3分离系统—色谱柱 色谱柱是液相色谱的心脏部件,它包括柱管与 固定相两部分。柱管材料有玻璃、不锈钢、铝、铜 及内衬光滑的聚合材料的其他金属。玻璃管耐压有 限,故金属管用得较多。一般色谱柱长5~30cm, 内径为4~5m,凝胶色谱柱内径3~12mm,制备往 内径较大,可达25mm以上。一般在分离前备有 个前置柱,前置柱内填充物和分离柱完全一样,这 样可使淋洗溶剂由于经过前置柱为其中的固定相饱 和,使它在流过分离柱时不再洗脱其中固定相,保 证分离技的性能不受影响。 柱子装填得好坏对柱效影响很大。对于细粒度的填料 <20um)一般采用匀浆填充法装柱,先将填料调成匀浆 然后在高压泵作用下,快速将其压入装有洗脱液的色谱柱 内,经冲洗后,即可备用
3 分离系统——色谱柱 色谱柱是液相色谱的心脏部件,它包括柱管与 固定相两部分。柱管材料有玻璃、不锈钢、铝、铜 及内衬光滑的聚合材料的其他金属。玻璃管耐压有 限,故金属管用得较多。一般色谱柱长5~30cm, 内径为4~5mm,凝胶色谱柱内径3~12mm,制备往 内径较大,可达25mm 以上。一般在分离前备有一 个前置柱,前置柱内填充物和分离柱完全一样,这 样可使淋洗溶剂由于经过前置柱为其中的固定相饱 和,使它在流过分离柱时不再洗脱其中固定相,保 证分离技的性能不受影响。 柱子装填得好坏对柱效影响很大。对于细粒度的填料 (<20μm)一般采用匀浆填充法装柱,先将填料调成匀浆, 然后在高压泵作用下,快速将其压入装有洗脱液的色谱柱 内,经冲洗后,即可备用
4.检测系统 在液相色谱中,有两种基本类型的检 测器。一类是溶质性检测器,它仅对被分 离组分的物理或化学特性有响应,属于这 类检测器的有紫外、荧光、电化学检测器 等。另一类是总体检测器,它对试样和洗 脱液总的物理或化学性质有响应,属于这 类检测器的有示差折光,电导检测器等。 现将常用的检测器介绍如下
4.检测系统 在液相色谱中,有两种基本类型的检 测器。一类是溶质性检测器,它仅对被分 离组分的物理或化学特性有响应,属于这 类检测器的有紫外、荧光、电化学检测器 等。另一类是总体检测器,它对试样和洗 脱液总的物理或化学性质有响应,属于这 类检测器的有示差折光,电导检测器等。 现将常用的检测器介绍如下:
(I)紫外检测器 (2)荧光检测器 (3)示差折光率检测器 几乎所有物质都有各自不同的折射率,因此差示折 光检测器是一种通用型检测器。灵敏度可达107gCm3。 主要缺点是对温度变化敏感,并且不能用于梯度淋洗 (4)电导检测器 (5)附属系统 它包括脱气、梯度淋洗、恒温、自动进样、馏分收集 以及数据处理等装置。其中梯度淋洗装置是高压液相色谱 仪中尤为重要的附属装置
(l)紫外检测器 (2)荧光检测器 (3) 示差折光率检测器 几乎所有物质都有各自不同的折射率,因此差示折 光检测器是一种通用型检测器。灵敏度可达10-7g·cm-3 。 主要缺点是对温度变化敏感,并且不能用于梯度淋洗。 (4)电导检测器 (5) 附属系统 它包括脱气、梯度淋洗、恒温、自动进样、馏分收集 以及数据处理等装置。其中梯度淋洗装置是高压液相色谱 仪中尤为重要的附属装置
eluent to reference and Ciliary electrode from the column lon UV light 感 spacer working electrode 1g·20 Electrochemical detector with a waste y larbon working electrod
Absorbance 19.a 22c 2B0 30 350 Wavelength, nm 4.2 。4