(二)胚胎干细胞建系培养（自学 (三)原生殖多能干细胞的建系培养 原生殖多能干细胞是指性腺原始生殖细胞经分 离培养后得到的一类具有多能性的细胞，其在 体外分化抑制培养时可增殖、操作和筛选。 。1.原生殖多能干细胞的分离方法 。2.原生殖多能干细胞的传代方法
11 ⚫ (二)胚胎干细胞建系培养（自学） ⚫ (三)原生殖多能干细胞的建系培养 ⚫ 原生殖多能干细胞是指性腺原始生殖细胞经分 离培养后得到的一类具有多能性的细胞，其在 体外分化抑制培养时可增殖、操作和筛选。 ⚫ 1．原生殖多能干细胞的分离方法 ⚫ 2．原生殖多能干细胞的传代方法
(四)精原干细胞 精原干细胞(spennatogonialstemcell,SSC)是睾丸曲细 精管生精上皮内可复制的多潜能双倍体细胞，并始终保持 着干细胞的原始状态直到青春期。青春期以后，在雄激素 的作用下，精原干细胞才开始不断增殖，一部分继续保留 作为干细胞(A型，另一部分转化为B型精原细胞并经数次 分裂后成为初级精母细胞。因此，可以认为A型精原干细胞 是具有多潜能性的干细胞，B型精原干细胞是一类能定向分 化的干细胞。精原干细胞是雄性动物中唯一可以自我增殖、 更新并向下一代传递遗传信息的细胞类型。对精原干细胞 的操作和修饰在建立转基因动物模型、制备乳腺生物反应 器等方面有重要意义。但是目前精原干细胞的建系方法尚 不成熟
12 ⚫ (四)精原干细胞 ⚫ 精原干细胞(spennatogonialstemcell，SSC)是睾丸曲细 精管生精上皮内可复制的多潜能双倍体细胞，并始终保持 着干细胞的原始状态直到青春期。青春期以后，在雄激素 的作用下，精原干细胞才开始不断增殖，一部分继续保留 作为干细胞(A型)，另一部分转化为B型精原细胞并经数次 分裂后成为初级精母细胞。因此，可以认为A型精原干细胞 是具有多潜能性的干细胞，B型精原干细胞是一类能定向分 化的干细胞。精原干细胞是雄性动物中唯一可以自我增殖、 更新并向下一代传递遗传信息的细胞类型。对精原干细胞 的操作和修饰在建立转基因动物模型、制备乳腺生物反应 器等方面有重要意义。但是目前精原干细胞的建系方法尚 不成熟
二、基因打靶 。1985年，Smithies利用同源重组方法将一段外 源质粒DNA定点插入到人转化细胞系染色体的 B一globin位点，首次实现了外源基因的定点整 合，进而产生了基因打靶技术。 基因打靶是应用同源重组原理将外源DNA定点 整合到宿主细胞基因组，替代靶序列整合在预 定的基因位点，从而改变细胞甚至生物个体遗 传特性的遗传操作方法。 13
13 二、基因打靶 ⚫ 1985年，Smithies利用同源重组方法将一段外 源质粒DNA定点插入到人转化细胞系染色体的 B—globin位点，首次实现了外源基因的定点整 合，进而产生了基因打靶技术。 ⚫ 基因打靶是应用同源重组原理将外源DNA定点 整合到宿主细胞基因组，替代靶序列整合在预 定的基因位点，从而改变细胞甚至生物个体遗 传特性的遗传操作方法