第三十一章病毒的遗传与进化(自学) 第三十二章病毒与细胞的相互作用 6 第一节病毒的培养 第二节病毒与细胞的相互作用 课件002 兽医微生物学教学课件口一
课件002 兽医微生物学教学课件 5 第三十一章 病毒的遗传与进化（自学） 第三十二章 病毒与细胞的相互作用 第一节 病毒的培养 第二节 病毒与细胞的相互作用
第一节病毒的培养 疠毒的培养繁殖只能在活细胞内进行,是以病毒 基因为模板,在酶的作用下,分别合成其基因及蛋 白质,再组装成完整的病毒颗粒,这种方式称为复 制。常见的病毒培养方法有:细胞(包括组织器官) 培养法;鸡胚培养法;实验动物培养法。SPF动物 或SP鸡胚,仍常用于培养病毒,但病毒细跑培养发 展最快,重点介绍。 病毒细跑培养 1.概念将适宜组织中的细胞分散,在培养液中进行 细胞培养,再接种病毒,让病毒在细跑中繁殖来培 养病毒的方法。普医微生物学教学课件口一
课件002 兽医微生物学教学课件 6 第一节 病毒的培养 病毒的培养繁殖只能在活细胞内进行，是以病毒 基因为模板，在酶的作用下，分别合成其基因及蛋 白质，再组装成完整的病毒颗粒，这种方式称为复 制。常见的病毒培养方法有：细胞（包括组织器官） 培养法；鸡胚培养法；实验动物培养法。 SPF动物 或SPF鸡胚，仍常用于培养病毒，但病毒细胞培养发 展最快，重点介绍。 一、病毒细胞培养 1. 概念 将适宜组织中的细胞分散，在培养液中进行 细胞培养，再接种病毒，让病毒在细胞中繁殖来培 养病毒的方法
2.用途用于病毒学研究。分离病骞,病毒克隆纯 化,病毒病诊断及疫苗制备等。 3.特点一致性好,材料易得,易标准化试验,可 重复性好。可通过细跑病变判定病毫感染,也可结 合免疫学技术检测细跑内的病毒 二、纽胞培养类型 1.原代细胞动物组织经胰蛋白酶等消化、分散, 获得单个细胞悬液,再生长于培养器皿中。制备原 代细胞,肾和睾丸最为常用,以来源于SPF胚胎或 幼畜组织的细胞为好。 课件002 兽医微生物学教学课件口
课件002 兽医微生物学教学课件 7 2. 用途 用于病毒学研究。分离病毒，病毒克隆纯 化，病毒病诊断及疫苗制备等。 3. 特点 一致性好，材料易得，易标准化试验，可 重复性好。可通过细胞病变判定病毒感染，也可结 合免疫学技术检测细胞内的病毒。 二、细胞培养类型 1. 原代细胞 动物组织经胰蛋白酶等消化、分散， 获得单个细胞悬液，再生长于培养器皿中。制备原 代细胞，肾和睾丸最为常用，以来源于SPF胚胎或 幼畜组织的细胞为好
2.二倍体细孢株将原代细胞单层消化分散成单个 细胞,继续培养传代,仍为二倍体。此种细胞数量 可扩大,对病的易感性无变化。从样本中分离培 养病毒,一般多采用此种细胞。 3.传代细跑系在体外培养液中可无限制分裂传代 的细胞。一般来源于肿瘤组织。有已建立的很多传 代细胞系,如H6(人子宫癌细胞)、Vero(非洲绿猴 肾细胞)、PK-15(猪肾细胞)等。 优点:传代及培养方便,使用广泛。 缺点:对有的样本病毒不紋感;传代日久易被霉形 体荷染或病毒隐性感染?有致助瘤的濤在危险。一
课件002 兽医微生物学教学课件 8 2. 二倍体细胞株 将原代细胞单层消化分散成单个 细胞，继续培养传代，仍为二倍体。此种细胞数量 可扩大，对病毒的易感性无变化。从样本中分离培 养病毒，一般多采用此种细胞。 3. 传代细胞系 在体外培养液中可无限制分裂传代 的细胞。一般来源于肿瘤组织。有已建立的很多传 代细胞系，如Hel6(人子宫癌细胞)、Vero(非洲绿猴 肾细胞)、PK-15(猪肾细胞)等。 优点：传代及培养方便，使用广泛。 缺点：对有的样本病毒不敏感；传代日久易被霉形 体污染或病毒隐性感染；有致肿瘤的潜在危险
细胞培养的方法 最常用的方法为静置培养及旋转培养。还可用悬 浮培养或微载体培养技术等。 静置培养将消化分散的细跑悬液分裝于培养瓶 (管)或培养板(孔),封闭,静置于恒温箱内,数天 后细胞可生成贴壁的单层细胞。如用细胞培养板, 般需培养在含5%的C0条件下。哺乳动物及禽 类的细胞培养温度一般为37℃。 2.旋转培养基本方法与静置培养相同,不同之处 是要培养的细胞不断缓慢旋转(5-10rpm),经过 段时间,细胞可在培养瓶管)的四壁长满单层。此 产量高,适用于疫省产要件
课件002 兽医微生物学教学课件 9 三、细胞培养的方法 最常用的方法为静置培养及旋转培养。还可用悬 浮培养或微载体培养技术等。 1. 静置培养 将消化分散的细胞悬液分装于培养瓶 (管)或培养板(孔)，封闭，静置于恒温箱内，数天 后细胞可生成贴壁的单层细胞。如用细胞培养板， 一般需培养在含5％的CO2条件下。哺乳动物及禽 类的细胞培养温度一般为37℃。 2. 旋转培养 基本方法与静置培养相同，不同之处 是要培养的细胞不断缓慢旋转(5-10rpm)，经过一 段时间，细胞可在培养瓶(管)的四壁长满单层。此 法的产量高，适用于疫苗生产