COOC?H, COoC? H5 CH2 Br-CH NCH COOC Hs CCL4 COOC2H5 OC2 Hs (1)C2H5 ONa C-O COOC2H5 Nc-cOC%、)HO NHCH-COOH (2)PhCH2Br NH2NH2 NH2-CH-COOH CH2Ph D,L-苯丙氨酸 合成法合成的氨基酸是外消旋体,拆分后才能得到D合L-氨基酸。 氨基酸的化学合成1850年就已实现,但氨基酸的发酵法生产在一百年后 的1957年才得以实现用糖类(淀粉)发酵生产谷氨酸 §20-2多肽 多肽的组成和命名 1.肽和肽键 分子氨基酸中的羧基与另一分子氨基酸分子的氨基脱水而形成的酰胺叫 做肽,其形成的酰胺键称为肽键。 R .H2O NH2 -CH-C-OH NH2-CH-COOH NH2-CHiC-NH-TCH-COOH 由n个a-氨基酸缩合而成的肽称为n肽,由多个a-氨基酸缩合而成的肽称 为多肽
·228· D，L-苯丙氨酸 合成法合成的氨基酸是外消旋体，拆分后才能得到 D-合 L-氨基酸。 氨基酸的化学合成 1850 年就已实现，但氨基酸的发酵法生产在一百年后 的 1957 年才得以实现用糖类（淀粉）发酵生产谷氨酸。 §20-2 多 肽 一、多肽的组成和命名 1． 肽和肽键 一分子氨基酸中的羧基与另一分子氨基酸分子的氨基脱水而形成的酰胺叫 做肽，其形成的酰胺键称为肽键。 由 n 个α-氨基酸缩合而成的肽称为 n 肽，由多个α-氨基酸缩合而成的肽称 为多肽。 CH2 COOC2H5 COOC2H5 Br2 CCl4 CH COOC2H5 COOC2H5 Br C NK C O O C N C O O CH COOC2H5 COOC2H5 C2H5ONa PhCH2Br (1) (2) C N C O O C COOC2H5 COOC2H5 CH2Ph H3O CO2 (1) (2) C N C O O CH CH2Ph COOH NH2NH2 C C O O CH CH2Ph NH2 COOH NH NH + NH2 CH R C O OH NH2 CH R' + COOH - H2O NH2 CH R C O NH CH R' COOH 肽键
一般把含100个以上氨基酸的多肽(有时是含50个以上)称为蛋白质。 无论肽脸有多长,在链的两端一端有游离的氨基(-NH2),称为N端:链的 另一端有游离的羧基(-COOu,称为C端, R NH2+CH-C+NH-CH-C CH÷cOO N端 肽的命名 根据组成肽的氨基酸的顺序称为某氨酰某氨酰…某氨酸(简写为某、某、某) 例如 CH3 CH2OH CH2 C6H5 NH2-CH-C-NH-CH-C-NH-CH-COOH 丙氨酰丝氨酰苯丙氨酸(丙丝苯丙) 很多多肽都采用俗名,如催产素、胰岛素等。 、多肽结构的测定 由氨基酸组成的多肽数目惊人,情况十分复杂。假定100个氨基酸聚合成线 形分子,可能具有20中多肽。 例如:由甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸三种氨基酸就可组成六种三肽。 甘-缬-亮;甘-亮-缬;缬-亮-甘:缬-甘-亮;亮-甘-缬:亮- 缬-甘 多肽结构的测定主要是作如下工作: ①了解某一多肽是由哪些氨基酸组成的。 各种氨基酸的相对比例。 ③确定各氨基酸的排列顺序 多肽结构测定工作步骤如下: 1.测定分子量 2.氨基酸的定量分析
