第二节高效液相色谱仪 3.梯度洗脱装置 梯度洗脱就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性 的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例,从而使流动相 的强度、极性、p值或离子强度相应地变化,达到提高分离 效果,缩短分析时间的目的。 梯度洗脱装置分为两类: 类是外梯度裝置(又称低压梯度),流动相在常温常 压下混合,用高压泵压至柱系统,仅需一台泵即可 另一类是内梯度装置(又称高压梯度),将两种溶剂分 别用泵增压后,按电器部件设置的程序,注入梯度混合室混
11 第二节 高效液相色谱仪 3. 梯度洗脱装置 梯度洗脱就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性 的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例，从而使流动相 的强度、极性、pH值或离子强度相应地变化，达到提高分离 效果，缩短分析时间的目的。 梯度洗脱装置分为两类： 一类是外梯度装置（又称低压梯度），流动相在常温常 压下混合，用高压泵压至柱系统，仅需一台泵即可。 另一类是内梯度装置（又称高压梯度），将两种溶剂分 别用泵增压后，按电器部件设置的程序，注入梯度混合室混
第二节高效液相色谱仪 合,再输至柱系统。 梯度洗脱的实质是通过不断地变化流动相的强度,来调 整混合样品中各组分的k值,使所有谱带都以最佳平均k值通 过色谱柱。它在液相色谱中所起的作用相当于气相色谱中的 程序升温,所不同的是,在梯度洗脱中溶质κ值的变化是通 过溶质的极性、pH值和离子强度来实现的,而不是借改变温 度(温度程序)来达到 进样系统 进样系统包括进样口、注射器和进样阀等,它的作用是 把分析试样有效地送入色谱柱上进行分离 12
12 第二节 高效液相色谱仪 合，再输至柱系统。 梯度洗脱的实质是通过不断地变化流动相的强度，来调 整混合样品中各组分的k值，使所有谱带都以最佳平均k值通 过色谱柱。它在液相色谱中所起的作用相当于气相色谱中的 程序升温，所不同的是，在梯度洗脱中溶质k值的变化是通 过溶质的极性、pH值和离子强度来实现的，而不是借改变温 度（温度程序）来达到。 二、进样系统 进样系统包括进样口、注射器和进样阀等，它的作用是 把分析试样有效地送入色谱柱上进行分离
第二节高效液相色谱仪 、分离系统 分离系统包括色谱柱、恒温器和连接管等部件。色谱 柱一般用内部抛光的不锈钢制成。其内径为2~6mm,柱长 为10~50cm,柱形多为直形,内部充满微粒固定相。柱温 般为室温或接近室温 四、检测器 检测器是液相色谱仪的关键部件之一。对检测器的要求 是:灵敏度高,重复性好、线性范国笫、死体积小以及 度和流量的交化不敏感等。 在液相色谱中,有两种类型的检测器,一类是溶质性检 13
13 第二节 高效液相色谱仪 三、分离系统 分离系统包括色谱柱、恒温器和连接管等部件。色谱 柱一般用内部抛光的不锈钢制成。其内径为2 ~ 6mm，柱长 为10 ~50cm，柱形多为直形，内部充满微粒固定相。柱温一 般为室温或接近室温。 四、检测器 检测器是液相色谱仪的关键部件之一。对检测器的要求 是：灵敏度高，重复性好、线性范围宽、死体积小以及对温 度和流量的变化不敏感等。 在液相色谱中，有两种类型的检测器，一类是溶质性检
第二节高效液相色谱仪 测器,它仅对被分离组分的物理或物理化学特性有响应。属 于此类检测器的有紫外、荧光、电化学检测器等;另一类是 总体检测器,它对试样和洗脱液总的物理和化学性质响应 属于此类检测器有示差折光检测器等。 14
14 第二节 高效液相色谱仪 测器，它仅对被分离组分的物理或物理化学特性有响应。属 于此类检测器的有紫外、荧光、电化学检测器等；另一类是 总体检测器，它对试样和洗脱液总的物理和化学性质响应。 属于此类检测器有示差折光检测器等
第三节高效液相色谱的固定相 和流动相 、固定相 高效液相色谱固定相以承受高压能力来分类,可分为刚 性固体和硬胶两大类 刚性固体以三氧化硅为基质,可承受70×1081.0×10Pa 的高压,可制成直径、形状、孔隙度不同的颗粒。如果在二 氧化硅表面键合各种官能团,可扩大应用范围,它是目前最 广泛使用的一种固定相。 硬胶主要用于离子交换和尺寸排阻色谱中,它由聚苤乙 烯与二乙烯苯基交联而成。可承受压力上限为3.5×108Pa。固 定相按孔隙深度分类,可分为表面多孔型和全多孔型固定相 15
15 第三节 高效液相色谱的固定相 和流动相 一、固定相 高效液相色谱固定相以承受高压能力来分类，可分为刚 性固体和硬胶两大类。 刚性固体以二氧化硅为基质，可承受7.0108~1.0109Pa 的高压，可制成直径、形状、孔隙度不同的颗粒。如果在二 氧化硅表面键合各种官能团，可扩大应用范围，它是目前最 广泛使用的一种固定相。 硬胶主要用于离子交换和尺寸排阻色谱中，它由聚苯乙 烯与二乙烯苯基交联而成。可承受压力上限为3.5108Pa。固 定相按孔隙深度分类，可分为表面多孔型和全多孔型固定相