把切口封闭,M呈松她态,这过程不糖能)。后者在无ATP供能附,可同时切开超蝶旋状 态以的两条链,使其松地,然后将切口封闭(用于分离复制后的两个子环)。在利用A口 时,读可使松地态的变成负超 (六)单链结合蛋白SSB 与单链结合 稳定单链区 便周 链上,防止它们重新形成 不》 直到会部单链都被 而真生物 同效应, 也不突 合那样沿复制方向向前移动,而是不衡地结合、能离,直到复制完成。 其他因子 和引发蓐结合成引发体的棚关蛋白有6种,priM,priB,priC、naB、dmaC,dnaT。 与复制过程有关的起始因子、终止茧白因子等。 四、原核复制过程(重点、难点) 从起点解链到起点引物合成结束 主要反应: 山DaA识别起点并解开3个: 山DnaB(C助之)解链扩大单链区: 山拓扑 子构消除超螺旋。 山单链结合蛋白稳定单链区: 形成复制叉 山引物酶在起点合成引物。 起始示意图
这是复制中较复杂的坏节,叁与因子较多,是把M解成单链和生成引物。 E.c01i复制始于单个位,点(orC,有245b如的序列,一般含两个反向重复单位和二个 事联重复单位。 解链是 种高速的反向旋转,其下游势必发生打结现象。书扑酶通过切惭、旋转和再连 度作用,实现D时超螺旋的转型,正超螺旋变负超:DA蛋屏认并结合oC币复列的 位点,解链醇(aB蛋白,rep蛋白)解开双链(DaC蛋白协助解链:SSB和引发榜进入, 生成的引发体到达适当位置藏可按模板能化N7P的聚合,生成引物,这标示复制志始的完成。 (二)延伸 从起点引物合成到双链分离,其同主要行为是新链廷长 DpolⅢ在引物的3'-M端,按模板碱基序,催化加入的dTPs生成磷酸二蓝键,子 链的延长按5'→3'方向延,其速度阴当快。E0li基因组,即全套基因染色体上的M 约3000h。按20分钟一代,每秒M入的核甘截数达2500p。随从链先是生成若干短 的/喷片段,片段之间的接山M水解掉引物,m下的空缺(gp)山D40lI催化 填补,厚山连接将两个片段连一起。 主要反应: 聚合Ⅲ在引物3'端紧随复制叉连续合成前导链 前导特:延长方向和复制叉前移方向一致的新链,他较早开始合成 解链继续全适当位置,反向合成滞后链引物,聚合酶在引物3'端反向合成冈崎片段, 此反复断续合成: 适当位置:距起点1000~2000.滞后链引物在此反向合成 滞后轴:延长方向和复制叉前移方向相反的新链,至少滞后1000-2000 冈崎片段: DNA复制时合成的1000~2000核苷酸片段。即滞后链的合成单位 冈崎片段合成企前一个引物5'端,山聚合酶1切除引物并填补 山连接酶连接相邻的冈崎片段: 直全复制义前移全终点(终止子) 复制过程中 DM分子的两条链是尼向 滞后链续合成,称之为半不逢缤合成 目万 的合求方 所有公成新的五补员 了点 个盾,1968年川本学者冈过实验卧究H标记的氧甘为度梯度高心技, 提出了半小连续复制座论。 A解链复制时,以5走向为模板的复制徒可顺若解链方向延长,其复制过程是 续的,此链称为前导链(lem md)。而沿者解链 向了→3模板徒合成的互补能,出 现了复制方向与解徒方向反,此州,必须等模板徒解 出足够长度,在引物3 0H大端 ·了万问先合成小的财片段(可片段,心这些片段是不连羹的,最后连成一条完整的 链,称后随旋(agging strand).。前导链的连续性在许多因素作用下也会出现不连装性。刻 模板链的损伤、一条链上有多个复制虑始点、复制因子和底物供应不足等,都会引起前导链 复御的中断,并从一新的起始点开始复制。前导链和后随链是指同一复制又上的两条链