Separations in zonal rotors B D E
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d Figure 3. Dynamic loading and unloading of a batch-type rotor. (a) and (b); rotor filled via the edge with gradient, light-end first aa B: (c), dense cushion fed to edge m displaces htest gradient a from centre. (d); sample if and overlay O fed to centre, some of cushion displaced. (e); separation phase. (f): unloading by displacement from centre by feeding dense (4)垂直转头:其离心管是垂直放置,样品颗粒的沉降距离最短,离心所需时间 也短,适合用于密度梯度区带离心,离心结束后液面和样品区带要作九十度转向,因 而降速要慢
126 ⑷ 垂直转头：其离心管是垂直放置，样品颗粒的沉降距离最短，离心所需时间 也短，适合用于密度梯度区带离心，离心结束后液面和样品区带要作九十度转向，因 而降速要慢
Centrifugal force igure 8. Separations in vertical rotors. The tubes are filled cor and load to the pockets of the rotor fa). As the rotor begins to move the b), and particles start to sediment across the tube elow 1000 r.p. m. the bands reorientate (d), and as the rotor ce is completed (el (5)连续流动转头:可用于大量培养液或提取液的浓缩与分离,转头与区带转头 类似,由转子桶和有入口和出口的转头盖及附属装置组成,离心时样品液由入口连续 流入转头,在离心力作用下,悬浮颗粒沉降于转子桶壁,上清液由出口流出。 高心管: 离心管主要用塑料和不锈钢制成,塑料离心管常用材料有聚乙烯(PE),聚碳酸 酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中PP管性能较好。塑料离心管的优点是透明(或半透 明),硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿
127 ⑸ 连续流动转头：可用于大量培养液或提取液的浓缩与分离，转头与区带转头 类似，由转子桶和有入口和出口的转头盖及附属装置组成，离心时样品液由入口连续 流入转头，在离心力作用下，悬浮颗粒沉降于转子桶壁，上清液由出口流出。 3. 离心管： 离心管主要用塑料和不锈钢制成，塑料离心管常用材料有聚乙烯（PE），聚碳酸 酯（PC），聚丙烯（PP）等，其中 PP 管性能较好。塑料离心管的优点是透明（或半透 明），硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形，抗有机溶剂腐蚀性差，使用寿
命短。 不锈钢管强度大,不变形,能抗热,抗冻,抗化学腐蚀。但用时也应避免接触 强腐蚀性的化学药品,如强酸、强碱等 塑料离心管都有管盖,离心前管盖必须盖严,倒置不漏液。管盖有三种作用: ①防止样品外泄。用于有放射性或强腐蚀性的样品时,这点尤其重要。②防止样 品挥发。③支持离心管,防止离心管变形。 4.分析性离心机: 分析性离心机使用了特殊设计的转头和光学检测系统,以便连续地监视物质在一 个离心场中的沉降过程。从而确定其物理性质。 分析性超速离心机的转头是椭圆形的,以避免应力集中于孔处。此转头通过一个 有柔性的轴联接到一个高速的驱动装置上,转头在一个冷冻的和真空的腔中旋转,转 头上有2~6个装离心杯的小室,离心杯是扇形石英的,可以上下透光,离心机中装有 个光学系统,在整个离心期间都能通过紫外吸收或折射率的变化监测离心杯中沉降 着的物质,在预定的期间可以拍摄沉降物质的照片,在分析离心杯中物质沉降情况 时,在重颗粒和轻颗粒之间形成的界面就像一个折射的透镜,结果在检测系统的照像 底板上产生了一个“峰”,由于沉降不断进行,界面向前推进,因此峰也移动,从峰 移动的速度可以计算出样品颗粒的沉降速度 分析性超速离心机和主要特点就是能在短时间内,用少量样品就可以得到一些重 要信息,能够确定生物大分子是否存在,其大致的含量,计算生物大分子的沉降系 数,结合界面扩散,估计分子的大小,检测分子的不均一性及混合物中各组份的比 例,测定生物大分子的分子量,还可以检测生物大分子的构象变化等。 5.3制备性超速离心的分离方法 1.差速沉降离心法 这是最普通的离心法。即采用逐渐增加离心速度或低速和高速交替进行离心,使 沉降速度不同的颗粒,在不同的离心速度及不同离心时间下分批分离的方法。此法一 般用于分离沉降系数相差较大的颗粒。 128
128 命短。 不锈钢管强度大，不变形，能抗热，抗冻，抗化学腐蚀。但用时也应避免接触 强腐蚀性的化学药品，如强酸、强碱等。 塑料离心管都有管盖，离心前管盖必须盖严，倒置不漏液。管盖有三种作用： ①防止样品外泄。用于有放射性或强腐蚀性的样品时，这点尤其重要。②防止样 品挥发。③支持离心管，防止离心管变形。 4. 分析性离心机： 分析性离心机使用了特殊设计的转头和光学检测系统，以便连续地监视物质在一 个离心场中的沉降过程。从而确定其物理性质。 分析性超速离心机的转头是椭圆形的，以避免应力集中于孔处。此转头通过一个 有柔性的轴联接到一个高速的驱动装置上，转头在一个冷冻的和真空的腔中旋转，转 头上有 2～6 个装离心杯的小室，离心杯是扇形石英的，可以上下透光，离心机中装有 一个光学系统，在整个离心期间都能通过紫外吸收或折射率的变化监测离心杯中沉降 着的物质，在预定的期间可以拍摄沉降物质的照片，在分析离心杯中物质沉降情况 时，在重颗粒和轻颗粒之间形成的界面就像一个折射的透镜，结果在检测系统的照像 底板上产生了一个“峰”，由于沉降不断进行，界面向前推进，因此峰也移动，从峰 移动的速度可以计算出样品颗粒的沉降速度。 分析性超速离心机和主要特点就是能在短时间内，用少量样品就可以得到一些重 要信息，能够确定生物大分子是否存在，其大致的含量，计算生物大分子的沉降系 数，结合界面扩散，估计分子的大小，检测分子的不均一性及混合物中各组份的比 例，测定生物大分子的分子量，还可以检测生物大分子的构象变化等。 5.3 制备性超速离心的分离方法： 1. 差速沉降离心法： 这是最普通的离心法。即采用逐渐增加离心速度或低速和高速交替进行离心，使 沉降速度不同的颗粒，在不同的离心速度及不同离心时间下分批分离的方法。此法一 般用于分离沉降系数相差较大的颗粒