基于人工染色体 技术的人g基因 的导入
基于人工染色体 技术的人Ig基因 的导入
染色体是基图的天然载体 1.人工染色体 定义：人工合成的，能在生物细胞中独立、稳定存在和遗传的人工重组 DNA分子，它至少应具备三种功能元件的类似组份：复制原点(origin of replication)、着丝点(centromere)和端粒子(telomere) 容量巨大，远超现有基因工程载体 目的基图与他两侧的基图或序列是天然的遗传 连顿，对目的基因有强火的保护作用 ■染色体工程的关能特点 一充分模拟天然染 色体对大片段基因信息的携带及 保护能力
染色体是基因的天然载体 目的基因与他两侧的基因或序列是天然的遗传 连锁，对目的基因有强大的保护作用 n染色体工程的关键特点 -充分模拟天然染 色体对大片段基因信息的携带及 保护能力。 1.人工染色体 定义：人工合成的，能在生物细胞中独立、稳定存在和遗传的人工重组 DNA 分子,它至少应具备三种功能元件的类似组份： 复制原点(origin of replication)、着丝点(centromere)和端粒子(telomere) 容量巨大，远超现有基因工程载体
染色体三大元件 Euchromatin Heterochromatin Centromere Telomere Exogenous DNA Heterochromatin 端粒重复序列(telomeric repeat,TEL)：定位于染色体末端一段序列，用于保护线状的DNA不被胞内 的核酸酶降解，以形成稳定的结构。 着丝粒(centromere,GE0：有丝分裂过程中纺锤丝的结合位点，使染色体在分裂过程中能正确分配到 子细胞中。在YAC中起到保证一个细胞内只有一个人工染色体的作用。 自主复制序列(autonomously repl ication sequences,ARS)一段特殊的序列，含有酵母菌中DNA进行 双向复制所必须的信号
端粒重复序列（telomeric repeat ， TEL）：定位于染色体末端一段序列，用于保护线状的 DNA 不被胞内 的核酸酶降解，以形成稳定的结构。 着丝粒（centromere ， CEN）：有丝分裂过程中纺锤丝的结合位点， 使染色体在分裂过程中能正确分配到 子细胞中 。在 YAC 中起到保证一个细胞内只有一个人工染色体的作用。 自主复制序列（autonomously replication sequences，ARS） 一段特殊的序列，含有酵母菌中 DNA 进行 双向复制所必须的信号。 染色体三大元件
2.YAC一一酵母人工染色体 容量巨大 构建文库 ●酵母人工染色体克隆载 YAC载体主要是用来构建 体的特点： 大片段DNA文库，特别 能容纳长达1000kb甚 用来构建高等真核生物的 至3000kb的外源DNA 基因组文库，往往一个 片段。特别适合针对抗 YAC载体可以容纳一个完 体基因复杂大片段的转 整的基因，并不用作常规 移 的基因克隆
2.YAC——酵母人工染色体 容量巨大 l 酵母人工染色体克隆载 体的特点： 能容纳长达 的外源DNA 片段。特别适合针对抗 体基因复杂大片段的转 移 构建文库 YAC 载体主要是用来 ，特别 用来构建高等真核生物的 基因组文库， ，并不用作常规 的基因克隆
3.YAC染色体的应用 3.1人类基因组建库 构建基因文库 抗体基因属于超大基因，而且轻链和 重链位于不同的基因位点，通过YAC 文库可以钓取和重组完整的抗体基因 片段 人基人基因的数目估计为5~10万多个，平均因 每30~50kb含有一个基因，因此一个YAC克 童毫雪中中妈 隆即可能包含一个完整的基因·换言之，用任一 基因旁或基因内的片段为探针便能筛选到含这 一基因的YAC克隆
人基人基因的数目估计为5～10万多个，平均因 每30~50kb含有一个基因，因此一个YAC克 隆即可能包含一个完整的基因．换言之，用任一 基因旁或基因内的片段为探针便能筛选到含这 一基因的YAC克隆. 3.1 人类基因组建库 抗体基因属于超大基因，而且轻链和 重链位于不同的基因位点，通过YAC 文库可以钓取和重组完整的抗体基因 片段 3.YAC染色体的应用