第一节概述 等,作为分析时选择余地大;而气相色谱并不可能的。 ③液相色谱通常在室温下操作,较低的温度,一般有利 于色谱分离条件的选择 (3)由于液体的扩散性比气体的小105倍,因此,溶质在液 相中的传质速率慢,柱外效应就显得特别重要;而在 气相色谱中,柱外区域扩张可以忽略不计。 (4)液相色谱中制备样品简单,回收样品也比较容易,而 且回收是定量的,适合于大量制备。但液相色谱尚缺 乏通用的检测器,仪器比较复杂,价格昂贵。在实际 应用中,这两种色谱技术是互相补充的
6 第一节 概 述 等,作为分析时选择余地大;而气相色谱并不可能的。 ③ 液相色谱通常在室温下操作,较低的温度,一般有利 于色谱分离条件的选择。 (3)由于液体的扩散性比气体的小105倍,因此,溶质在液 相中的传质速率慢,柱外效应就显得特别重要;而在 气相色谱中,柱外区域扩张可以忽略不计。 (4)液相色谱中制备样品简单,回收样品也比较容易,而 且回收是定量的,适合于大量制备。但液相色谱尚缺 乏通用的检测器,仪器比较复杂,价格昂贵。在实际 应用中,这两种色谱技术是互相补充的
第一节概述 综上所述,高效液相色谱法具有高柱效、高选择性、分 析速度快、灵敏度高、重复性好、应用范围广等优点。该法 已成为现代分析技术的重要手段之一,目前在化学、化工 医药、生化、环保、农业等科学领域获得广泛的应用
7 第一节 概 述 综上所述,高效液相色谱法具有高柱效、高选择性、分 析速度快、灵敏度高、重复性好、应用范围广等优点。该法 已成为现代分析技术的重要手段之一,目前在化学、化工、 医药、生化、环保、农业等科学领域获得广泛的应用
第二节高效液相色谱仪 高效液相色谱仪由高压输液系统、进样系统、分离系 统、检测系统、记录系统等五大部分组成(图14-2) 分析前,选择适当的色谱柱和流动相,开泵,冲洗柱子 待柱子达到平衡而且基线平直后,用微量注射器把样品注入 进样口,流动相把试样带入色谱柱进行分离,分离后的组分 依次流入检测器的流通池,最后和洗脱液一起排入流出物收 集器。当有样品组分流过流通池时,检测器把组分浓度转变 成电信号,经过放大,用记录器记录下来就得到色谱图 谱图是定性、定量和评价柱效高低的依据。 、高压输液系统
8 第二节 高效液相色谱仪 高效液相色谱仪由 高压输液系统、进样系统、分离系 统、检测系统、记录系统 等五大部分组成(图14-2)。 分析前,选择适当的色谱柱和流动相,开泵,冲洗柱子, 待柱子达到平衡而且基线平直后,用微量注射器把样品注入 进样口,流动相把试样带入色谱柱进行分离,分离后的组分 依次流入检测器的流通池,最后和洗脱液一起排入流出物收 集器。当有样品组分流过流通池时,检测器把组分浓度转变 成电信号,经过放大,用记录器记录下来就得到色谱图。色 谱图是定性、定量和评价柱效高低的依据。 一、高压输液系统
第二节高效液相色谱仪 高压输液系统由溶剂贮存器、高压泵、梯度洗脱装置 和压力表等组成。 1.溶剂贮存器溶剂贮存器一般由玻璃、不锈钢或氟塑 料制成,容量为1到2L,用来贮存足够数量、符合要求的流 动相。 2.高压输液泵高压输液泵是高效液相色谱仪中关键部 件之一,其功能是将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连 续不断地送入液路系统,使样品在色谱柱中完成分离过程。 由于液相色谱仪所用色谱柱径较细,所填固定相粒度很小 因此,对流动相的阻力较大,为了使流动相能较快地流过
9 第二节 高效液相色谱仪 高压输液系统由 溶剂贮存器、高压泵、梯度洗脱装置 和压力表 等组成。 1.溶剂贮存器 溶剂贮存器一般由玻璃、不锈钢或氟塑 料制成,容量为1到2 L,用来贮存足够数量、符合要求的流 动相。 2.高压输液泵 高压输液泵是高效液相色谱仪中关键部 件之一,其功能是 将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连 续不断地送入液路系统,使样品在色谱柱中完成分离过程。 由于液相色谱仪所用色谱柱径较细,所填固定相粒度很小, 因此,对流动相的阻力较大,为了使流动相能较快地流过
第二节高效液相色谱仪 色谱柱,就需要高压泵注入流动相。 对泵的要求:输出压力高、流量范围大、流量恒定、无 脉动,流量精度和重复性为0.5%左右。此外,还应耐腐蚀, 密封性好。 高压输液泵,按其性质可分为恒压泵和恒流泵两大类 恒流泵是能给出恒定流量的泵,其流量与流动相粘度和 柱渗透无关。 恒压泵是保持输出压力恒定,而流量随外界阻力变化而 变化,如果系统阻力不发生变化,恒压泵就能提供恒定的流 量 10
10 第二节 高效液相色谱仪 色谱柱,就需要高压泵注入流动相。 对泵的要求:输出压力高、流量范围大、流量恒定、无 脉动,流量精度和重复性为0.5%左右。此外,还应耐腐蚀, 密封性好。 高压输液泵,按其性质可分为恒压泵和恒流泵两大类。 恒流泵是能给出恒定流量的泵,其流量与流动相粘度和 柱渗透无关。 恒压泵是保持输出压力恒定,而流量随外界阻力变化而 变化,如果系统阻力不发生变化,恒压泵就能提供恒定的流 量