《分子生物学理论与实验》 实验课程部分 复旦大学基础医学院医学实验教学中心 潘銮凤,东5号楼305室 021-54237329;Ifpan@shmu.edu.cn
《分子生物学理论与实验》 实验课程部分 复旦大学基础医学院医学实验教学中心 潘銮凤，东5号楼305室 021-54237329; lfpan@shmu.edu.cn •1
实验安排 实验一:DNA重组与转化 实验二:重组DNA提取与鉴定 课程负责人:潘銮凤 实验三:细胞总RNA提取及逆转录教师:王松梅(秘书) 实验四:实时荧光定量PCR 邵红霞 实验五: SDS-PAGE 潘銮凤 实验六: Western blot 实验七八:荧光原位杂交
实验安排 •2 实验一：DNA重组与转化 实验二：重组DNA提取与鉴定 实验三：细胞总RNA提取及逆转录 实验四：实时荧光定量 PCR 实验五：SDS-PAGE 实验六：Western Blot 实验七八：荧光原位杂交 课程负责人：潘銮凤 教师：王松梅（秘书） 邵红霞 潘銮凤
分子生物学实验流程图 质粒重组→转化→鉴定→质粒大量扩增→探针制备→杂交 细胞培养一RNA提取一→反转录一实时定量PCR 涂片-荧光原位杂交←组织切片 细胞培养一蛋白提取一浓度测定→→ PAGE+Western Blot ELISA
•3 分子生物学实验流程图 质粒重组 转化 鉴定 质粒大量扩增 探针制备 杂交 细胞培养 RNA提取 反转录 实时定量PCR 涂片-荧光原位杂交 组织切片 细胞培养 蛋白提取 浓度测定 PAGE Western Blot ELISA
实验注意事项 1.实验用品分组(3人一组)标记,放于实验桌上。实验开 始时清点;实验结束,请各组同学将用品归于原位,整理好 本组桌面后再离开。需要回收的器皿初步冲洗后浸泡在水槽 内的盆中(如玻璃耗材、部分离心管等,有疑问请咨询带教 老师) 多验开始彍珍乱翻歌! 每组2个盆,价桶,分列放冰,流涔妧级, 固体妧级,束时每组自行清理
实验注意事项 1. 实验用品分组（3人一组）标记，放于实验桌上。实验开 始时清点；实验结束，请各组同学将用品归于原位，整理好 本组桌面后再离开。需要回收的器皿初步冲洗后浸泡在水槽 内的盆中（如玻璃耗材、部分离心管等，有疑问请咨询带教 老师） •6 实验开始前请勿乱翻动！ 每组2个盆，1个桶，分别放冰，液体垃圾， 固体垃圾，结束时每组自行清理
2.实验试剂: 常规试剂通常每组一份放在桌上,部分试剂2组一份或 大桌放一管。试剂盒全班一套或两套 需要低温放置的试剂在冰箱下层的冰盆里,需在放在冰盒 中保温,特别是酶,加完要及时放回冰盒 试剂盒一般是全班一套或两套,放在讲台实验桌上,加完 及时返回,同学可相互询问一下试剂的动向 有些常规用试剂(如水,加样 buffer),可室温保存,多 次使用
•7 2. 实验试剂： 常规试剂通常每组一份放在桌上，部分试剂2组一份或一 大桌放一管。试剂盒全班一套或两套 需要低温放置的试剂在冰箱下层的冰盆里，需在放在冰盒 中保温，特别是酶，加完要及时放回冰盒 试剂盒一般是全班一套或两套，放在讲台实验桌上，加完 及时返回，同学可相互询问一下试剂的动向 有些常规用试剂（如水，加样buffer），可室温保存，多 次使用