置于蒸发皿中，加入海砂约20g,搅匀后于沸水浴上蒸干，然后在95-105°C下干燥。研细后 全部转入滤纸筒内，用沾有乙醚的脱脂棉擦净所用器皿，并将棉花也放入滤纸筒内， 2、索氏提取器的清洗 将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在103C±2”C的烘箱内干 燥至恒重（前后两次称量差不超过2g). 3、样品测定 (1)将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶，由抽提器冷凝管 上端加入乙藤或石油藤至瓶内容积的2/3处，通入冷凝水，将底瓶浸没在水浴中加热，用一小团 脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口 (②)抽提温度的控制：水浴温度应控制在使提取液在每6-8min回流 一次为宜 (③)抽提时间的控制：抽提时间视试样中粗脂肪含最而定，一般样品提取6-12h,坚果样品 提取约16。提取结束时，用毛玻璃板接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。 (④)提取完毕。取下脂肪烧瓶，回收乙醚或石油醚。待烧瓶内乙醚仅剩下1一2L时，在水浴 上赶尽残留的溶剂，于95一105°C下干燥2h后，置于干燥器中冷却至室温，称量。继续干燥30mi 后冷却称量，反复干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg)。 五、结果计算 1.数据记录表 1、 样品的质量/ 脂肪烧瓶的质量/g 脂肪和脂肪烧瓶的质量/g 第一次第二次第三次恒重值 X= m,-m×100 m 式中：X一一样品中粗脂肪的质量分数，%： m—一样品的质量，g: 。一脂防烧瓶的质量， 脂肪和脂肪烧瓶的质量，g 六、注意事项 1、抽提剂乙酷是易燃，易爆物质，应注意通风并且不能有火源。 、样品滤纸色的高度不能超过虹吸管，否则上部脂肪不能提尽而造成误差。 3 样品和醚浸出物在烘箱中干燥时，时间不能过长，以防止极不饱和的脂肪酸受热氧化而 增加质量 4、脂肪烧瓶在烘箱中干燥时，瓶口侧放，以利空气流通。而且先不要关上烘箱门，与90°C 以下鼓风干燥10一20min,驱尽残余溶剂后再将烘箱门关紧，升至所需温度。 5、乙醚若放置时间过长，会产生过氧化物。过氧化物不稳定，当蒸缩或干燥时会发生爆炸， 故使用前应严格检查，并除去过氧化物 检查方法：取5ml乙醚于试管中，加KI(100g/L)溶液1mL,充分振摇1min。静置分 层。若有过氧化物则放出游离碘，水层是黄色（或加4滴5g/L淀粉指示剂显蓝色）
置于蒸发皿中,加入海砂约 20 g,搅匀后于沸水浴上蒸干,然后在 95-105°C 下干燥。研细后 全部转入滤纸筒内，用沾有乙醚的脱脂棉擦净所用器皿，并将棉花也放入滤纸筒内。 2、 索氏提取器的清洗 将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在 103°C±2°C 的烘箱内干 燥至恒重（前后两次称量差不超过 2mg）。 3、 样品测定 (1) 将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶，由抽提器冷凝管 上端加入乙醚或石油醚至瓶内容积的 2/3 处，通入冷凝水，将底瓶浸没在水浴中加热，用一小团 脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口。 (2) 抽提温度的控制：水浴温度应控制在使提取液在每 6-8min 回流一次为宜。 (3) 抽提时间的控制: 抽提时间视试样中粗脂肪含量而定，一般样品提取 6-12h，坚果样品 提取约 16h。提取结束时，用毛玻璃板接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。 (4) 提取完毕。取下脂肪烧瓶，回收乙醚或石油醚。待烧瓶内乙醚仅剩下 1—2mL 时，在水浴 上赶尽残留的溶剂，于 95—105°C 下干燥 2h 后，置于干燥器中冷却至室温，称量。继续干燥 30min 后冷却称量，反复干燥至恒重（前后两次称量差不超过 2mg）。 五、结果计算 1.数据记录表 1、 计 算 公 式 X = m m1 m0 − ×100 式中：X-样品中粗脂肪的质量分数,%; m-样品的质量,g; m0 -脂肪烧瓶的质量,g; m1 -脂肪和脂肪烧瓶的质量,g. 