(三)DNA的聚合反应和有关的酶 DNA复制体系 底物dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP) 模板单链的DNA母链 引物寡核苷酸引物(RNA) 冬其他酶和蛋白质因子 DNA聚合酶(DNA依赖的DNA的聚合酶) 引物酶或RNA聚合酶（引发酶） 解螺旋酶 DNA旋转酶（拓扑异构酶） 单链DNA结合蛋白（原核SSB、真核RPA} DNA连接酶(ligase) 切除引物的酶
（三）DNA的聚合反应和有关的酶 DNA复制体系 v 底物 dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP) v 模板 单链的DNA母链 v 引物 寡核苷酸引物（RNA) v 其他酶和蛋白质因子 （DNA依赖的DNA的聚合酶 ) 引物酶或RNA聚合酶（引发酶） 解螺旋酶 DNA旋转酶（拓扑异构酶） 单链DNA结合蛋白（原核SSB、真核RPA｝ DNA连接酶（ligase) 切除引物的酶
(1)DNA聚合酶 催化反应特点 ※以4种dNTP为底物 ※反应需要接受DNA模板的指导，不能催化游 离的dNTP的聚合。 ※反应需有引物3‘一0H的核酸链 ※链生长方向5”→3 ※产物DNA的性质与模板相同
催化反应特点 ※以4种dNTP为底物 ※反应需要接受DNA模板的指导，不能催化游 离的dNTP的聚合。 ※反应需有引物 3‘－OH的核酸链 ※链生长方向 5’ → 3‘ ※产物DNA的性质与模板相同
DNA聚合酶DNA polymerase)的活性 5'至3的聚合活性（5'→3') NI N2 N3 NIN2 N3 3 3 可+pROH宁 -CH PF yBa
l 5′至3′的聚合活性（ 5′ → 3′ ） p p PPP p p p OH ＋ OH OH 5 5 γβα ＋ PPi N1 N2 N3 N1N2 N3 ′ 5 ′ 3 3′ ′ ′ DNA聚合酶(DNA polymerase)的活性
·核酸外切酶活性 3'→5外切酶活性（校对) 5→3'外切酶活性 5 3 3 5 3'→5外切酶性 5'→3'外切酶活性
l 核酸外切酶活性 3′ →5′外切酶活性（校对） 5′ →3′外切酶活性 5 3 3 5 ′ ′ ′ ′ 3′→5′外切酶活性 5′→3′外切酶活性
DAN聚合酶的种类 E.coli三种DNA聚合酶的性质比较 DNA聚合酶IDNA聚合酶Ⅱ DNA聚合酶Ⅲ 分子量 109KD 120KD >600KD 每个细胞中的分子数 400 17-100 10-20 5'→3聚合活性 + + 37℃转化率核苷酸数 600 30 30,000 /酶分子分钟 5”3外切活性 3'5外切活性 切刻平移活性 对dNTP亲和力 低 低 高 功能 修复 去除引物 修复 复制 填补空缺
E.coli三种DNA聚合酶的性质比较 DNA聚合酶Ⅰ DNA聚合酶Ⅱ DNA聚合酶Ⅲ 分子量 109KD 120KD ＞600KD 每个细胞中的分子数 400 17-100 10-20 5′ →3′聚合活性 + + + 37℃转化率核苷酸数 ／酶分子·分钟 600 30 30,000 5′ →3′外切活性 + - - 3′ →5′外切活性 + + + 切刻平移活性 + - - 对dNTP亲和力 低 低 高 功能 修复 复制 修复 去除引物 填补空缺 DAN聚合酶的种类