酮（MIBK）萃取分离，导入原子吸收光谱仪中，经火焰原子化 后，吸收283.3nm共振线，其吸收量与铅的含量成正比，与标准系列比较定量。 2. 试剂和材料 （1）混合酸：硝酸＋高氯酸（9＋l）。 （2）硫酸铵溶液（300 g/L）：称取30.0 g硫酸铵[（NH4）2SO4]，用水溶解并加水至100 mL。 （3）柠檬铵溶液（250 g/L）：称取25.0 g柠檬酸铵，用水溶解并加水至100 mL。 （4）溴百里酚蓝水溶液（1 g/L）。 （5）二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDTC）溶液（50 g/L）：称取5 g 二乙基二硫代氨基 甲酸钠，用水溶解并加水至100 mL。 （6）氨水（1＋1）。 （7）4-甲基-2-戊酮（MIBK）。 （8）铅标准溶液 ① 铅标准储备液：精密称取1.000 g金属铅（99.99%）分次加少量硝酸。（1＋1）加热溶 解，总量不超过37 mL，移入1 000 mL容量瓶，加水至刻度。此溶液每毫升含1.0 mg铅。 ② 铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液1.0mL于100mL容量瓶中，加硝酸（0.5 mol/L） 或硝酸（1.0 mo1/L）至刻度。如此经多次稀释成每毫升含10.0 ng，20.0 ng，40.0 ng，60.0 ng， 80.0 ng铅的标准使用液
(9)盐酸(1+11)：取10mL盐酸加入110mL水中，混匀。 (10)磷酸溶液(1+10)：取10mL磷酸加入100mL水中，混匀。 3.仪器 (1)原子吸收光谱仪火焰原子化器 (2)马弗炉。 (3)天平：感量为1mg。 (4)干燥恒温箱。 (5)瓷坩埚。 (6)压力消解 、压力消解罐或压力溶弹 (7)可调式电热板、可调式电炉。 4.分析步骤 (1)试样处理：高、蛋、水产及乳制品，取可食部分充分混匀。称取5g一10g(精确 到0.01g于瓷坩据中，小火炭化，然后移入马弗炉中，500℃以下灰化16h后，取出坩埚 放冷后再加少量混合酸(9+1，小火加热，不使干，必要时再加少许混合酸，如此反复处 理，直至残渣中无炭料 待坩埚稍冷，加10mL盐酸(1+11)，溶解残渣并移入50mL容量瓶 中，再用水反复洗涤坩埚，洗液并入容量瓶中，并稀释至刻度，混匀备用。 取与试样相同量的混合酸和盐酸(1+11)，按同一操作方法作试剂空白试验。 乳类经混匀后，量取50L,置于瓷坩埚中，加磷酸(1+10)，在水浴上蒸干，再加小 火炭化，以下按上述自“然后移入马弗炉中起依法操作 (2)萃取分离：视试样情况，吸取250mL 50.0 L上述制备的样液及试剂空白液，分 别置于125mL分液漏斗中，补加水至60mL。加2mL柠檬酸铵溶液，3一5滴溴百里酚蓝水溶 液，用氨水(1+1)调pH至溶液由黄变蓝，加硫酸铵溶液10.0mL,DDTC溶液10mL,摇匀。 放置5min左右，加入10.0 mL MIBK,剧烈振摇提取1min,静置分层后，弃去水层，将MBK 层放入10mL带塞刻度管中，备用。 分别吸取铅标准使用液0mL,025mL,0.50mL,1.00mL 1.50ml 2.00m (相当 于0g,25g,50g10.0g,15.0g,20.0g铅)于125mL分液漏斗中。与试样相同 方法萃取 (3)测定：仪器参考条件：空心阴极灯电流8mA:共振线283.3m:狭缝0.4nm:空 气流量8L/min 5.