(二)RA印渍技术 Northern blotting 又称为Vorthern杂交,即RA①WA杂交分析。 是一种将RA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维 素膜上的方法。 ■玉要用于检则某一组织或细胞中已和的特异 mRA的表达水平以及比较不同组织和细胞的 同一基因的表达嘴况
(二)RNA印渍技术 Northern blotting ▪ 又称为Northern杂交,即RNA-DNA杂交分析。 是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维 素膜上的方法。 ▪ 主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异 mRNA的表达水平以及比较不同组织和细胞的 同一基因的表达情况
(三)蛋白质印渍艾术 Western blotting ■又称为estm杂交,或免交印渍文术, 即利用抗原抗体反应,检刚转移到销 酸纤维素膜上的特异性蛋白质。 ■应用:用于检观测样品中特异性蛋白质 的存在、细胞中特异蛋白质的半定量 分析以及蛋白质分子的相互作用研究 等
(三)蛋白质印渍技术 Western blotting ▪ 又称为Western杂交,或免疫印渍技术, 即利用抗原-抗体反应,检测转移到硝 酸纤维素膜上的特异性蛋白质。 ▪ 应用:用于检测样品中特异性蛋白质 的存在、细胞中特异蛋白质的半定量 分析以及蛋白质分子的相互作用研究 等
限制性内切酶 RNA样品 酶切DNA溶液 蛋白样品 电泳 转移 杂交 转移到NC膜后与 转移到NC膜或尼龙膜 转移到NC膜或PVDF 标记探针杂交 后与标记探针杂交 膜后与抗体反应 放或 三种印迹技术的此械 射化 自学 显显 影色 DNA印迹 RNA印迹 蛋白印迹
三种印迹技术的比较
(一)①CA印迹技术(Southern6 otting 用于基因组①A、重组质粒和噬菌体的 分析。 (二) RWA印迹技术Northern6 otting 用于RA的定性定量分析。 (三)蛋白质的印迹分析(Western60tt拉 用于蛋白质定性定量及相互作用研竞
(一)DNA印迹技术(Southern blotting) 用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体的 分析。 (二)RNA印迹技术(Northern blotting) 用于RNA的定性定量分析。 (三)蛋白质的印迹分析 (Western blotting) 用于蛋白质定性定量及相互作用研究
斑京印迹 ①ot6 otting ■ 斑京杂交法是不经过电泳,而将被检标 本直接京到膜上,烘烤固定,用于杂交。 这种方法耗时短,可做半定量分析,一 张模上可同时检则多个样品
斑点印迹 Dot blotting ▪ 斑点杂交法是不经过电泳,而将被检标 本直接点到膜上,烘烤固定,用于杂交。 这种方法耗时短,可做半定量分析,一 张膜上可同时检测多个样品