离子交换最高 颗粒 pH稳定性 耐压 最快 介质名称载量 特性/应用 工作 流速 (cm/h) 纯化低分子量蛋 白、多肽、核苷以 QAE Sephadex.2amg甲状腺球|干粉及巨大分子 2~10 0.11 蛋白 40~120(Mx>200000,在 80mgHSA 工业传统应用上具 有重要作用 批量生产和预处理 2mg甲状腺球干粉 分离中等大小 0.01 A-50 40~120的生物分子 80mgHSA (30~200000) 纯化低分子量蛋 白、多肽、核苷以 SP Sephadex70mg牛羰合血干粉及巨大分子 C-25 红蛋白230mg40~120(M>20000在 核糖核酸酶 工业传统应用上具 有重要作用 8mg IgG 批量生产和预处理 SP Sephadex l10mg牛羰合 干粉用,分离中等大小 2~10 0.01 C-50 血红蛋白 40~120 的生物分子 (30~200000) lmg甲状 纯化低分子量蛋 腺球蛋 白、多肽、核苷以 DEAE Sephadex A-25 30mg hAS 干粉及巨大分子 40mga乳清/40-120(M>20000 在工业传统应用 具有重要作用 批量生产和预处理 DEAE Sephadex 2ng甲状 用,分离中等大小 干粉 的生物分子 A-50 腺球蛋 10g5|0-120|(M2000d 工作传统应用上具 有重要作用 纯化低分子量蛋 白、多肽、核苷以 CM Sephadex70mg牛羰合血干粉及巨大分子 6~13 0.13 红蛋白190mg40~120(Mx>20000在 核糖核酸酶 工业传统应用上具 有重要作用 「批量生产和预处理 CM Sephadex|140mg牛羰合 干粉|用,分离中等大小 6~10 0.01 C-50 血红蛋白12mg40-120的生物分子 核糖核酸酶 (30~200000)
离子交换 介质名称 最高 载量 颗粒 大小 （μ m ） 特性 /应用 p H 稳定性 工作 耐压 (MPa) 最快 流速 （cm/h ） QAE Sephadex A-25 1.2mg 甲状腺球 蛋白 80mgHSA 干粉 40 ～120 纯化低分子量蛋 白、多肽、核苷以 及巨大分子 （Mr>200000）,在 工业传统应用上具 有重要作用 2 ～10 0.11 475 QAE Sephadex A-50 1.2mg 甲状腺球 蛋白 80mgHSA 干粉 40 ～120 批量生产和预处理 用，分离中等大小 的生物分子 （30～200000 ） 2 ～11 0.01 45 SP Sephadex C-25 1.1mg IgG 70mg 牛羰合血 红蛋白 230mg 核糖核酸酶 干粉 40 ～120 纯化低分子量蛋 白、多肽、核苷以 及巨大分子 （Mr>200000）,在 工业传统应用上具 有重要作用 2 ～10 0.13 475 SP Sephadex C-50 8mg IgG 110mg 牛羰合 血红蛋白 干粉 40 ～120 批量生产和预处理 用，分离中等大小 的生物分子 （30 ～200000 ） 2 ～10 0 .01 45 DEAE Sephadex A-25 1mg 甲状 腺球蛋白 30mg HAS 140mg a -乳清 蛋白 干粉 40 ～120 纯化低分子量蛋 白、多肽、核苷以 及巨大分子 （Mr>200 000 ） , 在工业传统应用上 具有重要作用 2 ～ 9 0.11 475 DEAE Sephadex A-50 2mg 甲状 腺球蛋白 110mg HSA 干粉 40 ～120 批量生产和预处理 用，分离中等大小 的生物分子 （ Mr>200 000），在 工作传统应用上具 有重要作用 2 ～ 9 0.11 45 CM Sephadex C-25 1.6mg IgG 70mg 牛羰合血 红蛋白 190mg 核糖核酸酶 干粉 40 ～120 纯化低分子量蛋 白、多肽、核苷以 及巨大分子 （Mr>200 000），在 工业传统应用上具 有重要作用 6 ～13 0.13 475 CM Sephadex C-50 7mg IgG 140mg 牛羰合 血红蛋白 120mg 核糖核酸酶 干粉 40 ～120 批量生产和预处理 用，分离中等大小 的生物分子 （30 ～200000 ） 6 ～10 0.01 45
十二、常用缓冲溶液的配制方法 1.甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05moL) X毫升0.2mol/L甘氨酸+Y毫升02mol/LHCI,再加水稀释至200毫升 44.0 l14 8.2 16.8 5.0 甘氨酸分子量=7507,0.2mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升 2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05mol) Ⅹ毫升0.2mo/L邻苯二甲酸氢钾+0.2mol/LHCl,再加水稀释到20毫升 4.070 1.470 3.960 3.295 3.6 0.597 2.022 邻苯二甲酸氢钾分子量=20423,0.2mol/L邻苯二甲酸氢溶液含4085克/升 3.磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液 0.2mol/L 0.1mol/L 0.2mol/L 0.1mol/L NazHPO4柠檬酸 Na2HPO4 柠檬酸 (毫升) (毫升) 2.2 0.40 10.60 2.4 18.76 l1.15 2.6 2.18 1782 5.6 11.60 8.40 2.8 3.17 16.83 4.11 15.89 7.37 3.2 6.2 5.70 14.30 13.85 13.56 545 7.10 6.8
