校酸酶 1、核酸酶的分类 核糖校瞼酶( RNase) (1)根据对底物的脱氧核糖核瞼酶( DNase) 专一性分为 非特异性核酸酶 核酸内勿酶 2)根据切割位点分为核外切酶 2、核酸酶的作用特点
核 酸 酶 1、核酸酶的分类 (1)根据对底物的 专一性分为 (2)根据切割位点分为 核糖核酸酶(RNase) 脱氧核糖核酸酶(DNase) 非特异性核酸酶 核酸内切酶 核酸外切酶 2、核酸酶的作用特点
外切核酸酶对核酸的水解仳点 BBB BB B aaaa QQOOH 3 牛牌磷酸二酯酶 蛇毒磷酸二酯酶 (5′端外切5得3) (3′端外切3得5)
外切核酸酶对核酸的水解位点 5´ p p p p OH B p p p p 3´ B B B B B B B 牛脾磷酸二酯酶 ( 5´端外切5得3) 蛇毒磷酸二酯酶 ( 3´端外切3得5)
内切核酸酶对RNA的水解位点示意图 Py Pu Py Py G A C U G A m RNAasernaase rnaase t RNAase T Pu:嘌呤 Py:嘧啶
内切核酸酶对RNA的水解位点示意图 5´ p p p p OH Py Pu Py Py 1´ p p p G A C U p p p G A 3´ RNAase I RNAase I RNAase T1 RNAase T1 Pu :嘌呤 Py:嘧啶
限制性内切酶 原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基 对所组成的特异的具有二重旋转对称性的回文序列,并在此序 列的某位点水解DNA双螺旋链,产生粘性末端或平末端,这类 酶称为限制性内切酶( ristriction endonuclease)。 ●类型 ●命名 ●义
限制性内切酶 • 类型 •命名 • 意义 原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基 对所组成的特异的具有二重旋转对称性的回文序列,并在此序 列的某位点水解DNA双螺旋链,产生粘性末端或平末端,这类 酶称为限制性内切酶(ristriction endonuclease)
常用的DNA限制性内切酶的专一性 酶 辨认的序列和切口 说明 Alu i ·AGCT。 ·TCGA 四核苷酸,平端切口 Bam hi GGATCO。 六核苷酸,粘端切口 CCTAGG… Bgl i … AGATCT∴ g 六核苷酸,粘端切口 TCTAG4… Ecor i GAATTO∴ 六核苷酸,粘端切口 …… CTTAAG… HindⅢ AAGCTT。 六核苷酸,粘端切口 TTCGAA… Sali GTCGAC…… 六核苷酸,粘端切口 CAGCTG Sma i … CCCGGG… 六核苷酸,平端切口 .GGGCCC
常用的DNA限制性内切酶的专一性 酶 辨认的序列和切口 说明 ‥ ‥A G C T ‥‥ ‥ ‥T C G A ‥ ‥ ‥ ‥G G A T C C ‥‥ ‥ ‥C C T A G G ‥‥ ‥ ‥A G A T C T ‥‥ ‥ ‥T C T A G A ‥‥ ‥ ‥G A A T T C ‥‥ ‥ ‥C T T A A G ‥‥ ‥ ‥A A G C T T‥‥ ‥ ‥T T C G A A ‥‥ ‥ ‥G T C G A C ‥‥ ‥ ‥C A G C T G ‥‥ ‥ ‥C C C G G G ‥‥ ‥ ‥G G G C C C ‥‥ Bam H I Alu I Bgl I Eco R I Hind Ⅲ Sal I Sma I 四核苷酸,平端切口 六核苷酸,平端切口 六核苷酸,粘端切口 六核苷酸,粘端切口 六核苷酸,粘端切口 六核苷酸,粘端切口 六核苷酸,粘端切口