二、细胞的破碎 分离提取某一生物大分子,首先要求生物大分子从 原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来,并保 持原来的天然状态,不丢失其生物活性。因此应选 择适当的方法将组织和细胞破碎。但若材料是体液 (如血)或生物体分泌到体外的分泌物,则不必进 行组织细胞的破碎
二、细胞的破碎 ◼ 分离提取某一生物大分子，首先要求生物大分子从 原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来，并保 持原来的天然状态，不丢失其生物活性。因此应选 择适当的方法将组织和细胞破碎。但若材料是体液 （如血）或生物体分泌到体外的分泌物，则不必进 行组织细胞的破碎
■组织细胞的破碎方法很多,根据不同的实验规模, 不同的实验材料和实验要求,使用的破碎方法和条 件也不同。 一般动物组织和细胞可用电动捣碎机或匀浆器破碎或用 超声浪处理破碎 s植物组织和细胞由于具有纤维素、半纤维素和果胶等物 质组成的细胞壁,一般常用与石英砂和适当的提取液 起研磨的方法破碎或用纤维素酶处理也能达到目的 φ细菌细胞的破碎比较困难,因为整个细菌细胞壁的骨架 实际上是一借共价键连接而成的肽聚糖囊状大分子,非 常坚韧。破碎的方法常有超声波震荡、与石英砂硏磨、 高压挤压或溶菌酶处理(以分解肽聚糖)
◼ 组织细胞的破碎方法很多，根据不同的实验规模， 不同的实验材料和实验要求，使用的破碎方法和条 件也不同。 ❖ 一般动物组织和细胞可用电动捣碎机或匀浆器破碎或用 超声波处理破碎； ❖ 植物组织和细胞由于具有纤维素、半纤维素和果胶等物 质组成的细胞壁，一般常用与石英砂和适当的提取液一 起研磨的方法破碎或用纤维素酶处理也能达到目的； ❖ 细菌细胞的破碎比较困难，因为整个细菌细胞壁的骨架 实际上是一借共价键连接而成的肽聚糖囊状大分子，非 常坚韧。破碎的方法常有超声波震荡、与石英砂研磨、 高压挤压或溶菌酶处理（以分解肽聚糖）
2003/9/28
三、细胞器的分离 细胞器包括细胞核、线粒体、核糖体、内质网,植物细胞 还有叶绿体。 n如果要分离制备分布在这些细胞器中的生物大分子,为了 防止其他细跑组分中的物质对制备物的千扰或污染,还需 先将细胞器分离出来,然后在某一细胞器中分离某一物质。 细胞器的分离一般采用差速离心法,即将破碎后的细跑在 适当的介质中进行离心,常用的介质有蔗糖、甘露醇、柠 檬酸、聚乙二醇等。各种细胞组分按质量大小的不同,经 过不同速度的离心后,沉降于离心管的不同部位,经多次 分步离心后,即可获得所需组分
三、细胞器的分离 ◼ 细胞器包括细胞核、线粒体、核糖体、内质网，植物细胞 还有叶绿体。 ◼ 如果要分离制备分布在这些细胞器中的生物大分子，为了 防止其他细胞组分中的物质对制备物的干扰或污染，还需 先将细胞器分离出来，然后在某一细胞器中分离某一物质。 ◼ 细胞器的分离一般采用差速离心法，即将破碎后的细胞在 适当的介质中进行离心，常用的介质有蔗糖、甘露醇、柠 檬酸、聚乙二醇等。各种细胞组分按质量大小的不同，经 过不同速度的离心后，沉降于离心管的不同部位，经多次 分步离心后，即可获得所需组分
四、提取 ■组织细胞破碎过程中,大量的胞内酶及细胞内含 物被释放出来,必须立即将其置于一定条件下和 溶剂中,让制备物充分溶解,并尽可能保持原来 的天然状态,避免因长久放置造成制备物的分解 破坏,这就是提取。 e提取实际上就是将制备物从复杂的生物体系中转移到 特定的人工液相体系中(通常是水、缓冲液、稀盐溶液 或有机溶剂)
四、提取 ◼ 组织细胞破碎过程中，大量的胞内酶及细胞内含 物被释放出来，必须立即将其置于一定条件下和 溶剂中，让制备物充分溶解，并尽可能保持原来 的天然状态，避免因长久放置造成制备物的分解 破坏，这就是提取。 提取实际上就是将制备物从复杂的生物体系中转移到 特定的人工液相体系中（通常是水、缓冲液、稀盐溶液 或有机溶剂）