分子的活化与去活化 1.辐射跃迁的类型 反系间 振动弛豫 内转移 窜跃 共振荧光：1012sec 荧光 荧 光：108sec 鑫 光：1-104sec 迟滞荧光：102-104sec 紫外可见吸收光谱 2.无辐射跃迁的类型 振动弛豫：V.1012sec 外转移：无辐射跃迁 迟滞荧光 回到基态 内转移：S2S1能级 紫外可见共振荧光光谱 光 之间有重叠 系间窜跃：S2T1能级 之间有重叠 反系间窜跃：由外部获 取能量后 外转移 T1-S2
分子的活化与去活化 分子的活化与去活化 S 0 S1 T1 S 2 紫 外 可 见 吸 收 光 谱 外转移 紫 外 可 见 共 振 荧 光 光 谱 内转移 荧光 系间 窜跃 磷 光 反系间 窜跃 迟 滞 荧 光 振动弛豫 ２. 无辐射跃迁的类型 无辐射跃迁的类型 振动弛豫: V r 10-12sec 外 转 移:无辐射跃迁 回到基态 内 转 移:S 2~S 1能级 之间有重叠 系间窜跃: S 2~T 1能级 之间有重叠 反系间窜跃:由外部获 取能量后 T1 ~ S 2 １. 辐射跃迁的类型 辐射跃迁的类型 共振荧光：10-12 sec 荧 光：10-8 sec 磷 光：1~10-4 sec 迟滞荧光:10 2~10-4 sec
(二)分子荧光（磷光）光谱 1.荧光（磷光）激发光谱与发射光谱 荧光（磷光）均为光致发光，在光辐射的作用下，荧光物质发射出不 同波长的荧光。 M+∑hy:→MX MN→MK+∑ i=l F48oo固定em=620nm(MAX) A.激发光谱 4400 4000 固定发射波长 3600 3200 扫描激发波长 =290nm(MAX)） 2800 2400 荧光激发光谱与 2000 紫外可见吸收光 1600 谱类似 1200 800 400 0手u中uu中中中w中u中中u中w中u中uu中u 200250300350400450500550600650700750800850900
(二）分子荧光(磷光)光谱 1. 荧光(磷光)激发光谱与发射光谱 激发光谱与发射光谱 荧光(磷光)均为光致发光，在光辐射的作用下，荧光物质发射出不 同波长的荧光。 A. 激发光谱 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 850 900 0 400 800 1200 1600 2000 2400 2800 3200 3600 4000 4400 4800 IF λ 固定λ em=620nm(MAX) =620nm(MAX) λex =290nm (MAX) 固定发射波长 扫描激发波长 MX ⇒ MX* + ∑ = n i 1 hvi ∑ = ⇒ + n j 1 MX MX hv j * 荧光激发光谱与 紫外-可见吸收光 谱类似
B.发射光谱（荧光光谱） 固定激发波长 扫描发射波长 发射光谱的形状与激发波长无关： 分子的激发光谱可能含有几个激发带，但发射光谱只含一个发射带： 即使分子被激发到高于S的电子态，由于经过极快的内转换和振动弛豫降 到S,电子态的最低振动、转动能级，然后以辐射形式释放能量回到基态。 C.激发光谱与发射 48o0目固定em=620nm(MAX)” 固定2ex=290nm(MAX) 4400 光谱的镜像关系 1◆4 4000 3600 3200 cF 2800 1 2400 +4 2000 1600 1200 800 400 3 01 200250 300350400450500550600650700750800850900 ex =290nm(MAX) %em=620nm(MAX)
200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 850 900 0 400 800 1200 1600 2000 2400 2800 3200 3600 4000 4400 4800 I F λ λ ex =290nm (MAX) 固定 λ em=620nm(MAX) =620nm(MAX) 固定 λ ex=290nm (MAX) λ em = 620nm(MAX) B. 发射光谱 (荧光光谱 ) 固定激发波长 扫描发射波长 C. 激发光谱与发射 激发光谱与发射 光谱的镜像关系 光谱的镜像关系 S 0 4 3 2 1 S 1 4 3 2 1 发射光谱的形状与激发波长无关： 分子的激发光谱可能含有几个激发带，但发射光谱只含一个发射带； 即使分子被激发到高于 S1的电子态，由于经过极快的内转换和振动弛豫降 到 S1电子态的最低振动、转动能级，然后以辐射形式释放能量回到基态。 1 → 4 1 → 3 1 → 2 1 → 1 1 → 4 1 → 4 1 → 2 1 → 1
D.磷光光谱 与发射光谱相同条件下的磷光光谱 》J 4400 激发光谱 4000 3600 3200 发射光谱 2000 1600 1200 800 400 0手中中中中中+中++中中中 200250300350400450500550600650700750800850900
200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 850 900 0 400 800 1200 1600 2000 2400 2800 3200 3600 4000 4400 4800 IF λ D.磷光光谱 与发射光谱相同条件下的磷光光谱 激发光谱 发射光谱
2. 三维荧光光谱 Ircf(dx、m) 固定发射波长、扫描激发波长 数到新做别指格他的组和保瑞温梦和到的 To下甲aaeT EM 葱的激发光谱
2. 三维荧光光谱 I F ∝f (λex 、λem) 蒽的激发光谱 固定发射波长、扫描激发波长 固定发射波长、扫描激发波长