第一节概述 第五章 eneralization g 紫外-可见吸收第二节光的吸收 光谱分析法 第三节光吸收的基本定律 Ultraviolet-visible Lambert-Beer's law molecular absorption第四节紫外可见光分光光 spectrometry,UvVS度计 UV-VIS spectrometer 第五节定性与定量分析 Qualitative- Quantitative Analysis 2021/2/23 生物工程学院
2021/2/23 生物工程学院 1 第五章 紫外-可见吸收 光谱分析法 第一节 概 述 generalization 第二节 光的吸收 第三节 光吸收的基本定律 Lambert-Beer’s Law 第四节 紫外可见光分光光 度计UV-VIS spectrometer 第五节 定性与定量分析 Qualitative- Quantitative Analysis Ultraviolet-visible molecular absorption spectrometry, UV-VIS
第五章 紫外-可见吸 定义 收光谱分析法 Ultraviolet-visible 分光光度法 molecular absorption 与比色法区别 spectrometry, UV-VIS 第一节概述 、特点 generalization 2021/2/23 生物工程学院
2021/2/23 生物工程学院 2 第五章 紫外-可见吸 收光谱分析法 第一节 概 述 generalization Ultraviolet-visible molecular absorption spectrometry, UV-VIS 一、定义 二、分光光度法 与比色法区别 三、特点
紫外吸收光谱:分子价电子(最外层电子)能级跃迁。 波长范围:100-760nm (1)远紫外光区:100-200nm (2)近紫外光区:200400m 3)可见光区:400-760mm 可用于结构鉴定和定量分析。 电子跃迁的同时,伴随着振 动转动能级的跃迁;带状光谱。E 250300350400nm 2021/2/23 生物工程学院
2021/2/23 生物工程学院 3 紫外吸收光谱：分子价电子（最外层电子）能级跃迁。 波长范围：100-760 nm. (1) 远紫外光区: 100-200nm (2) 近紫外光区: 200-400nm (3)可见光区:400-760nm 250 300 350 400nm 1 2 3 4 e λ 可用于结构鉴定和定量分析。 电子跃迁的同时，伴随着振 动转动能级的跃迁;带状光谱
定义 基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为 吸光光度法,包括比色法、可见分光光度法及紫外分光光度 法等。本章重点讨论可见光区的吸光光度法及紫外光区的紫 外分光光度法。 日常分析工作中--KMn0水溶液呈深紫色,K2CrO4溶液 呈黄色,CuSO4溶液呈蓝色…￥这些有色物质溶液的浓度改 变时,溶液颜色的深浅也随之改变,溶液越浓,颜色越深 可以通过比较溶液颜色的深浅来测定物质的含量。 这种基于比较溶液颜色的深浅进行定量分析的方法,称 为目视比色法。采用分光光度计对物质吸光度进行测定,从 而求出物质含量的方法,称之为分光光度 20 2021/2/23 生物工程学院 4009204060480500520540560580600
2021/2/23 生物工程学院 4 • 一、定义 • 基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为 吸光光度法，包括比色法、可见分光光度法及紫外分光光度 法等。本章重点讨论可见光区的吸光光度法及紫外光区的紫 外分光光度法。 • 日常分析工作中----KMn04水溶液呈深紫色，K2CrO4溶液 呈黄色，CuSO4溶液呈蓝色……当这些有色物质溶液的浓度改 变时，溶液颜色的深浅也随之改变，溶液越浓，颜色越深---- 可以通过比较溶液颜色的深浅来测定物质的含量。 • 这种基于比较溶液颜色的深浅进行定量分析的方法，称 为目视比色法。采用分光光度计对物质吸光度进行测定，从 而求出物质含量的方法，称之为分光光度法
紫外可见吸收光谱分析法是利用物质的分子对 某一波长范围的光的吸收作用,对物质进行定性分 析、定量分析及结构分析的方法。 按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光 度法(200-400m和可见分光光度法(400-760m, 合称为紫外一可见分光光度法(200-760nm)。 分光光度法是在比色法( colorimetry)的基础上 发展起来的。 2021/2/23 生物工程学院 5
2021/2/23 生物工程学院 5 • 紫外-可见吸收光谱分析法是利用物质的分子对 某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分 析、定量分析及结构分析的方法。 • 按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光 度法(200-400nm)和可见分光光度法(400-760nm)， 合称为紫外—可见分光光度法(200-760nm)。 • 分光光度法是在比色法( colorimetry)的基础上 发展起来的