第六章化学检测 ■根据物质的化学性质而对物质进行定量 定性测定。 应用最早、最广泛的检测技术 简便、快速、操作容易
第六章 化学检测 ◼ 根据物质的化学性质而对物质进行定量、 定性测定。 ◼ 应用最早、最广泛的检测技术 ◼ 简便、快速、操作容易
糖类的化学检测 糖类包括多糖、双糖、单糖 单糖和某些双糖具有游离羰基—还原糖 ■多糖和蔗糖等无还原性——非还原糖 ■糖类化学检测主要是利用游离羰基的还原 性质,与试剂(氧化剂)进行氧化还原反 应而进行测定的 非还原糖必须转化为还原糖再进行测定
一 糖类的化学检测 ◼ 糖类包括多糖、双糖、单糖 ◼ 单糖和某些双糖具有游离羰基——还原糖 ◼ 多糖和蔗糖等无还原性——非还原糖 ◼ 糖类化学检测主要是利用游离羰基的还原 性质，与试剂（氧化剂）进行氧化还原反 应而进行测定的。 ◼ 非还原糖必须转化为还原糖再进行测定
最常用的试剂:斐林( Fehling)试剂 基本组成:A:CuSO4溶液 B:NaOH和酒石酸钾钠溶 液 使用时A、B等体积混合(生成 酒石酸钾钠铜) 酒石酸钾钠铜是氧化剂,可与还原糖的 游离羰基发生氧化还原反应,而进行糖 的测定
◼ 最常用的试剂：斐林（Fehling）试剂 ◼ 基本组成：A：CuSO4溶液 B: NaOH和酒石酸钾钠溶 液 使用时A、B等体积混合(生成 酒石酸钾钠铜） ◼ 酒石酸钾钠铜是氧化剂，可与还原糖的 游离羰基发生氧化还原反应，而进行糖 的测定
定糖常用方法 兰爱农( ane-Eynon)法 次甲基蓝(亚甲基蓝、四甲基蓝)法、置换法 直接滴定法 反应终点用次甲基蓝指示剂显示(还原糖滴定 斐林试剂,由于次甲基蓝氧化能力比二价铜弱, 待二价铜全部还原后,过量1D还原糖使次甲基 蓝还原,蓝色消失) ■多糖或其他非还原糖需转化为还原糖后再滴定 如淀粉,可用酸解或酶解
定糖常用方法 ◼ 1 兰——爱农（Lane-Eynon）法 ◼ 次甲基蓝（亚甲基蓝、四甲基蓝）法、置换法、 直接滴定法 ◼ 反应终点用次甲基蓝指示剂显示（还原糖滴定 斐林试剂，由于次甲基蓝氧化能力比二价铜弱， 待二价铜全部还原后，过量1D还原糖使次甲基 蓝还原，蓝色消失） ◼ 多糖或其他非还原糖需转化为还原糖后再滴定 如淀粉，可用酸解或酶解
操作要点 1)斐林试剂的标定 T(a)标定预备试验 A、B各5mL+10mL水(250mL三角瓶中)摇匀, 加热至沸腾,十2D1%次甲基蓝溶液,用标准葡 萄糖液滴定至蓝色消失,耗标准葡萄糖液(O.1 %或02%)V1mL。 (b)标定 ■A、B各5mL+10mL水(250mL三角瓶中)摇匀 从滴定管中预先加入(V1-1)mηL标准葡萄糖液, 摇匀后加热加热至沸腾,十2D1%次甲基蓝溶液 用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失(滴定在1min 内完成),记录消耗标准葡萄糖液的总毫升数
操作要点 ◼ （1 ）斐林试剂的标定 ◼ （a）标定预备试验 A、B各5mL＋10mL水（250mL三角瓶中）摇匀， 加热至沸腾，＋2D1％次甲基蓝溶液，用标准葡 萄糖液滴定至蓝色消失，耗标准葡萄糖液（0.1 ％或0.2％）V1mL。 ◼ （b）标定 ◼ A、B各5mL＋10mL水（250mL三角瓶中）摇匀， 从滴定管中预先加入（V1 -1)mL标准葡萄糖液， 摇匀后加热加热至沸腾，＋2D1％次甲基蓝溶液， 用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失（滴定在1min 内完成），记录消耗标准葡萄糖液的总毫升数 V0