第一节概述 利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗 透而达到分离的方法,称为凝胶色谱法或尺寸 排阻色谱法。 最近,又有一种新分离技术,利用不同组分与 固定相(固定化分子)的高专属性亲和力进行 分离的技术称为亲和色谱法,常用于蛋白质的 分离
6 第一节 概述 ⚫ 利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗 透而达到分离的方法，称为凝胶色谱法或尺寸 排阻色谱法。 ⚫ 最近，又有一种新分离技术，利用不同组分与 固定相（固定化分子）的高专属性亲和力进行 分离的技术称为亲和色谱法，常用于蛋白质的 分离
第一节概述 3按固定相的外型分类 固定相装于柱内的色谱法,称为柱色谱。 ●固定相呈平板状的色谱,称为平板色谱,它又 可分为薄层色谱和纸色谱。 4.按照展开程序分类 按照展开程序的不同,可将色谱法分为洗脱法、 顶替法、和迎头法
7 第一节 概述 3. 按固定相的外型分类 ⚫ 固定相装于柱内的色谱法，称为柱色谱。 ⚫ 固定相呈平板状的色谱，称为平板色谱，它又 可分为薄层色谱和纸色谱。 4. 按照展开程序分类 按照展开程序的不同，可将色谱法分为洗脱法、 顶替法、和迎头法
第一节概述 ●洗脱法也称冲洗法。工作时,首先将样品加到 色谱柱头上,然后用吸附或溶解能力比试样组 分弱得多的气体或液体作冲洗剂。由于各组分 在固定相上的吸附或溶解能力不同,被冲洗剂 带出的先后次序也不同,从而使组分彼此分离。 流出曲线下图
8 第一节 概述 ⚫ 洗脱法也称冲洗法。工作时，首先将样品加到 色谱柱头上，然后用吸附或溶解能力比试样组 分弱得多的气体或液体作冲洗剂。由于各组分 在固定相上的吸附或溶解能力不同，被冲洗剂 带出的先后次序也不同，从而使组分彼此分离。 流出曲线下图。 A B
第一节概述 这种方法能使样品的各组分获得良好的分离, 色谱峰清晰。此外,除去冲洗剂后,可获得纯 度较高的物质。目前,这种方法是色谱法中最 常用的一种方法。 ●顶替法是将样品加到色谱柱头后,在惰性流动 相中加入对固定相的吸附或溶解能力比所有试 样组分强的物质为顶替剂(或直接用顶替剂作 流动相),通过色谱柱,将各组分按吸附或溶 解能力的强弱顺序,依次顶替岀固定相。很明
9 第一节 概述 这种方法能使样品的各组分获得良好的分离， 色谱峰清晰。此外，除去冲洗剂后，可获得纯 度较高的物质。目前，这种方法是色谱法中最 常用的一种方法。 ⚫ 顶替法是将样品加到色谱柱头后，在惰性流动 相中加入对固定相的吸附或溶解能力比所有试 样组分强的物质为顶替剂（或直接用顶替剂作 流动相），通过色谱柱，将各组分按吸附或溶 解能力的强弱顺序，依次顶替出固定相。很明
第一节概述 显,吸附或溶解能力最弱的组分最先流出,最 强的最后流出。顶替法的流出曲线如下图
10 第一节 概述 显，吸附或溶解能力最弱的组分最先流出，最 强的最后流出。顶替法的流出曲线如下图。 A B