3.寡核苷酸探针 特点： 探针长度较短（一般为10~50bp) 人工合成（避免天然探针的缺点） 尤其适合点突变的检测 由于探针的长度较短，特异性较低， 杂交信号较弱 临床分子生物学检验技术
3.寡核苷酸探针
(二)探针的长度 1、DNA和RNA探针 DNA探针通常为400500bp,如果探针长度超过1500bp, 杂交的本底就会很高。在探针标记过程中可以调整DNA探针的 长度。 RNA探针的长度相对于DNA探针而言就不那么容易控制。 在RNA探针标记过程中，RNA探针的长度实际上取决于将重组 DNA分子线性化的限制性内切酶的酶切位点。 临床分子生物学检验技术
（二）探针的长度 1、DNA和RNA探针
2.寡核苷酸探针 一般要求在10bp~50bp,作为探针，必需有足够的长 度以便和靶序列特异性杂交。如果探针太短，就会和靶序 列中的多个位点杂交，降低特异性。探针的最小长度取决 于其靶序列的复杂性。 临床分子生物学检验技术
一般要求在10bp～50bp，作为探针，必需有足够的长 度以便和靶序列特异性杂交。如果探针太短，就会和靶序 列中的多个位点杂交，降低特异性。探针的最小长度取决 于其靶序列的复杂性。 2.寡核苷酸探针
(三)核酸探针的标记 理想的探针标记物应具有以下特点 特异：靶序列特异 稳定：标记物与探针结合后，应不影响杂交反应， 尤其是杂交特异性、稳定性和Tm值 灵敏：标记物被检测 无毒：标记物对环境污染小，对人体无损伤 简便：操作简单 便宜：价格低廉 临床分子生物学检验技术
理想的探针标记物应具有以下特点 特异：靶序列特异 稳定：标记物与探针结合后，应不影响杂交反应， 尤其是杂交特异性、稳定性和Tm值 灵敏：标记物被检测 无毒：标记物对环境污染小，对人体无损伤 简便：操作简单 便宜：价格低廉
(三)核酸探针的标记 1.探针标记物的选择 放射性标记(32P标记) 优点：敏感、可靠、操作简单高效、易于除去旧探针 缺点：需要防护；并且有些核素半衰期较短，探针需重 复制备；费用贵 非放射性标记（生物素、地高辛或荧光素标记） 优点：对人体危害小；可较长时间贮存；成本低 缺点：灵敏度不如放射性探针；杂交条件受报告基因的 限制；重新杂交新探针比较难 临床分子生物学检验技术
1.探针标记物的选择