化学品毒性鉴定技术规范 2005年6月
化学品毒性鉴定技术规范 2005 年 6 月
目录 一、总则… …3 二、试验方法 (一)第一阶段试验… .…15 1、急性吸入毒性试验 …16 2、急性经皮毒性试验… …20 3、急性经口毒性试验 …23 4、急性眼刺激性/腐蚀性试验… …26 5、皮肤刺激性/腐蚀性试验…32 6、皮肤变态反应试验（皮肤致敏试验）…36 (二)第二阶段试验… …54 1、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验)…55 2、体外哺乳动物细胞染色体畸变试验…。 …62 3、体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验… …68 4、体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验… …75 5、哺乳动物精原细胞/初级精母细胞染色体畸变试验，或…79 精子畸形试验…87 6、啮齿类动物显性致死试验… …90 7、免疫毒性评价试验方法… …95 8、亚急性吸入(14/28天)毒性试验 …104 9、亚急性经皮(21/28天)毒性试验 …110 10、亚急性经口(28天)毒性试验 …115 (三)第三阶段试验… …121 1、亚慢性吸入毒性试验…122 2、亚慢性经皮毒性试验……126 3、亚慢性经口毒性试验… …130
1 目 录 一、总则………………………………………………………………………………3 二、试验方法 （一）第一阶段试验…………………………………………………………………15 1、急性吸入毒性试验 ……………………………………………………………16 2、急性经皮毒性试验……………………………………………………………20 3、急性经口毒性试验 ……………………………………………………………23 4、急性眼刺激性/腐蚀性试验……………………………………………………26 5、皮肤刺激性/腐蚀性试验………………………………………………………32 6、皮肤变态反应试验（皮肤致敏试验）………………………………………36 （二）第二阶段试验………………………………………………………………54 1、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames 试验）………………………………55 2、体外哺乳动物细胞染色体畸变试验…………………………………………62 3、体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验……………………………………68 4、体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验…………………………………75 5、哺乳动物精原细胞/初级精母细胞染色体畸变试验，或…………………79 精子畸形试验…………………………………………………………………87 6、啮齿类动物显性致死试验……………………………………………………90 7、免疫毒性评价试验方法………………………………………………………95 8、亚急性吸入（14/28 天）毒性试验…………………………………………104 9、亚急性经皮（21/28 天）毒性试验…………………………………………110 10、亚急性经口（28 天）毒性试验……………………………………………115 （三）第三阶段试验………………………………………………………………121 1、亚慢性吸入毒性试验…………………………………………………………122 2、亚慢性经皮毒性试验…………………………………………………………126 3、亚慢性经口毒性试验…………………………………………………………130
4、致畸试验… …136 5、两代繁殖毒性试验… …142 6、迟发性神经毒性试验……147 (四)第四阶段试验… …153 1、慢性吸入毒性试验… …154 2、慢性经皮毒性试验… …160 3、慢性经口毒性试验… …166 4、致癌试验，或… …172 慢性毒性/致癌性合并试验 …180 5、毒物代谢动力学试验……189 6、接触人群调查与观察（参考国内外有关专著或教科书） (五)参考试验 …196 1、皮肤变态反应试验-局部淋巴结法… …197 2、大肠杆菌回复突变试验… …202 3、酵母菌基因突变试验… …210 4、体外哺乳动物细胞正向基因突变试验 …214 5、果蝇伴性隐性致死试验… …220 6、枯草杆菌基因重组试验…224 7、体外哺乳动物细胞程序外DNA合成(UDS)试验…232 8、体内哺乳动物外周血细胞微核试验…238 9、体外哺乳动物姊妹染色单体交换(SCE)试验… …244 10、体内哺乳动物骨髓细胞姊妹染色体交换(SCE)试验… …250 11、繁殖/生长发育毒性筛选试验… …256 12、亚急性毒性合并繁殖/发育毒性筛选试验… …262 13、一代繁殖试验…269 14、神经毒性筛选组合试验……274 2
