鼠抗体的人源化改造 获取目的基因的两个思路： 1.用RT-PCR方法从杂交瘤细胞的mRNA中扩增VH及VL基因。 ①已经通过动物的免疫系统完成了亲和力成熟 2.用探针或者PCR从基因文库中钓取： ①通过人工建立基因文库，涵盖尽可能多的抗体基因用于筛选
鼠抗体的人源化改造 获取目的基因的两个思路： 1. 用RT-PCR方法从杂交瘤细胞的mRNA中扩增VH及VL基因。 ① 已经通过动物的免疫系统完成了亲和力成熟 2. 用探针或者PCR从基因文库中钓取； ① 通过人工建立基因文库，涵盖尽可能多的抗体基因用于筛选
改造对象与改造目的： 月 改谁？为什么改？ 0 对象：对已有的高亲和力，高特异性鼠抗基因 进行人源化改造！（来源于杂交瘤细胞） 02 目的：降低已有的高亲和力，高特异性鼠抗的 免疫原性，提高其在人体内的半衰期和功能性
改造对象与改造目的： 改谁？为什么改？ 对象：对已有的高亲和力，高特异性鼠抗基因 进行人源化改造！（来源于杂交瘤细胞） 01 目的：降低已有的高亲和力，高特异性鼠抗的 免疫原性，提高其在人体内的半衰期和功能性 02
高亲和力鼠抗体进行人源化改造的技术策略 01 免疫小服 02 的取抗体盖因 03 人源化改造 04 功能验证 通过抗原刺激小鼠免疫 通过杂交瘤技术获取特 在基因层面上进行人源 验证改造后的抗体是否 器官，通过生物体内的 异性单细胞克隆作为模 化改造。 具有亲本抗体的亲和力 免疫成熟来获得致敏B细 板，钓取抗体基因。 和特异性。 胞克隆 免疫与杂交瘤 抗体基因的钓 抗体的工程制 的构建 取 人源化改造 备
01 免 疫 小 鼠 通过抗原刺激小鼠免疫 器官，通过生物体内的 免疫成熟来获得致敏B细 胞克隆 02 钓 取 抗 体 基 因 通过杂交瘤技术获取特 异性单细胞克隆作为模 板，钓取抗体基因。 03 人 源 化 改 造 在基因层面上进行人源 化改造。 04 功 能 验 证 验证改造后的抗体是否 具有亲本抗体的亲和力 和特异性。 高亲和力鼠抗体进行人源化改造的技术策略
鼠抗体的人源化改造策略 基本原则： 替代原则：抗体的人源化改造就是指抗体的鼠源性部分由人类抗体基因所编码。（从鼠源换成人源） 重塑原则：鼠抗体的免疫原性重塑。（鼠抗体看着像人抗体。） Murine Chimeric Humanized Fully Human (0%human) (65%human) (>90%human) (100%human) Generic suffix -omab -ximab -zumab -umab High Potential for immunogenicity Low
鼠抗体的人源化改造策略 基本原则： 替代原则：抗体的人源化改造就是指抗体的鼠源性部分由人类抗体基因所编码。（从鼠源换成人源） 重塑原则：鼠抗体的免疫原性重塑。（鼠抗体看着像人抗体。）
鼠抗体人源化改造的类型 完整抗体 抗体类型 抗体片段 四链二价结构，既有FV段， 仅针对FV段的改造 也含有FC段 一恒定区人源化 二.可变区人源化 一一人-鼠嵌合抗体 改形抗体 镶面抗体
鼠抗体人源化改造的类型 抗体类型 抗体片段 仅针对FV段的改造 完整抗体 四链二价结构，既有FV段， 也含有FC段 一 .恒定区人源化 ——人-鼠嵌合抗体 二.可变区人源化 l ——改形抗体 l ——镶面抗体