安徽医科大学基础医学院：《生物化学》课程教学资源（PPT课件讲稿）第22章 常用分子生物学技术的原理及其应用 The Popular Technology in Molecular Biology：Principle and Application

原位杂交 in situ hybridization ■ 即组织原位杂交，指组织切片或细胞 涂片直接用于杂交分析。先经适当处 理，使细胞通透性增加，让深汁进入 细胞内与①WA或RA杂交。因此原： 杂交可以确定深针的互补序列在胞内 的空间位置，这一点具有重要的生衫 学和病理学意义

原位杂交 in situ hybridization ▪ 即组织原位杂交，指组织切片或细胞 涂片直接用于杂交分析。先经适当处 理，使细胞通透性增加，让探针进入 细胞内与DNA或RNA杂交。因此原位 杂交可以确定探针的互补序列在胞内 的空间位置，这一点具有重要的生物 学和病理学意义

第二节 聚合酶链反应 Polymerase Chain Reaction

第 二 节 聚 合 酶 链 反 应 Polymerase Chain Reaction

PCR技术 polymerase chain reaction PCR即聚合酶链反应技术，是指利用耐热 ①A聚合酶的反复作用，通过变性-延伸 复性的循环操作，在体外迅速将①A模板 扩增数百万倍的一种操作技术。 理论上可在2小时内将一个①A分子扩增 到10-10倍，从而大大提高对其进行分新 研究的速度

PCR技术 polymerase chain reaction ▪ PCR即聚合酶链反应技术，是指利用耐热 DNA聚合酶的反复作用，通过变性-延伸- 复性的循环操作，在体外迅速将DNA模板 扩增数百万倍的一种操作技术。 ▪ 理论上可在2小时内将一个DNA分子扩增 到106 -109倍，从而大大提高对其进行分析 研究的速度

一、基本工作原理 Template DNA 5′ Primer 1 5 5 -5'Primer 2 Cycle 1 5 Cycle 2 5

5 Primer 1 5 Primer 2 Cycle 2 Cycle 1 5 5 5 5 5 5 Template DNA 5 5 5 5 5 5 5 5 一、基本工作原理

Cycle 3 5 5 5 5 5 5 5' 25~30次循环后，模板DNA的含量 可以扩大100万倍以上

Cycle 3 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 25～30 次循环后，模板DNA的含量 可以扩大100万倍以上