二、PCR反应过程（重点） 95℃ DNA单链 变性 72℃ 55℃ DNA双链 延伸 退火 DNA杂交链
二、PCR反应过程（重点） 退火 55℃ DNA杂交链 变性 95℃ DNA单链 延伸 72℃ DNA双链
二、PCR反应过程（重点） 95 互補的雙股DNA序列 70- 60- 田五 35 圖中绿色的部分，是DNA分子中要擴增的片段
二、PCR反应过程（重点）
PCR扩增产物量Y=(1十X)P X→平均每次的扩增效率 平台期 n→循环次数 扩 指数期 增 理论扩增值：以2指数递增，扩增 初期 物 25~30个循环，目标DNA可增加230也 量 就是109倍。 循环次数 实际扩增值：X平均约为75%，所以实际上进行30个循环后，扩增倍数 一般为106~107
PCR扩增产物量Y=(1＋X)n X 平均每次的扩增效率 n 循环次数 理论扩增值：以2 n指数递增，扩增 25～30个循环，目标DNA可增加2 30也 就是109倍。 实际扩增值：X平均约为75%，所以实际上进行30个循环后，扩增倍数 一般为106～107 。 扩 增 产 物 量 初期 指数期 平台期
三、PCR反应体系 反应体系 44 模板 |引物 dNTPs DNA聚合酶|缓冲液 要复制的 化学合成的两 dATP、dCTP、 耐热DNA 氯化钾、硫酸 核酸片段 条寡核苷酸 dGTP、dTTP 聚合酶 铵、镁离子
三、PCR反应体系 化学合成的两 条寡核苷酸 引物 dATP、dCTP、 dGTP、dTTP dNTPs 耐热DNA 聚合酶 DNA聚合酶 氯化钾、硫酸 铵、镁离子 缓冲液 反应体系 要复制的 核酸片段 模板
纯度 01 基因组DNA 模板 结构 →(template） 02 RNA→ CDNA 数量 03 质粒DNA或线粒体DNA
模板 （template ） 01 基因组DNA 02 RNA 03 质粒DNA或线粒体DNA cDNA 纯度 结构 数量