2 4、致畸试验………………………………………………………………………136 5、两代繁殖毒性试验……………………………………………………………142 6、迟发性神经毒性试验…………………………………………………………147 （四）第四阶段试验………………………………………………………………153 1、慢性吸入毒性试验……………………………………………………………154 2、慢性经皮毒性试验……………………………………………………………160 3、慢性经口毒性试验……………………………………………………………166 4、致癌试验，或…………………………………………………………………172 慢性毒性/致癌性合并试验 ………………………………………………180 5、毒物代谢动力学试验 ………………………………………………………189 6、接触人群调查与观察（参考国内外有关专著或教科书） （五）参考试验……………………………………………………………………196 1、皮肤变态反应试验-局部淋巴结法…………………………………………197 2、大肠杆菌回复突变试验………………………………………………………202 3、酵母菌基因突变试验………………………………………………………210 4、体外哺乳动物细胞正向基因突变试验……………………………………214 5、果蝇伴性隐性致死试验………………………………………………………220 6、枯草杆菌基因重组试验………………………………………………………224 7、体外哺乳动物细胞程序外 DNA 合成（UDS）试验……………………………232 8、体内哺乳动物外周血细胞微核试验…………………………………………238 9、体外哺乳动物姊妹染色单体交换（SCE）试验………………………………244 10、体内哺乳动物骨髓细胞姊妹染色体交换（SCE）试验……………………250 11、繁殖/生长发育毒性筛选试验………………………………………………256 12、亚急性毒性合并繁殖/发育毒性筛选试验…………………………………262 13、一代繁殖试验………………………………………………………………269 14、神经毒性筛选组合试验……………………………………………………274
总则 General Principles
3 总则 General Principles
1依据 根据《中华人民共和国职业病防治法》、《作业场所使用有毒物品劳动保护条 例》、《危险化学品安全管理条例》、《职业卫生技术服务机构管理办法》、《化学品 毒性鉴定管理规范》制定本规范。 2范围 本规范规定了化学品毒性鉴定的毒理学检测程序、项目和方法，适用于化学 品毒性鉴定和评价。 3规范性引用文件 GB14924-2001 实验动物与饲料标准 GB14925-2001 实验动物环境及设施 OECD Guideline for Testing of Chemicals (1981~2002) USA Code of Federal Regulations,Title 40,Volume 28 USEPA OPPTS Health Effects Test Guidelines (1996~2000) 4术语解释 化学品(Chemicals):本规范所称化学品，系指工业用和民用的化学原料、 中间体、产品等单分子化合物、聚合物以及不同化学物组成的混合剂与产品。不 包括法律、法规已有规定的食品、食品添加剂、化妆品、药品等。 急性吸入毒性(Acute Inhalation Toxicity):实验动物短时间(24h内) 持续吸入一种可吸入性受试样品后，在短期内出现的健康损害效应。 半数致死浓度(Median Lethal Concentration,LCso):指在一定时间内经呼 吸道吸入受试样品后引起受试动物发生死亡概率为50%的浓度。以单位体积空气 中受试样品的质量(mgm3)来表示。 急性经皮毒性（Acute Dermal Toxicity):实验动物短时间(24h内)经皮 肤接触受试样品后，在短期内出现的健康损害效应。 急性经口毒性（Acute Oral Toxicity):一次或在24h内多次经口给予实验 动物受试样品后，动物在短期内出现的健康损害效应。 半数致死剂量(Median Lethal Dose,LDso):在一定时间内经口或经皮给 予受试样品后，使受试动物发生死亡概率为50%的剂量。以单位体重接受受试样
4 1 依据 根据《中华人民共和国职业病防治法》、《作业场所使用有毒物品劳动保护条 例》、《危险化学品安全管理条例》、《职业卫生技术服务机构管理办法》、《化学品 毒性鉴定管理规范》制定本规范。 2 范围 本规范规定了化学品毒性鉴定的毒理学检测程序、项目和方法，适用于化学 品毒性鉴定和评价。 3 规范性引用文件 GB 14924-2001 实验动物与饲料标准 GB 14925-2001 实验动物 环境及设施 OECD Guideline for Testing of Chemicals (1981 ~ 2002) USA Code of Federal Regulations, Title 40, Volume 28 USEPA OPPTS Health Effects Test Guidelines (1996 ~ 2000) 4 术语解释 化学品（Chemicals）：本规范所称化学品，系指工业用和民用的化学原料、 中间体、产品等单分子化合物、聚合物以及不同化学物组成的混合剂与产品。不 包括法律、法规已有规定的食品、食品添加剂、化妆品、药品等。 急性吸入毒性（Acute Inhalation Toxicity）：实验动物短时间（24h内） 持续吸入一种可吸入性受试样品后，在短期内出现的健康损害效应。 半数致死浓度（Median Lethal Concentration，LC50）：指在一定时间内经呼 吸道吸入受试样品后引起受试动物发生死亡概率为50%的浓度。以单位体积空气 中受试样品的质量(mg/m3 )来表示。 急性经皮毒性（Acute Dermal Toxicity）：实验动物短时间（24h内）经皮 肤接触受试样品后，在短期内出现的健康损害效应。 急性经口毒性（Acute Oral Toxicity）：一次或在24h内多次经口给予实验 动物受试样品后，动物在短期内出现的健康损害效应。 半数致死剂量（Median Lethal Dose，LD50）：在一定时间内经口或经皮给 予受试样品后，使受试动物发生死亡概率为50%的剂量。以单位体重接受受试样