选择性好 357377400 580 ⊙OAd 20 蒽 菲 蒽的激发和发射光谱 菲在360nml以上无吸收，用 365nm激发光时，菲无荧光， 400 380 可以在400nm测定蒽的荧光。 350 ·在265nm,蒽和菲均有吸收， 以此波长的光激发，在350nm 只有菲有荧光，故可测定菲。 菲和蒽的荧光光谱 (激发波长265nm)
选择性好 蒽的激发和发射光谱 菲和蒽的荧光光谱 （激发波长265 nm) 蒽 菲 •菲在360 nm以上无吸收，用 365 nm激发光时，菲无荧光， 可以在400 nm测定蒽的荧光。 •在265 nm, 蒽和菲均有吸收， 以此波长的光激发，在350nm 只有菲有荧光，故可测定菲
第二节基本原理 含有n和π电子的分子的几种能态 元兴 n 元 基态 单重态 单重态 三重态
含有n和π电子的分子的几种能态 基态 单重态 单重态 三重态 ↑↓ ↑ ↑↓ ↑↓ π ↑↓ ↑↓ ↑ ↑ n ↓ ↓ ↑ π* 第二节 基本原理
单重态 三重态 S2 振动弛豫 内转换 =0 =0 T 系间 跨越 =0 脚 翻 山明 S )三0 入3 荧光 外转换 磷光 振动池豫 激发 (熄灭) 图4.1荧光和磷光体系能级图
振动弛豫：非辐射跃迁形式，在溶液中， 激发态分子通过与溶剂分子的碰撞而将 部分振动能量传递给溶剂分子，其电子 则返回到同一电子激发态的最低振动能 级，此过称为。 发生条件：在同一电子能级内进行 时间为：10-12s
振动弛豫：非辐射跃迁形式，在溶液中， 激发态分子通过与溶剂分子的碰撞而将 部分振动能量传递给溶剂分子，其电子 则返回到同一电子激发态的最低振动能 级，此过称为~ 。 发生条件：在同一电子能级内进行 时间为：10-12 s
内部能量转换（内部猝灭）当两个电子激发态之 间的能量相差较小，以致其振动能级有重叠时， 受激分子常由高电子能级以无辐射跃迁方式转 移至低电子能级。 内转换发生在不同能阶，没有同阶转换。 荧光发射：分子通过内转换及振动弛豫，返回到 第一激发态的最低振动能级，然后再以辐射形 式发射光量子而返回到基态的任意振动能级上， 此时发射的光量子为荧光。 发射荧光的波长比激发光的波长要长
内部能量转换（内部猝灭）当两个电子激发态之 间的能量相差较小，以致其振动能级有重叠时， 受激分子常由高电子能级以无辐射跃迁方式转 移至低电子能级。 内转换发生在不同能阶，没有同阶转换。 荧光发射：分子通过内转换及振动弛豫，返回到 第一激发态的最低振动能级，然后再以辐射形 式发射光量子而返回到基态的任意振动能级上， 此时发射的光量子为荧光。 发射荧光的波长比激发光的波长要长