六、注意事项 1、 抽提剂乙醚是易燃，易爆物质，应注意通风并且不能有火源。 2、 样品滤纸色的高度不能超过虹吸管，否则上部脂肪不能提尽而造成误差。 3、 样品和醚浸出物在烘箱中干燥时，时间不能过长，以防止极不饱和的脂肪酸受热氧化而 增加质量。 4、 脂肪烧瓶在烘箱中干燥时，瓶口侧放，以利空气流通。而且先不要关上烘箱门，与 90°C 以下鼓风干燥 10—20min，驱尽残余溶剂后再将烘箱门关紧，升至所需温度。 5、 乙醚若放置时间过长，会产生过氧化物。过氧化物不稳定，当蒸馏或干燥时会发生爆炸， 故使用前应严格检查，并除去过氧化物。 （1） 检查方法：取 5mL 乙醚于试管中，加 KI(100g/L)溶液 1mL，充分振摇 1min。静置分 层。若有过氧化物则放出游离碘，水层是黄色（或加 4 滴 5 g/L 淀粉指示剂显蓝色）， 样品的质量 m/g 脂肪烧瓶的质量 m0/g 脂肪和脂肪烧瓶的质量 m1/g 第一次 第二次 第三次 恒重值
则该乙醚需处理后使用。 (2)去除过氧化物的方法：将乙醚倒入蒸馏瓶中加一段无锈铁丝或铝丝，收集重蒸馏乙 6、反复加热可能会因脂类氧化而增重，质最增加时，以增重前的质最为恒重 思考题： 1、简述索氏抽提器的提取顶理及应用范围？ 湖湿的样品可否采用乙醚直接提取？为什么 使用乙酰作脂肪提取溶剂时，应注意的事项有哪些？为什么？ 实验六 鲜牛乳中总脂肪含量的测定（巴布科克法） 一、目的与要求 1、学习四布科点法测定鲜生奶中脂肪含量的原理与方法 2、观察产生测定误差的现象并分析原因。 二、原理 利用硫酸溶解中的非脂成分，将牛奶中的酪蛋白钙盐变成可溶性的重硫酸酪蛋白化合物，使脂 肪球被破坏，脂肪游离出来，再经加热和离心，促使脂肪完全分离，直接读取脂肪层的数值，便可 十算出被测乳的含脂率 过程的主要反应如下： NH,R(COOH)Ca +3H SO NH,R(COOH)+3CaSo 酪蛋白钙盐 酪蛋白 NH2R(COOH)。+H2SO,→H,SO,NH2R(COOH)。 重硫酸酪蛋白 三、仪器与试剂 1、仪器 (1)巴布科克氏乳脂瓶0-8%：（见图3-4） (②)乳脂离心机 (3)牛乳吸管：17.6mL ⊕ (40量杯：20mL。 2、试剂及材料 (1)硫酸：相对密度为d1.820一1.82 (2)消毒鲜牛乳（市售）
则该乙醚需处理后使用。 （2） 去除过氧化物的方法：将乙醚倒入蒸馏瓶中加一段无锈铁丝或铝丝，收集重蒸馏乙 醚。 6、 反复加热可能会因脂类氧化而增重，质量增加时，以增重前的质量为恒重。 思考题： 1、 简述索氏抽提器的提取原理及应用范围？ 2、 潮湿的样品可否采用乙醚直接提取？为什么？ 3、 使用乙醚作脂肪提取溶剂时，应注意的事项有哪些？为什么？ 实验六 鲜牛乳中总脂肪含量的测定（巴布科克法） 一、 目的与要求 1、 学习巴布科克法测定鲜牛奶中脂肪含量的原理与方法。 2、 观察产生测定误差的现象并分析原因。 二、 原理 利用硫酸溶解中的非脂成分，将牛奶中的酪蛋白钙盐变成可溶性的重硫酸酪蛋白化合物，使脂 肪球被破坏，脂肪游离出来，再经加热和离心，促使脂肪完全分离，直接读取脂肪层的数值，便可 计算出被测乳的含脂率。 过程的主要反应如下： 2 6 3 3 4 2 6 3 4 NH ·R(COOH) Ca + 3H SO → NH R(COOH) + CaSO 酪蛋白钙盐 酪蛋白 2 6 2 4 2 4 2 6 NH· R(COOH) + H SO → H SO ·NH ·R(COOH) 重硫酸酪蛋白 三、 仪器与试剂 1、 仪器 (1)巴布科克氏乳脂瓶 0-8%;（见图 3-4） (2)乳脂离心机; (3)牛乳吸管：17.6mL; (4)量杯：20mL。 2、 试剂及材料 （1）硫酸：相对密度为d 20 4 1.820—1.825 （2）消毒鲜牛乳（市售）
