课程总结和 部分新技术介绍
一、中医药对基因组作用的研究 实验1基因组DNA提取（方法类似于RNA的提取） 实验2 Southern blot(方法类似于Northern blot)
实验3PCR PCR是Polymerase chain reaction的缩写，中文译作聚 合酶链式反应。其特点是可以在几小时内方便、快捷地将 微量DNA(含由微量RNA反转录成的cDNA)扩增达10 倍，得到ug级的DNA!该技术发明于八十年代中期，到 了八十年代末，由于引用了耐热DNA聚合酶，使这一技术 得以蓬勃发展，成为分子生物学中应用最为广泛的技术之 一，发挥着日益重要的作用。 由于其方便快捷，在中医药实验研究和临床检测中应 用十分广泛。例如观察慢性炎症的活检组织中一些与肿瘤 发生的基因是否存在突变，中医药治疗后防突变的作用如 何（如同一患者气管脱落细胞与血细胞比较）；一些与肿瘤 发生、转归、转移、调亡等基因是否突变、缺失，中医药 的保护与修复如何；以及探针的扩增等等
原理 采用两段引物，分别与DNA两条链上各一段序列 互补，位于模板DNA中拟扩增片段两条链的3'端。加热 使模板DNA变性解链，当反应的温度下降时，两引物分 别与模板DNA两条链发生退火，然后两引物在DNA聚 合酶的作用下延伸。在摩尔数大大过量的两段引物和4 种dNTP的反应体中，位于两段引物间的DNA在反复的 变性、退火、延伸的循环里，每一轮扩增的产物再一次充 当下一轮扩增的模板，使其产物增加一倍。经过30-40个 循环，目的DNA可由原来的lpg扩增到lug。图示如下：
a 双链模板 发性 引物复性 R t恤M0mm.. 延伸 变性 月物复性 0m- 延伸 变性 引物复性 C7K0000 延伸 e 置inmh山