结果计算试样中铅含量按式(2-13)进行计算 K=-c)xg×100 (2-1-3) m×3/,×1000 式中：X一试样中铅的含量，单位为毫克每千克或毫克每升(mgkg或mgL): 测定用试样中铅的含量，单位为微克每毫升(gmL 试济 空白液中铅的含量 内微克每毫升 (ugmL） -试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL): V -试样萃取液体积，单位为毫升(L): —试样处理液的总体积，单位为毫升(mL): 一测定用试样处理液的总体积，单位为亲升(mL) 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示 ,结果保留两位有效数字 6.精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值 的20%。 (四)二硫腙比色法（第四法）
（9）盐酸（1+11）：取10 mL 盐酸加入110 mL 水中，混匀。 （10）磷酸溶液（1+10）：取10 mL 磷酸加入100 mL 水中，混匀。 3. 仪器 （1）原子吸收光谱仪火焰原子化器。 （2）马弗炉。 （3）天平：感量为 1 mg。 （4）干燥恒温箱。 （5）瓷坩埚。 （6）压力消解器、压力消解罐或压力溶弹。 （7）可调式电热板、可调式电炉。 4. 分析步骤 （1）试样处理：禽、蛋、水产及乳制品，取可食部分充分混匀。称取5 g～10 g（精确 到0.01 g）于瓷坩埚中，小火炭化，然后移入马弗炉中，500℃以下灰化16 h后，取出坩埚， 放冷后再加少量混合酸（9+1），小火加热，不使干涸，必要时再加少许混合酸，如此反复处 理，直至残渣中无炭粒，待坩埚稍冷，加10 mL盐酸（1＋11），溶解残渣并移入50 mL容量瓶 中，再用水反复洗涤坩埚，洗液并入容量瓶中，并稀释至刻度，混匀备用。 取与试样相同量的混合酸和盐酸（1＋11），按同一操作方法作试剂空白试验。 乳类经混匀后，量取50 mL，置于瓷坩埚中，加磷酸（1＋10），在水浴上蒸干，再加小 火炭化，以下按上述自“然后移入马弗炉中”起依法操作。 （2）萃取分离：视试样情况，吸取25.0 mL～50.0 mL上述制备的样液及试剂空白液，分 别置于125 mL分液漏斗中，补加水至60 mL。加2 mL柠檬酸铵溶液，3～5滴溴百里酚蓝水溶 液，用氨水（1＋1）调pH至溶液由黄变蓝，加硫酸铵溶液10.0 mL，DDTC溶液10 mL，摇匀。 放置5 min左右，加入10.0 mL MIBK，剧烈振摇提取1 min，静置分层后，弃去水层，将MIBK 层放入10 mL带塞刻度管中，备用。 分别吸取铅标准使用液0 mL，0.25 mL，0.50 mL，1.00 mL，1.50 mL，2.00 mL（相当 于0 μg，2.5 μg，5.0 μg，10.0 μg，15.0 μg，20.0 μg铅）于125 mL分液漏斗中。与试样相同 方法萃取。 （3）测定：仪器参考条件：空心阴极灯电流 8 mA；共振线283.3 nm；狭缝0.4 nm；空 气流量8 L／min； 5. 结果计算 试样中铅含量按式（2-1-3）进行计算。 X＝ / 1000 ( ) 1000 3 2 1 0 1 m V V c c V ……………………………………（2-1-3） 式中：X ——试样中铅的含量, 单位为毫克每千克或毫克每升（mg/kg 或mg/L）； c1——测定用试样中铅的含量，单位为微克每毫升（μg/mL）； c0——试剂空白液中铅的含量，单位为微克每毫升（μg/mL）； m——试样质量或体积，单位为克或毫升（g 或mL）； V1——试样萃取液体积，单位为毫升（mL）； V2——试样处理液的总体积，单位为毫升（mL）； V3——测定用试样处理液的总体积，单位为毫升（mL）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 6. 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值 的20%。 （四）二硫腙比色法（第四法）