四、测定步骤 1、用牛乳吸管吸取均匀的牛乳17.6mL注入巴布科克氏乳脂瓶中（注意吸管应提起，不能塞 住到胎瓶口)。 2、量取硫酸17.5L,沿瓶颈缓慢流入瓶内，手持瓶颈回旋摇动2-3min使硫酸与牛乳充分混 合，至溶液呈均匀棕黑色，不可有块粒存在。 3、将乳脂瓶放入离心机，以每分钟1000转的转速离心5驷in 小、取出，加入80°C的热水，使瓶内液体至瓶颈基部，离艺最，再加入80°C热 水至液面接近2或5刻度处，再离心1min。 5、取出，置于55-60°C水浴中水浴5min(水浴的水面必须高于乳脂瓶中的脂肪层)，取出后 立即读取脂肪层最高与最低点所古的格数，即为样品含脂肪的质量百分率 五、实验结果计算 将测定结果记录于下表： 样品名称 编号 上刻度 下刻度 结果(%) 平均值 六、注意事项 1、每组按编号取两个乳脂瓶进行测定。放入离心机时，必须对称放置。 2、硫酸的浓度和用量必须严格按照规定，沿瓶壁慢慢加入，回旋摇动，使充分混合，否则易使 脂肪层产生黑色块粒 3、平行试验误差不要过大，若脂肪层有黑色块，不能用平均值表示结果 思考题 1、充分掌握和理解测定步骤和注意事项。 2、一般鲜牛乳的d平均为1.030，测定时，吸取17.6l牛乳，其脂肪的相对密度平均为0.9， 乳脂瓶的8个刻度的容积为1.6mL,试计算每一刻度表示的脂肪含量？ 3、根据你实验的结果，分析影响实验的因素，探讨实验的经验或教训。 实验七食品中还原糖含量的测定 方法一：直接滴定法 一、目的与要求 1、学习直接滴定法测定还原糖的原理，并掌握其测定的操作技术。 2、通过对实验结果的分析，了解影响测定准确性的因素。 二、 原理
四、 测定步骤 1、 用牛乳吸管吸取均匀的牛乳 17.6mL 注入巴布科克氏乳脂瓶中（注意吸管应提起，不能塞 住乳脂瓶口）。 2、 量取硫酸 17.5mL，沿瓶颈缓慢流入瓶内，手持瓶颈回旋摇动 2-3min 使硫酸与牛乳充分混 合，至溶液呈均匀棕黑色，不可有块粒存在。 3、 将乳脂瓶放入离心机，以每分钟 1000 转的转速离心 5min。 4、 取出，加入 80°C 的热水，使瓶内液体至瓶颈基部，再离心 2min 取出，再加入 80°C 热 水至液面接近 2 或 5 刻度处，再离心 1min。 5、 取出，置于 55-60°C 水浴中水浴 5min（水浴的水面必须高于乳脂瓶中的脂肪层），取出后 立即读取脂肪层最高与最低点所占的格数，即为样品含脂肪的质量百分率。 五、 实验结果计算 将测定结果记录于下表 ： 样品名称 编号 上刻度 下刻度 结果（%） 平均值 六、注意事项 1、每组按编号取两个乳脂瓶进行测定。放入离心机时，必须对称放置。 2、硫酸的浓度和用量必须严格按照规定，沿瓶壁慢慢加入，回旋摇动，使充分混合，否则易使 脂肪层产生黑色块粒。 3、平行试验误差不要过大，若脂肪层有黑色块，不能用平均值表示结果。 思考题 1、充分掌握和理解测定步骤和注意事项。 2、一般鲜牛乳的d 20 4 平均为 1.030，测定时，吸取 17.6 mL 牛乳，其脂肪的相对密度平均为 0.9， 乳脂瓶的 8 个刻度的容积为 1.6mL，试计算每一刻度表示的脂肪含量？ 3、根据你实验的结果，分析影响实验的因素，探讨实验的经验或教训。 实验七 食品中还原糖含量的测定 方法一：直接滴定法 一、目的与要求 1、学习直接滴定法测定还原糖的原理，并掌握其测定的操作技术。 2、通过对实验结果的分析，了解影响测定准确性的因素。 二、原理 图 3-4 巴布科克氏乳脂瓶
将等量的碱性酒石酸铜甲液，乙液混合时，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀立即 与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。此络合物与还原糖共热时，二价削 即被还原糖还原为一价的氧化亚铜沉淀，氧化亚铜与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，达到终 点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈淡黄色而指示滴定终点。根据还原 糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品液所消耗的体积，计算还原 糖含量。 三、仪器与试剂 (一)试剂 1、盐酸。 2,碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜(CuS045H0)及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL。 3、碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠、75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氯化钾， 完全溶解后，用水稀释至1000mL,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。 