第3章 高数液相色清法 High Performance Liquid Chromatography, HPLO
High Performance Liquid Chromatography, HPLC 第3章 高效液相色谱法
3-1 高数液相色谱法橇述 高效液相色谱与其他仪器相比特点: (1)高压 (2)高速 (3)高效 (4)高灵敏度
高效液相色谱与其他仪器相比特点: (1)高压 (2)高速 (3)高效 (4)高灵敏度 3-1 高效液相色谱法概述
3-2影响液相色谱柱的因素 1.涡流扩散项He He=2xdp dp:固定相平均颗粒直径,)为固定相的 填充不均匀因子。 使用细小的颗粒,填充均匀,可减小涡 流扩散项
3-2 影响液相色谱柱的因素 1. 涡流扩散项He He=2λdp dp:固定相平均颗粒直径,λ为固定相的 填充不均匀因子。 使用细小的颗粒,填充均匀,可减小涡 流扩散项
2.纵向扩散项Hd Hd=CaDm/u 分子在液体中的扩散系数比在气体中小45 个数量级,对色谱峰扩散的影响可忽略。 3.传质阻力项 固定相传质阻力项和流动相传质阻力项 H=(Csd/Ds+Cmdp2/Dm+Csmdp2/Dm)u 是影响柱效能的主要因素,固定相颗粒越 小,H越小
2. 纵向扩散项Hd Hd=CdDm/u 分子在液体中的扩散系数比在气体中小4~5 个数量级,对色谱峰扩散的影响可忽略。 3. 传质阻力项 固定相传质阻力项和流动相传质阻力项 H=(Csdf 2 /Ds+Cmdp 2 /Dm+Csmdp 2 /Dm)u 是影响柱效能的主要因素,固定相颗粒越 小,H越小
H=2d,+9 p D D B H=4+ +Cu 提高液相色谱的分离效率,必须提高柱内 填料装填的均匀性、减小粒度、使用低黏 度的流动相或适当提高柱温以降低流动相 黏度,从而加快传质速率,其中减小粒度 是提高柱效的最有效途径
u D C d D C d D C d u C D H d m 2 Sm p m 2 m p S 2 d m S f 2 p Cu u B H A 提高液相色谱的分离效率,必须提高柱内 填料装填的均匀性、减小粒度、使用低黏 度的流动相或适当提高柱温以降低流动相 黏度,从而加快传质速率,其中减小粒度 是提高柱效的最有效途径