细胞内DNA、RNA及过氧化物酶的原位显示实验目的:掌握原位显示细胞内DNA、RNA、过氧化物酶的方法。任课教师:彭惠民研究方向:糖尿病分子遗传机制;邮箱:phm614@qq.com办公室电话:65712015
细胞内DNA、RNA及过氧化物酶的 原位显示 实验目的: 掌握原位显示细胞内DNA、RNA、 过氧化物酶的方法。 任课教师:彭惠民 研究方向:糖尿病分子遗传机制; 邮箱:phm614@qq.com 办公室电话:65712015
·实验内容:、一、细胞内DNA和RNA的原位显示·原理:DNA和RNA因聚合程度的不同,可被甲基绿一哌洛宁混合染液染成不同的颜色,DNA聚合程度高,被甲基绿染成蓝绿色;RNA聚合程度低,被哌洛宁染成红色
• 实验内容: • 一 、 细胞内DNA和RNA的原位显示 • 原理:DNA和RNA因聚合程度的不 同,可被甲基绿—哌洛宁混合染液 染成不同的颜色,DNA聚合程度高, 被甲基绿染成蓝绿色;RNA聚合程 度低,被哌洛宁染成红色
二、细胞内过氧化物酶的原位显示原理:过氧化物酶能将联苯胺氧化为蓝色或棕色产物,由此显示细胞内过氧化物酶的存在和分布
二、细胞内过氧化物酶的原位显示 • 原理:过氧化物酶能将联苯胺氧化 为蓝色或棕色产物,由此显示细胞 内过氧化物酶的存在和分布
DNA和RNA显示方法:(1)制备蟾蜍血涂片要求血膜较薄,充分晾于(2)70%酒精固定3分钟,细水冲(3)玻片晾干后,甲基绿一哌洛宁混合染液染色15~18分钟(4)(不冲洗)晾干后低倍镜、油镜观察过氧化物酶显示方法:骨髓涂片,要求涂薄、0.5%硫酸铜溶液固定5分钟晾干后,联苯胺染液染色8分钟1%番红染液复染1分钟细水冲,晾干后低倍镜、油镜下镜检
• DNA和RNA显示方法: • (1)制备蟾蜍血涂片 • 要求血膜较薄,充分晾干 • (2)70%酒精固定3分钟,细水冲 • (3)玻片晾干后,甲基绿—哌洛宁混合染液染 色15~18分钟 • (4)(不冲洗)晾干后低倍镜、油镜观察 • 过氧化物酶显示方法: • 骨髓涂片,要求涂薄 • 0.5%硫酸铜溶液固定5分钟 • 晾干后,联苯胺染液染色8分钟 • 1%番红染液复染1分钟 • 细水冲,晾干后低倍镜、油镜下镜检