4、乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL. 5、亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化御，加水溶解并稀释至100mL。 6、葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g至96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5l盐酸， 并以水稀释至1000ml。此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖。 7、果糖标准溶液：按试剂6配制操作，配制每毫升标准溶液相当于1.0mg果糖。 8、乳糖标准溶液：按试剂6配制操作，配制每毫升标准溶液相当于1.0mg的乳糖 9、转化糖标准溶液：准确称取0.9500g纯蔗糖，用100mL水溶解，置于具塞三角瓶中加入6m0l/L 盐酸5mL,在68℃~70℃水浴中加热15min,放置至室温定容至1000mL,每毫升标准溶液相当于1.0mg 转化糖。 (二)仪器 1、定糖滴定装置(150ml三角瓶，匹配的胶塞， 25mL酸式滴定管)。如图3所示。 2、电炉：500W。 四、实验步聚 (一)样品处理 1、水果硬糖：称取样品约2g左右（精确至100mg) 加水溶解并定容至250mL,摇匀后备用。 图3-还原糖测定滴定装置 2、乳类、乳制品及含蛋白质的冷食类：称取约2.50g5.00g周体试样（吸取25.00mL~50.00mL液体
将等量的碱性酒石酸铜甲液，乙液混合时，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀立即 与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。此络合物与还原糖共热时，二价铜 即被还原糖还原为一价的氧化亚铜沉淀，氧化亚铜与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，达到终 点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈淡黄色而指示滴定终点。根据还原 糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品液所消耗的体积，计算还原 糖含量。 三、仪器与试剂 （一）试剂 1、盐酸。 2、碱性酒石酸铜甲液：称取 15g 硫酸铜（CuS04·5H20）及 0.05g 次甲基蓝，溶于水中并稀释至 1000mL。 3、碱性酒石酸铜乙液：称取 50g 酒石酸钾钠、75g 氢氧化钠，溶于水中，再加入 4g 亚铁氰化钾， 完全溶解后，用水稀释至 1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。 4、乙酸锌溶液：称取 21.9g 乙酸锌，加 3mL 冰乙酸，加水溶解并稀释至 100mL。 5、亚铁氰化钾溶液：称取 10.6g 亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至 100mL。 6、葡萄糖标准溶液：准确称取 1.0000g 至 96℃±2℃干燥 2h 的纯葡萄糖，加水溶解后加入 5mL 盐酸， 并以水稀释至 1000mL。此溶液每毫升相当于 1.0mg 葡萄糖。 7、果糖标准溶液：按试剂 6 配制操作，配制每毫升标准溶液相当于 1.0mg 果糖。 8、乳糖标准溶液：按试剂 6 配制操作，配制每毫升标准溶液相当于 1.0mg 的乳糖。 9、转化糖标准溶液：准确称取 0.9500g 纯蔗糖，用 100mL 水溶解，置于具塞三角瓶中加入 6mol / L 盐酸5mL，在68℃～70℃水浴中加热 15min，放置至室温定容至 1000mL，每毫升标准溶液相当于 1.0mg 转化糖。 （二）仪器 1、定糖滴定装置（150mL 三角瓶，匹配的胶塞， 25mL 酸式滴定管）。如图 3- 所示。 2、电炉：500W。 四、实验步聚 （一）样品处理 1、水果硬糖：称取样品约 2g 左右（精确至 100mg） 加水溶解并定容至 250mL，摇匀后备用。 图 3- 还原糖测定滴定装置 2、乳类、乳制品及含蛋白质的冷食类：称取约 2.50g~5.00g 固体试样（吸取 25.00mL~50.00mL 液体