第八章高效液相色谱分析 给酒演商常大是 HARBIN LNTVERSTTY OF COMMERCE
第八章 高效液相色谱分析
第一节特点与分类 特点： 高压、高效、高速、高沸点、热不稳定有机及生化 试样的高效分离分析方法。 溶剂 碳酸钙 色谘带 树 苑闲道商業大孕 HARBIN LNTVERSITY OF COMMERCE
第一节 特点与分类 一、特点： 高压、高效、高速、高沸点、热不稳定有机及生化 试样的高效分离分析方法
第二节高效液相色谱法的主要类型及基本原理 液-固吸附色谱(liquid-solid adsorption chromatography) 固定相：固体吸附剂为，如硅胶、氧化铝等，较常使用的是5~ 。 10pm的硅胶吸附剂。 流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。 基本原理：组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸；· 适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有 官能团的化合物和异构体有较高选择性。 缺 点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾。 哈潮清月掌大是 HARBIN LNTVERSTTY OF COMMERCE
第二节 高效液相色谱法的主要类型及基本原理 一、液-固吸附色谱（liquid-solid adsorption chromatography） 固 定 相：固体吸附剂为，如硅胶、氧化铝等，较常使用的是5～ 10μm的硅胶吸附剂。 流 动 相：各种不同极性的一元或多元溶剂。 基本原理：组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸； 适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有 官能团的化合物和异构体有较高选择性。 缺 点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾
液-液分配色谱((liquid-liquid partition chromatography) 固定相与流动相均为液体（互不相溶）；. 基本原理：组分在固定相和流动相上的分配； 流动相：对于亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流动相的极 性小于固定液的极性（正相normal phase),反之，流 动相的极性大于固定液的极性（反相reverse phase)'。 正相与反相的出峰顺序相反； 固定相：早期涂渍固定液，固定液流失，较少采用； 化学键合固定相：（将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶 (担体)表面的游离羟基上。C-18柱（反相柱）。 疮潮清月業大孕 HARBIN LNTVERSITY OP COMMERCE
二、液-液分配色谱（liquid-liquid partition chromatography） 固定相与流动相均为液体（互不相溶）； 基本原理：组分在固定相和流动相上的分配； 流 动 相：对于亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流动相的极 性小于固定液的极性（正相 normal phase），反之，流 动相的极性大于固定液的极性（反相 reverse phase）。 正相与反相的出峰顺序相反； 固 定 相：早期涂渍固定液，固定液流失，较少采用； 化学键合固定相：（将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶 （担体）表面的游离羟基上。C-18柱（反相柱）
三、离子交换色谱 (ion-exchange chromatography) 固定相：阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂； 流动相：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶液；阳离子离 子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液； 基本原理：组分在固定相上发生的反复离子交换反应；组分与离子交换 剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。 亲和力大，保留时间长： 阳离子交换：R一SO,H+M=R—SO,M+H+ 阴离子交换：R-NROH+X=R—NR4X+OH 应 用：离子及可离解的化合物，氨基酸、核酸等。 给源渭商業大是 HARBIN LNTVERSTTY OF COMMERCE
三、离子交换色谱（ion-exchange chromatography） 固 定 相：阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂； 流 动 相：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶液；阳离子离 子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液； 基本原理：组分在固定相上发生的反复离子交换反应；组分与离子交换 剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。 亲和力大，保留时间长； 阳离子交换：R—SO3H+M+=R—SO3M+H+ 阴离子交换：R—NR4OH+X-=R—NR4X+OH- 应 用：离子及可离解的化合物，氨基酸、核酸等