由n个α-氨基酸缩合而成的肽称为n肽,由多个4-氨基酸缩合而成的肽称为多肽。 一般把含100个以上氨基酸的多肽(有时是含50个以上)称为蛋白质。 无论肽脸有多长,在链的两端一端有游离的氨基(-NH,),称为N端:链的另一端有游 离的羧基(-COOH),称为C端。 R OL R01 R" NH2:CH-C-NH-CH-C- NH-CHCOOH N端 C端 2.肽的命名 根据组成肽的氨基酸的顺序称为某氨酰某氨酰…某氨酸(简写为某、某、某)。 CH2OH CH2CsHs NH2-CH-C-NH-CH-C-NH-CH-COOH 丙氨酰丝氨酰苯丙氨酸(丙丝~苯丙) 很多多肽都采用俗名,如催产素、胰岛素等。 19.22多肽结构的测定 由氨基酸组成的多肽数目惊人,情况十分复杂。假定100个氨基酸聚合成线形分子, 可能具有2010中多肽, 多肽结构的测定主要是做如下工作: ①了解某一多肽是由哪些氨基酸组成的。 ②各种氨基酸的相对比例, ③确定各氨基酸的挂列顺序。 多肽结构测定工作步骤如下: 1.测定分子量 2.氨基酸的定量分析 多秋号复装酸尽注是各种氢酸一各种氨猴的含民 HCI 现代方法是将水解后的氨基酸混和液用氨基酸分析仪进行分离和测定。· 3.端基分析(测定N端和C端) (1)测定N端(有两种方法) a2,4=硝基氟苯法一—桑格尔(Sanger-英国人)法 2,4=硝基氟苯与氨基酸的N端氨基反应后,再水解,分离除N二硝基苯基氨基酸
用色谱法分析,即可知道N端为何氨基酸。 ON-F+HaN-CH-CONH-CH-CONH-NazCO3 NO2 R NHN-CH-CONH-CH-CONH-.HCL NO2 R R NHN-CH-COOH+HaN-CH-COOH NO>R R 此法的缺点是所有的肽键都被水解掉了。 b异疏氰酸苯酯(Ph-N=C=S)法一一艾德曼(Edman)降解法. C-CHCOC 多肉 NH-CH R S* -N CH-R+多肤 测定咪唑衍生物的R,即可知是哪种氨基酸。 异疏氯酸苯酯法的特点是,除多肽N端的氨基酸外,其余多肽链会保留下来。这样就 可以继续不断的测定其N端 (2)测定C端 a多肽与肼反应 所有的肽键(酰胺)都与肼反应而断裂成酰肼,只有C端的氨基酸有游离的羧基,不 会与肼反应成酰肼。这就是说与肼反应后仍具有游离羧基的氨基酸就是多肽C端的氨基酸 b羧肽酶水解法 在羧肽酶催化下,多肽链中只有C端的氨基酸能逐个断裂下来。 4.肽链的选择性断裂及鉴定 上述测定多肽结构顺序的方法,对于分子量大的多肽是不适用的。对于大分子量多肽 顺序的测定,是将其多肽用不同的蛋白酶进行部分水解,使之生成二肽、三肽等碎片,再 用端基分析法分析个碎片的结构,最后将各碎片在排列顺序上比较并合并,即可推出多肽 中氨基酸的顺序 7