实验十三、蔬菜中有机磷和氨基 申酸酯类农药残留量的快速检测 标准依据： GB/T5009.199-2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸 酯类农药残留量的快速检测
实验十三、蔬菜中有机磷和氨基 甲酸酯类农药残留量的快速检测 标准依据: GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸 酯类农药残留量的快速检测
方法一快速卡法 一、 目的要求：学习快速卡法测定有机磷农残快速检 验法及熟悉检验结果评定。 ■二、实验原理：胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂（红色） 水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类 农药对胆碱脂酶有抑制作用，使催化、水解、变色的 过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有 机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。 ■三、实验试剂： ■1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片； 2、pH7.5磷酸盐缓冲液：分别称取15.0g磷酸氢二钠 [Na2HPO412H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2PO4] 用500mL蒸馏z水溶解
方法一 快速卡法 ◼ 一、目的要求：学习快速卡法测定有机磷农残快速检 验法及熟悉检验结果评定。 ◼ 二、实验原理：胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂（红色） 水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类 农药对胆碱脂酶有抑制作用，使催化、水解、变色的 过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有 机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。 ◼ 三、实验试剂： ◼ 1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片； ◼ 2、pH 7.5 磷酸盐缓冲液：分别称取15.0g磷酸氢二钠 [Na2HPO4•12H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2PO4]， 用500 mL蒸馏水溶解
四、实验步骤： ■1、整体测定法 (1)选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土， 剪成1cm左右方形碎片，取5g防入带盖瓶中，加入10 mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上， (2)取一片快速卡，用白色药片沾取提取液，放置 10min以上进行预反应，有条件时在37℃恒温装置中 放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。 :(3)将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温 3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。 ■注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照
四、实验步骤： ◼ 1、整体测定法 ◼ （1）选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土， 剪成1cm左右方形碎片,取5g防入带盖瓶中，加入10 mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上. ◼ (2) 取一片快速卡，用白色药片沾取提取液，放置 10min以上进行预反应，有条件时在37 ℃恒温装置中 放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。 ◼ （3）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温 3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。 ◼ 注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照
■2、表面测定法（粗筛法〉 (1)擦去蔬菜表面泥土，滴2~3滴缓冲液在 蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。 (2)取一速片测卡，将蔬菜上的液滴滴在白 色药片上。 :(3)放置10min以上进行预反应，有条件时 在37℃恒温装置中放置10min。预反应10 min,预反应后的药片表面必须保持湿润。 (4)将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装 置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生 反应。 注意： 每批测定应设一个缓冲液的空白对照
◼ 2、表面测定法（粗筛法） ◼ （1）擦去蔬菜表面泥土，滴2~3滴缓冲液在 蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。 ◼ （2）取一速片测卡，将蔬菜上的液滴滴在白 色药片上。 ◼ （3）放置10 min以上进行预反应，有条件时 在37 ℃恒温装置中放置10 min。预反应10 min，预反应后的药片表面必须保持湿润。 ◼ （4）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装 置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生 反应。 ◼ 注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照
五、检测结果判断 ■1、结果判断 ·结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制 (为阳性)、未抑制（阴性）表示。 ■与空白对照卡比较，白色药片不变色或略有浅 蓝色均为阳性结果。白色药片变为天蓝色或与 空白对照卡相同，为阴性结果。 对阳性结果的样品，可用其他方法进一步确 定具体农药品种和含量。 2、样品检测结果记录并对检测结果进行评价
五、检测结果判断 ◼ 1、结果判断 ◼ 结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制 （为阳性）、未抑制（阴性）表示。 ◼ 与空白对照卡比较，白色药片不变色或略有浅 蓝色均为阳性结果。白色药片变为天蓝色或与 空白对照卡相同，为阴性结果。 ◼ 对阳性结果的样品，可用其他方法进一步确 定具体农药品种和含量。 ◼ 2、样品检测结果记录并对检测结果进行评价