20-3高效液相色谱的固定相和流动相 (-)固定相 高效液相色谱固定相以承受高压能力来分类 可分为刚性固体和硬胶两大类。刚性固体以二氧化 硅为基质,可承受70×108~10×109Pa的高压, 可制成直径、形状、孔隙度不同的颗粒。如果在 氧化硅表面键合各种官能团,就是键合固定相,可 扩大应用范围,它是目前最广泛使用的一种固定相 硬胶主要用于离子交换和尺寸排阻色谱中,它由聚 苯乙烯与二乙烯苯基交联而成。可承受压力上限为 3.5×108Pa。固定相按孔隙深度分类,可分为表面 多孔型和全多孔型固定相两类
20-3高效液相色谱的固定相和流动相 （－）固定相 高效液相色谱固定相以承受高压能力来分类， 可分为刚性固体和硬胶两大类。刚性固体以二氧化 硅为基质，可承受7.O×108～1.O×109Pa的高压， 可制成直径、形状、孔隙度不同的颗粒。如果在二 氧化硅表面键合各种官能团，就是键合固定相，可 扩大应用范围，它是目前最广泛使用的一种固定相。 硬胶主要用于离子交换和尺寸排阻色谱中，它由聚 苯乙烯与二乙烯苯基交联而成。可承受压力上限为 3.5×108Pa。固定相按孔隙深度分类，可分为表面 多孔型和全多孔型固定相两类
1表面多孔型固定相 它的基体是实心玻璃珠,在玻璃球外面覆盖 层多孔活性材料,如硅胶、氧化铝、离子交换剂 分子筛、聚酸胺等。表面活性材料为硅胶的固定 相如国外的Zpax, Corail i和II, Vydac, Pellosil以及上海试剂一厂的薄壳玻璃珠等:表 面活性材料为氧化铝的固定相,如Pe1 lumina:为 聚酰胺的,如Pe1llon。这类固定相的多孔层厚度 小、孔浅,相对死体积小,出峰迅速、柱效亦高; 颗粒较大,渗透性好,装柱容易,梯度淋洗时能 迅速达平衡,较适合做常规分析。由于多孔层厚 度薄,最大允许量受限制
1.表面多孔型固定相 它的基体是实心玻璃珠，在玻璃球外面覆盖一 层多孔活性材料，如硅胶、氧化铝、离子交换剂、 分子筛、聚酸胺等。表面活性材料为硅胶的固定 相如国外的Zpax，Corasil I和II，Vydac， Pellosil以及上海试剂一厂的薄壳玻璃珠等；表 面活性材料为氧化铝的固定相，如Pellumina；为 聚酰胺的，如Pellion。这类固定相的多孔层厚度 小、孔浅，相对死体积小，出峰迅速、柱效亦高； 颗粒较大，渗透性好，装柱容易，梯度淋洗时能 迅速达平衡，较适合做常规分析。由于多孔层厚 度薄，最大允许量受限制
2.全多孔型固定相 它由直径为10nm的硅胶微粒凝聚而成 如国外的 Porasil, Zobbex、 Lichrosorb系列, 上海试剂一厂的堆积硅珠,青岛海洋化工 的YWG系列,天津试剂二厂的DG系列等。 也可由氧化铝微粒凝聚成全多孔型固定相 如国外的 Lichrosorb alOT。这类固定相由 于颗粒很细(5~10um),孔仍然较浅,传 质速率快,易实现高效、高速。特别适合复 杂混合物分离及痕量分析
2．全多孔型固定相 它由直径为10nm的硅胶微粒凝聚而成。 如国外的Porasil，Zobbex、Lichrosorb系列， 上海试剂一厂的堆积硅珠，青岛海洋化工厂 的YWG系列，天津试剂二厂的DG系列等。 也可由氧化铝微粒凝聚成全多孔型固定相， 如国外的Lichrosorb ALOXT。这类固定相由 于颗粒很细（5～10μm），孔仍然较浅，传 质速率快，易实现高效、高速。特别适合复 杂混合物分离及痕量分析
表171两类固定相的性能比较 性能 表面多孔型 全多孔型 平均粒度/皿m 30~40 §~10 最佳 HElP mm 02~04 001√03 典型柱长m 0~100 10~30 典型柱径/m 压降"Paml 14X10 14×10 样品容量ng·g 005~01 表面积加·g液固色谱) 10~15 400~600 键合相覆盖率(%wyw) 05~15 5~25 离子交换容量1mog1 10~40 20000 装柱方式 千装法 匀浆法 HEIP理论塔板高
)流动相 由于高效液相色谱中流动相是液体,它对组分有亲和力, 并参与固定相对组分的竞争。因此,正确选择流动相直接 影响组分的分离度。对流动相溶剂的要求是: 1)溶剂对于待测样品,必须具有合适的极性和良好 的选择性 (2)溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器,应 注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶 剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时, 溶剂对此辐射产生强烈吸收,此时溶剂被看作是光学不透 明的,它严重干扰组分的吸收测量。表20-2列出了一些常 用溶剂的紫外截止波长 对于折光率检测器,要求选择与组分折光率有较大差别 的溶剂作流动相,以达最高灵敏度
（二）流动相 由于高效液相色谱中流动相是液体，它对组分有亲和力， 并参与固定相对组分的竞争。因此，正确选择流动相直接 影响组分的分离度。对流动相溶剂的要求是： （1）溶剂对于待测样品，必须具有合适的极性和良好 的选择性。 （2）溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器，应 注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶 剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时， 溶剂对此辐射产生强烈吸收，此时溶剂被看作是光学不透 明的，它严重干扰组分的吸收测量。表20-2列出了一些常 用溶剂的紫外截止波长。 对于折光率检测器，要求选择与组分折光率有较大差别 的溶剂作流动相，以达最高灵敏度