三斑点金免疫渗滤试验 (dot immunogold filtration assay,DIGFA) 本次实验以金免疫渗滤间接法检测 抗dsDNA抗体为例进行验证实验 Idfiaoy002
本次实验以金免疫渗滤间接法检测 抗dsDNA抗体为例进行验证实验 三 斑点金免疫渗滤试验 (dot immunogold filtration assay,DIGFA)
(一)实验原理 将纯化的dsDNA抗原点加包被在硝酸纤维素 (NC)膜上，并贴置于吸水材料上，加入待测血清，如待 测血清中含有抗dsDNA抗体，就与固相NC膜上的 dsDNA抗原结合形成复合物，再加入胶体金标记的 抗人IgG单抗与复合物结合，形成固相dsDNA-抗 dsDNA-金标抗人IgG大分子复合物，洗去过量的 抗体及标记物，大分子复合物聚集NC膜上，呈现红 色斑点（胶体金聚集）即为阳性
（一）实验原理 将纯化的dsDNA抗原点加包被在硝酸纤维素 (NC)膜上,并贴置于吸水材料上,加入待测血清，如待 测血清中含有抗dsDNA抗体，就与固相NC膜上的 dsDNA抗原结合形成复合物，再加入胶体金标记的 抗人IgG单抗与复合物结合，形成固相dsDNA－抗 dsDNA－金标抗人IgG大分子复合物，洗去过量的 抗体及标记物，大分子复合物聚集NC膜上，呈现红 色斑点（胶体金聚集）即为阳性
(二)试剂与器材 1.抗dsDNA抗体检测试剂盒（胶体金免疫斑点渗 滤法)包括①反应板（由塑料小盒、吸水垫料 和包被了dsDNA抗原的NC膜片组成)、②试 剂A(PBS)、③试剂B(胶体金标记抗人IgG单 抗)、滴管等。有商品出售。 2.待测血清临床筛选获得。 3.器材移液器、加样吸嘴、冰箱等
（二）试剂与器材 1.抗dsDNA抗体检测试剂盒(胶体金免疫斑点渗 滤法) 包括①反应板(由塑料小盒、吸水垫料 和包被了dsDNA抗原的NC膜片组成)、②试 剂A(PBS)、③试剂B(胶体金标记抗人IgG单 抗)、滴管等。有商品出售。 2.待测血清 临床筛选获得。 3.器材 移液器、加样吸嘴、冰箱等
●● ●●● e 2人份 海天甚惑 抗双链DNA抗体 斑点反应板 z2027100 双 DNA
●●● ●●●● 渗滤装置 盖 A 微孔膜 固定Ag/Ab) 吸水垫 同 底