十二、常用缓冲溶液的配制方法 1． 甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L） X 毫升 0.2 mol/L 甘氨酸+Y 毫升 0.2 mol/L HCI，再加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 2.0 2.4 2.6 2.8 50 50 50 50 44.0 32.4 24.2 16.8 3.0 3.2 3.4 3.6 50 50 50 50 11.4 8.2 6.4 5.0 甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L 甘氨酸溶液含 15.01 克/升。 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L） X 毫升 0.2 mol/L 邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到 20 毫升 pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 5 5 5 5 5 4.070 3.960 3.295 2.642 2.022 3.2 3.4 3.6 3.8 5 5 5 5 1.470 0.990 0.597 0.263 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L 邻苯二甲酸氢溶液含 40.85 克/升 3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53
4.2 l1.72 7.2 17.39 2.61 8.82 11.1 7.4 4.8 9.86 10.14 7.8 0.85 1945 NampO4分子量=1498,0.2molL溶液为2840克/升 Na,hPo4-2H2O分子量=17805,0.2mol/L溶液含35.01克/升。 C4H2O·H2O分子量=210.14,0.1mol/L溶液为21.01克/升。 4.柠酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH|钠离子浓度柠檬酸(克)氢氧化钠(克)盐酸(毫升)最终体积 (mol/L) CHO· H20NaOH97%LHC1(浓) (升)① 0.20 0.20 210 0.20 210 0.20 210 0.35 0.45 285 105 ①使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量50%氢氧化钠溶液 或浓盐酸调节,冰箱保存。 5.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1mol/L 0.1 mol/L 0.1 mol/L 0.1 mol/L 0.1 mol/L 柠檬酸柠檬酸钠 柠檬酸柠檬酸钠 (毫升) (毫升) (毫升) 3.0 18.6 14 5.0 8.2 3.2 172 5.2 5.4 13.6 14.0 6.0 5.8 4.7 16.2 7.7 172
4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 17.39 18.17 18.73 19.15 19.45 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55 Na2HPO4 分子量 = 14.98，0.2 mol/L 溶液为 28.40 克/升。 Na2HPO4-2H2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液含 35.01 克/升。 C4H2O7·H2O 分子量 = 210.14，0.1 mol/L 溶液为 21.01 克/升。 4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH 钠离子浓度 （mol/L） 柠檬酸（克） C6H8O7·H2O 氢氧化钠(克) NaOH 97% 盐酸（毫升） HCl（浓） 最终体积 （升）① 2.2 3.1 3.3 4.3 5.3 5.8 6.5 0.20 0.20 0.20 0.20 0.35 0.45 0.38 210 210 210 210 245 285 266 84 83 83 83 144 186 156 160 116 106 45 68 105 126 10 10 10 10 10 10 10 ①使用时可以每升中加入 1 克克酚，若最后 pH 值有变化，再用少量 50% 氢氧化钠溶液 或浓盐酸调节，冰箱保存。 5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L） pH 0.1 mol/L 柠檬酸 （毫升） 0.1 mol/L 柠檬酸钠 （毫升） pH 0.1 mol/L 柠檬酸 （毫升） 0.1 mol/L 柠檬酸钠 （毫升） 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 18.6 17.2 16.0 14.9 14.0 13.1 12.3 11.4 1.4 2.8 4.0 5.1 6.0 6.9 7.7 8.6 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 8.2 7.3 6.4 5.5 4.7 3.8 2.8 2.0 11.8 12.7 13.6 14.5 15.3 16.2 17.2 18.0