几种限制性内切酶的作用位点 返回
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目的基因的制备 目的基因就是所需要克隆的外源基因 制备方法: 1、人工合成法 2、逆转录法 3、用限制性内切酶直接从染色体DNA中分离 4、用PCR法扩增目的基因片段 返回
目的基因的制备 目的基因就是所需要克隆的外源基因 制备方法: 1、人工合成法 2、逆转录法 3、用限制性内切酶直接从染色体DNA中分离 4、用PCR法扩增目的基因片段 返回
目的基因的制备:人工合成法 较小分子基因可用人工化学合成的方法获得 DNA化学人工合成的方法已经自动化 人工合成目的基因的先决条件是基因的核苷 酸序列是已知的 缺点是:1、不能合成太大的基因;2、合成 基因时遗传密码的兼并现象会为选择密码带 来很大困难;3、费用较高 返回
目的基因的制备:人工合成法 较小分子基因可用人工化学合成的方法获得 DNA化学人工合成的方法已经自动化 人工合成目的基因的先决条件是基因的核苷 酸序列是已知的 缺点是:1、不能合成太大的基因;2、合成 基因时遗传密码的兼并现象会为选择密码带 来很大困难;3、费用较高 返回
目的基因的制备:逆转录法 若所需基因较大,人工合成有困难,从组织 中分离提取也不容易,则可利用逆转录法合 成。 该法是:以编码某特异多肽的mRNA为模板, 在逆转录酶的作用下反转录成该多肽mRNA 的互补DNA(cDNA);再以cDNA为模板, 在DNA聚合酶I作用下,最终合成编码该多 肽的双链DNA(dsDNA)。 可用于真核生物目的基因的获得 返回
目的基因的制备:逆转录法 若所需基因较大,人工合成有困难,从组织 中分离提取也不容易,则可利用逆转录法合 成。 该法是:以编码某特异多肽的mRNA为模板, 在逆转录酶的作用下反转录成该多肽mRNA 的互补DNA(cDNA);再以cDNA为模板, 在DNA聚合酶I作用下,最终合成编码该多 肽的双链DNA(dsDNA)。 可用于真核生物目的基因的获得 返回