续前 四、PLC的特点和应用 三高”“一快”“一广 高柱效一n=104片/米,柱效高(远高于一般LC) 高灵敏度 高选择性 分析速度快 应用范围广泛(可分析80%有机化合物)
续前 四、HPLC的特点和应用 “三高” “一快” “一广” 高柱效——n=104片/米,柱效高(远高于一般LC) 高灵敏度 高选择性 分析速度快 应用范围广泛(可分析80%有机化合物)
第二节 基本理论和条件选择 热力学理论:塔板理论一 平衡理论 基础 动力学理论:速率理论一Vander方程 塔板理论 二、 速率理论 HPLC法中分离条件的选择
第二节 基本理论和条件选择 热力学理论:塔板理论——平衡理论 基础 动力学理论:速率理论——Vander方程 一、塔板理论 二、速率理论 三、HPLC法中分离条件的选择
塔板理论 a=Lnm=岛=55品2P=6号 g-=l哈-5务
一、塔板理论 H理 = L / n 理 2 2 1 2 2 ( ) 5.54( ) 16( ) W t W t t n R R R = = = 理 Heff L neff = / 2 1 2 ' 2 ' 16( ) 5.54( ) W t W t n R R eff = = 0 ' t t k R = 2 ) 1 ( k k n n eff + = 理
速率理论(与GC对比) 1. GC:H=A+B/u+C,u(填充柱) 或H=B/u+Cu(毛细管柱) A=22·dp Ac2·dp B=2y:Dm=2y·Dg B tR:B D D,或D 7 √M C=Cm+C=Cg+C,=CC∝ df- D
二、速率理论(与GC对比) GC:H = A+ B/ u +C u (填充柱) 或 H = B/u +Cu (毛细管柱) A = 2 dp A dp B Dm Dg = 2 = 2 R B Dg B t , M T D T Dg 或 g C = Cm +Cs = Cg +Cl = Cl l l D df C 2 T DL 1
续前 2. HPLC:H=A+C·u B=2y-Dm D c 7 柱温T↓低,流动相?个大→B相忽略 >讨论: 1)流动相流速对HPLC板高的影响(与GC对比) next w>1cm/s时,Hocu 一H↓,n个三柱效个,但.个 三兼顾柱效和分析时间,选择三1ml/mm 2)涡流扩散项及其影响 next A=2λ:dp AocA.dp 2↓,dp三AH,n个三柱效个
续前 2)涡流扩散项及其影响 next HPLC:H = A+C u B Dm = 2 T Dm 柱温T 低,流动相 大 B相忽略 R u H n t u c m s H u , 柱效 ,但 1 / 时, 兼顾柱效和分析时间,选择u =1ml / min 2. ➢ 讨论: 1)流动相流速对HPLC板高的影响(与GC对比)next A = 2 dp A dp ,dp A H ,n 柱效