分离纯化的意义 ①从生物材料中分离制备蛋白质、核酸,研究其 结构与功能,对于了解生命活动的规律,阐明 生命现象的本质有重大意义; ②工业生产的需要:食品、发酵、纺织、制革等 工业,需要大量的高活性的酶制剂; (如用流粉酶制造葡萄糖、麦芽糖、糊精以及糖浆等) ③医疗的需要:如用猪胰岛素治疗糖尿病 ④基因工程的需要
一、分离纯化的意义 ①从生物材料中分离制备蛋白质、核酸,研究其 结构与功能,对于了解生命活动的规律,阐明 生命现象的本质有重大意义; ②工业生产的需要:食品、发酵、纺织、制革等 工业,需要大量的高活性的酶制剂; (如用淀粉酶制造葡萄糖、麦芽糖、糊精以及糖浆等) ③医疗的需要:如用猪胰岛素治疗糖尿病; ④基因工程的需要
二、分离纯化的要求 1、纯度:主要取决于研究的目的和应用上的要求。如作 为研究其一级结构和空间结构的蛋白、一级结构与功 能的关系的蛋白质制剂、工具酶和标准蛋白、酶法分 析的酶制剂,都要求均一;工业、医药方面应用的酶 和蛋白质制剂,达到一定纯度即可,不要求均一。 2、活性:要求大分子保持天然构象状态,有高度的生物 活性 3、收率:希望收率越高越好,但在分离纯化过程中总有 不少损失,而且提纯步骤越多,损失越大
二、分离纯化的要求 1、纯度:主要取决于研究的目的和应用上的要求。如作 为研究其一级结构和空间结构的蛋白、一级结构与功 能的关系的蛋白质制剂、工具酶和标准蛋白、酶法分 析的酶制剂,都要求均一;工业、医药方面应用的酶 和蛋白质制剂,达到一定纯度即可,不要求均一。 2、活性:要求大分子保持天然构象状态,有高度的生物 活性。 3、收率:希望收率越高越好,但在分离纯化过程中总有 不少损失,而且提纯步骤越多,损失越大
、分离纯化的一般程序 生物大分子的分离纯化一般可分为以下几个阶段 ①材料的选择和预处理; ②破碎细胞及提取(有时还需要进行细胞器的分离) 分离纯化:包括粗分级分离和细分级分离。 其中前两个阶段为生物大分子分离纯化的前处理。 bac
三、分离纯化的一般程序 ▪ 生物大分子的分离纯化一般可分为以下几个阶段: ①材料的选择和预处理; ②破碎细胞及提取(有时还需要进行细胞器的分离); ③分离纯化:包括粗分级分离和细分级分离。 ▪ 其中前两个阶段为生物大分子分离纯化的前处理
第二节蛋白质(酶)、核酸 分离纯化的前处理 材料的选择与预处理 ■选择材料主要根据实验目的而定。工业生产上注意选 择含量高、来源丰富、易获得、制备工艺简单、成本 低的动植物组织或微生物做原料。科研选材则无需考 虑上述问题,只要能达到实验目的即可。 ■实验材料选定后,常常需要进行预处理,如动物材料 需要除去一些与实验无关的结缔组织、脂肪组织;植 物种子需要除壳;微生物需要将菌体与发酵液分开 另外,必须尽可能保持材料的新鲜,尽快加工处理, 若不立即进行实验或加工,应冷冻保存
第二节 蛋白质(酶)、核酸 分离纯化的前处理 一、材料的选择与预处理 ◼ 选择材料主要根据实验目的而定。工业生产上注意选 择含量高、来源丰富、易获得、制备工艺简单、成本 低的动植物组织或微生物做原料。科研选材则无需考 虑上述问题,只要能达到实验目的即可。 ◼ 实验材料选定后,常常需要进行预处理,如动物材料 需要除去一些与实验无关的结缔组织、脂肪组织;植 物种子需要除壳;微生物需要将菌体与发酵液分开。 另外,必须尽可能保持材料的新鲜,尽快加工处理, 若不立即进行实验或加工,应冷冻保存