实验1植物细胞的质壁分离 及死活鉴定 温银元
【原理】 活体染色是利用某种对植物无害的染料溶液对活 细胞进行染色的技术。中性红是常用的活体染料之一， 它是一种弱碱性pH指示剂，变色范围在pH6.4~8.0 之间（由红变黄）。在中性或微碱性环境中，植物的 活细胞能大量吸收中性红并向液泡中分泌，由于液泡 在一般情况下呈酸性反应，因此，进入液泡的中性红 便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色，在这种情况下， 原生质和细胞壁一般不着色；死细胞由于原生质变性 凝固，细胞液不能维持在液泡内，因此，用中性红染 色后，不产生液泡着色现象。相反，中性红的阳离子， 却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合，而使原 生质与细胞核染色
【仪器设备】 1.显微镜； 2.小培养皿； 3.载玻片和盖玻片； 4.单面刀片； 5.尖头镊子； 6.酒精灯； 7.火柴； 8.擦镜纸； 9.吸水纸适量。 【试剂】 1.0.03%中性红溶液； 2.1mol·L1硝酸钾溶液。 【材料】 洋葱鳞茎
【方法步骤】 1.切下一片较幼嫩的洋葱鳞片，用单面刀片在鳞片内侧割划成0.5 c2左右的小块，用尖头镊子将内表皮小块轻轻撕下，即可投 入中性红溶液染色（注意应将表皮内侧向下）。 2.将制好的洋葱鳞茎内表皮小块投入003%的中性红溶液中染色 5~10min,取出1~2片，在蒸馏水中稍加冲洗，在载玻片上 滴1滴蒸馏水，小心地将制片平展到载玻片上，加盖玻片，在显 微镜下观察，可看到细胞壁被染成红色，而原生质和液泡均不 染色。 3.将步骤2中的活体染色制片取出几片放入pH略高于7.0的自来水 中浸泡10~15min,再置于载玻片上镜检，将发现细胞壁脱色， 而液泡却被染成深红色。 4.将步骤3中的活体制片放在酒精灯火焰上微微加热，以杀死细胞， 再在显微镜下观察，会看到原生质凝结成不均匀的凝胶状，与 细胞核一起被染成红色。 5.在活体染色制片中仔细寻找，可能看到个别死细胞，葚细胞核 因被中性红染色而呈红色，清晰可辨
【实验结果】 绘制观察到的各种现象，并详细说明原因。 【思考题】 1.渗透作用在植物生理上有何意义？ 2.质壁分离在细胞生理的研究上有那些用处？