吸光度与光程的关系A=bc 吸光度 光源 0.00 检测器 吸光度 光源 0.22 b 检测器 吸光度 样品 光源 0.44 检测器 样品 样品 16
16 吸光度与光程的关系 A = bc 光源 检测器 0.00 吸光度 检测器 b 样品 光源 0.22 吸光度 光源 检测器 0.44 吸光度 b 样品 b 样品
吸光度与浓度的关系A=bc 吸光度 光源 0.00 检测器 吸光度 光源 0.22 检测器 吸光度 b 光源 0.42 检测器
17 吸光度与浓度的关系 A = bc 吸光度 0.00 光源 检测器 吸光度 0.22 光源 检测器 b 吸光度 0.42 光源 检测器 b
朗伯-比尔定律的适用条件 1.单色光 应选用max处或肩峰处测定 2.吸光质点形式不变 离解、络合、缔合会破坏线性关系 应控制条件(酸度、浓度、介质等) 3.稀溶液 浓度增大,分子之间作用增强 18
18 朗伯-比尔定律的适用条件 1.单色光 应选用max处或肩峰处测定 2. 吸光质点形式不变 离解、络合、缔合会破坏线性关系 应控制条件(酸度、浓度、介质等) 3. 稀溶液 浓度增大,分子之间作用增强
8 亚甲蓝阳离子 6 单体2max=660nm 二聚体2max=610nm 2 0 500 580 660 7402(nm) 二 聚体的生成破坏 亚甲蓝阳离子水溶液的吸收光谱 了A与c的线性关系 a.6.36X10-6mol/L b.1.27×104mol/L c.5.97×104mol/L 19
19 (nm) 亚甲蓝阳离子水溶液的吸收光谱 a. 6.36×10-6 mol/L b. 1.27×10-4 mol/L c. 5.97×10-4 mol/L 亚甲蓝阳离子 单体 max= 660 nm 二聚体 max= 610 nm 二聚体的生成破坏 了A与c的线性关系
朗伯-比尔定律的分析应用 溶液浓度的测定 A A= bc 0.8 0.6 工作曲线法 0.4 (校准曲线) 0.2 1 2 3 4 mg/ml 20
20 0 1 2 3 4 mg/ml A * 0.8 0.6 0.4 0.2 0 溶液浓度的测定 A= bc 工作曲线法 (校准曲线) 朗伯-比尔定律的分析应用