·229· 一般把含 100 个以上氨基酸的多肽（有时是含 50 个以上）称为蛋白质。 无论肽脸有多长，在链的两端一端有游离的氨基（-NH2），称为 N 端；链的 另一端有游离的羧基（-COOH），称为 C 端。 2．肽的命名 根据组成肽的氨基酸的顺序称为某氨酰某氨酰…某氨酸（简写为某、某、某）。 例如： 很多多肽都采用俗名，如催产素、胰岛素等。 二、多肽结构的测定 由氨基酸组成的多肽数目惊人，情况十分复杂。假定 100 个氨基酸聚合成线 形分子，可能具有 20100中多肽。 例如：由甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸三种氨基酸就可组成六种三肽。 甘-缬-亮； 甘-亮-缬； 缬-亮-甘； 缬-甘-亮； 亮-甘-缬； 亮- 缬-甘。 多肽结构的测定主要是作如下工作： ① 了解某一多肽是由哪些氨基酸组成的。 ② 各种氨基酸的相对比例。 ③ 确定各氨基酸的排列顺序。 多肽结构测定工作步骤如下： 1．测定分子量 2．氨基酸的定量分析 NH2 CH R C O NH CH R' C O NH CH R'' COOH n N 端 C 端 NH2 CH CH3 C O NH C O NH CH CH2C6H5 CH COOH CH2OH 丙氨酰丝氨酰苯丙氨酸 （丙 丝 苯丙）
HCI 多肽 O氨基酸尽析法分 离 各种氨基酸—各种氨基酸的含量 现代方法是将水解后的氨基酸混和液用氨基酸分析仪进行分离和测定。 3.端基分析(测定N端和C端 (1)测定N端(有两种方法) a2,4-=硝基氟苯法一一桑格尔( Sanger-英国人)法 2,4-=硝基氟苯与氨基酸的N端氨基反应后,再水解,分离除N-二硝基苯 基氨基酸,用色谱法分析,即可知道N端为何氨基酸。 Na2CO3 F+ H2N-CH-CONH-CH( HN- CH-cONH-CH-CONH一 NO2 R O2N_/HN-CH-COOH+H2N-CH-COOH O2 R R 此法的缺点是所有的肽键都被水解掉了 b异硫氰酸苯酯(Ph-N=C=S)法一一艾德曼( Edman)降解法 H>7 CNC=s+NH2 CHCONH-多肽 ChS NHC C-NH多肽 R NH-CH CH-R C6H5 C 测定咪唑衍生物的R,即可知是哪种氨基酸 异硫氰酸苯酯法的特点是,除多肽N端的氨基酸外,其余多肽链会保留下 来。这样就可以继续不断的测定其N端。 (2)测定C端 多肽与肼反应
·230· 现代方法是将水解后的氨基酸混和液用氨基酸分析仪进行分离和测定。 3．端基分析（测定 N 端和 C 端） （1）测定 N 端（有两种方法） a 2,4- = 硝基氟苯法——桑格尔(Sanger-英国人)法 2,4- = 硝基氟苯与氨基酸的 N 端氨基反应后，再水解，分离除 N-二硝基苯 基氨基酸，用色谱法分析，即可知道 N 端为何氨基酸。 此法的缺点是所有的肽键都被水解掉了。 b 异硫氰酸苯酯(Ph-N=C=S)法——艾德曼(Edman)降解法。 测定咪唑衍生物的 R，即可知是哪种氨基酸。 异硫氰酸苯酯法的特点是，除多肽 N 端的氨基酸外，其余多肽链会保留下 来。这样就可以继续不断的测定其 N 端。 （2）测定 C 端 a 多肽与肼反应 HCl H2O 多肽 氨基酸 层析法分离 各种氨基酸 各种氨基酸的含量 O2N F H2N CH R CONH CH R' CONH …… + … O2N HN CH R CONH CH R' CONH … NO2 NO2 Na2CO3 HCl O2N HN CH R COOH NO2 CH R' + H2N COOH + C6H5N=C=S NH2CHCONH R + 多肽 C6H5NHC 多肽 S NH CH R C O NH < pH >7 pH 7 C N C CH H N C6H5 O R S + 多肽