第一节 分子荧光和磷光分析 外转移 指激发分子与溶剂分子或其它溶质分子的相互作用及 能量转移，使荧光或磷光强度减弱甚至消失。这一现象 称为“熄灭”或“猝灭”。 荧光与磷光的根本区别： 荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层 间跃迁产生的；而磷光是由邀发三重态的最低振动能层 至基态各振动能层间跃迁产生的
11 第一节 分子荧光和磷光分析 外转移 指激发分子与溶剂分子或其它溶质分子的相互作用及 能量转移，使荧光或磷光强度减弱甚至消失。这一现象 称为“熄灭”或“猝灭”。 荧光与磷光的根本区别： 荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层 间跃迁产生的；而磷光是由激发三重态的最低振动能层 至基态各振动能层间跃迁产生的
第一节分子荧光和磷光分析 (二)激发光谱曲线和荧光、磷光光谱曲线 荧光和磷光均为光致发光，因此必须选择合适的激 发光波长，可根据它们的激发光谱曲线来确定。绘制激 发光谱曲线时，固定测量波长为荧光（或磷光）最大发 射波长，然后改变激发波长，根据所测得的荧光（磷光） 强度与激发光波长的关系，即可绘制激发光谱曲线。 应该指出，激发光谱曲线与其吸收曲线可能相同， 但激发光谱曲线是荧光强度与波长的关系曲线，吸收曲 线则是吸光度与波长的关系曲线，两者在性质上是不同 的。当然，在激发光谱曲线的最大波长处，处于邀发态 的分子数 12
12 第一节 分子荧光和磷光分析 （二）激发光谱曲线和荧光、磷光光谱曲线 荧光和磷光均为光致发光，因此必须选择合适的激 发光波长，可根据它们的激发光谱曲线来确定。绘制激 发光谱曲线时，固定测量波长为荧光（或磷光）最大发 射波长，然后改变激发波长，根据所测得的荧光（磷光） 强度与激发光波长的关系，即可绘制 激发光谱曲线。 应该指出，激发光谱曲线与其吸收曲线可能相同， 但激发光谱曲线是荧光强度与波长的关系曲线，吸收曲 线则是吸光度与波长的关系曲线，两者在性质上是不同 的。当然，在激发光谱曲线的最大波长处，处于激发态 的分子数
第一节 分子荧光和磷光分析 目是最多的，这可说明所吸收的光能量也是最多的，自 然能产生最强的荧光。 如果固定激发光波长为其最大激发波长，然后测定 不同的波长时所发射的荧光或磷光强度，即可绘制荧光 或磷光光谱曲线。 在荧光和磷光的产生过程中，由于存在各种形式的无 辐射跃迁，损失能量，所以它们的最大发射波长都向长 波方向移动，以磷光波长的移动最多，而且它的强度也 相对较弱。 荧光发射光谱的普遍特性：
13 第一节 分子荧光和磷光分析 目是最多的，这可说明所吸收的光能量也是最多的，自 然能产生最强的荧光。 如果 固定激发光波长为其最大激发波长，然后测定 不同的波长时所发射的荧光或磷光强度，即可绘制荧光 或磷光光谱曲线。 在荧光和磷光的产生过程中，由于存在各种形式的无 辐射跃迁，损失能量，所以它们的最大发射波长都向长 波方向移动，以磷光波长的移动最多，而且它的强度也 相对较弱。 荧光发射光谱的普遍特性：
第一节 分子荧光和磷光分析 (1)Stokes位移 在溶液中，分子荧光的发射相对于吸收位移到较长 的波长，称为Stokes位移。这是由于受激分子通过振动弛 豫而失去转动能，也由于溶液中溶剂分子与受激分子的 碰撞，也会有能量的损失。因此，在激发和发射之间产 生了能量损失。 (2)荧光发射光谱的形状与激发波长无关 因为分子吸收了不同能量的光子可以由基态激发到 几个不同的电子邀发态，而具有几个吸收带。由于较高 激发态通过内转换及转动弛豫回到第一电子激发态的几 率较高， 14
14 第一节 分子荧光和磷光分析 （1）Stokes位移 在溶液中，分子荧光的发射相对于吸收位移到较长 的波长，称为Stokes位移。这是由于受激分子通过振动弛 豫而失去转动能，也由于溶液中溶剂分子与受激分子的 碰撞，也会有能量的损失。因此，在激发和发射之间产 生了能量损失。 （2）荧光发射光谱的形状与激发波长无关 因为分子吸收了不同能量的光子可以由基态激发到 几个不同的电子激发态，而具有几个吸收带。由于较高 激发态通过内转换及转动弛豫回到第一电子激发态的几 率较高
第一节 分子荧光和磷光分析 远大于由高能激发态直接发射光子的速度，故在荧光发 射时，不论用哪一个波长的光辐射激发，电子都丛第一 电子邀发态的最低振动能层返回到基态的各个振动能层， 所以荧光发射光谱与激发波长无关。 (3)镜像规则 通常荧光发射光谱和它的吸收光谱呈镜像对称关系。 吸收光谱是物质分子由基态激发至第一电子激发态 的各振动能层形成的。其形状决定于第一电子邀发态中 各振动能层的分布情况。 荧光光谱是激发分子从第一电子激发态的最低振动
15 第一节 分子荧光和磷光分析 远大于由高能激发态直接发射光子的速度，故在荧光发 射时，不论用哪一个波长的光辐射激发，电子都从第一 电子激发态的最低振动能层返回到基态的各个振动能层， 所以荧光发射光谱与激发波长无关。 （3）镜像规则 通常荧光发射光谱和它的吸收光谱呈镜像对称关系。 吸收光谱是物质分子由基态激发至第一电子激发态 的各振动能层形成的。其形状决定于第一电子激发态中 各 振动能层的分布情况。 荧光光谱是激发分子从第一电子激发态的最低振动