「族（基团）专一性 结构专一性 相对专一性 作用的专一性 绝对专一性 立体异构专一性 结构专一性指酶作用干一定的化学结构。选择键、基团 族专一性：可作用于一类或一些结构很相似的底物。 酯酶：RCO RCOO-+R OH+H+ 选择缄 葡萄糖甘梅 蛋白酶 选择键及一端基团 绝对专一性：只能作用于某一底物。 选择键及两端基团 联德蔗糖酶、麦芽糖酶 立松异构专一性 立体异构专一性指酶作用干一定的立体结构。选基团位置 旋光异构专 性 D 麦芽糖纤维二糖 几何异构专一性 、反 2、专一性机理 锁与钥匙学说 锁钥学说1894年，Fisher提出 碍的活性中心与底物结构就象锁孔与钥(y0)匙之间的相互嵌合关系 但它不能解释可逆反应、竞争性抑制，在此基础上提出诱导契合学说 诱导契合学说 详见底10 酶的活性中心与底物有相近吻合的结构，当二者接近时，底物诱导腾活性中心 构象变化，变得和底物结构契合， 六、酶活力测定及分离纯化（掌握） 1、活力的测定 (1)活力南活力是指悔催化某一化学反应的能力。 用在一定条件下所催化的某一化学反应的速度来表示。 和化学反应速度一样，为浓度变化量/时间变化量（摩尔/升·秒） 速彦浏定原测 测初速度 (△S/S<5%= S底物原始量 SP易测者，但以P为佳 [$]>>[E],条件最适，无抑制微活剂 (2)南（活力）单位：(U,U) 在一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需的座量。 国际单位在最适的反应条件(25℃)下，每分钟内催化一微摩尔底物转化为产物 的南量定为一个南活力单位，即 lIU=lμmol/min 卡达尔在最适条件下，每秒钟内使1摩尔底物转化为产物所需的悔量定为1kt 单位， Ikat=6×107U 自定义 (3)比活力 表示酶制剂的纯度 单位南制剂中的活力单位数
活力单位数/毫克或摩尔酶制剂 (4)测定方法 求出速度，除以活力单位，即为单位数 速度测定常用方法 分光光度法 荧光光度法 同位素标记法 由化些寸 最常用分光光度法 直接比色分析 产物有特征吸攻峰如NAD一NADH A340nm 化学偶联分析法产物无，但可显色如淀粉→葡萄桔+C如“砖红色 酶偶联分析法 产物无，且不可显色，与另一酶促反应偶联 知萄萄糖→6砖酸葡萄糖 +NAD→6-磷酸葡萄糖酸+NAD 2、分离纯化 工业上大多采用微生物发酵的方法来杂得大量悔制剂。 优点：不受气候、地理条件的限制，动、植物体内的南大多可从微生物体内找到， 微生物繁殖快，产神量山丰富。还可以通过选育常种来提高酶的产量和用康价原料大量生产。 分离纯化的一个基太零，地纯化，结品成荆 方法：1.根据溶解度不同（盐析法、有机溶剂沉淀 等电点沉淀法 选择性沉淀法 2.根据南与杂蛋白分子大小的差别（凝胶过滤法、超离心法）：3.根据，和杂蛋白与吸附剂 之间吸附与解吸附性质的个同（吸附分离法）：4.根据带电性质（离子交换层折法、电泳分 离法、等电聚焦层析法)：5.根据酶与杂蛋白的稳定性差别（选择性变性法）：6，根据南梅与底 物、轴因子或抑制剂之间的专一性亲和作用（亲和层析法）。 酶的纯化倍数与产率计算 比活力■活力单位数毫克蛋白（氮》 纯化倍数=该次比活力/第一次比活力 产率%（回收率）=每次总活力/第一次总活力X100 酶的纯化鉴定： 聚丙烯酰胺凝胶电泳法、等电聚焦电泳法等 梅的保存：1、低温(04℃，-20℃)：2、高浓度较稳定： 3、加入稳定剂：4、固定化：5，干燥。 七、核酶、抗体酶、同工酶（熟悉） 1、核酶 具有催化功能的RNA, 应用前景用于破坏病毒及癌细胞的基因表达 理论意义提出了生物大分子和生命起源的新概念，促进进化研究。 (认为分子进化过程中有一个RNA时期，现在的核酶是活化石) 2、抗体梅 具有催化功能的免疫球蛋白（抗体） 由于抗体酶具有高度底物专一性，在临床上治疗和合成立体专一性化学物 质上具有重要应用价值