B1%B2%B3%B4%Bs%B6% Ab 分离B、F *Ag B=B/(B+F) F=F/(B+F) R=B/F Ag 1 2 3 4 5 6 浓度25 50100200400800
Ag 25 50 100 200 400 800 *Ag Ab 分离B、F B%=B/(B+F) F%=F/(B+F) R=B/F B1% B2% B3% B4% B5% B6% 1 2 3 4 5 6 浓度
100 器 50 0 25 50100200.400800 Ag浓度 标准曲线
B% 标 准 曲 线
B1%B2%B3%B4%Bs%B%B% Ab 分离B、F *Ag Ag 1 2 3 4 5 6 25 50 100200400800
Ag 25 50 100 200 400 800 *Ag Ab 分离B、F B1% B2% B3% B4% B5% B6% 1 2 3 4 5 6 B% ?
100T ood 50 50 1.0 0 0 0 25 50100200400800 2550100200400800 25501002004008 Ag浓度 Ag浓度 Ag浓度 Calibration Curve 在体外条件下,Ag与定量的*Ag对限量的 特异性Ab的竞争结合反应
60
在实际的操作中,我们一般要设立以下几个反应管: 1.最大结合管(Bo): 标准抗原的量为0,只有标记抗原和特异性抗 体时,标记抗原与抗体充分反应后分离B和F,所测得的B的放射性 为B0。这是没有标准抗原与之竞争时,标记抗原和抗体的结合达 最大值。 2. 非特异结合管(NSB):标记抗原除了要和特异性抗体结合以外, 还要和一些杂质蛋白或容器的管壁等结合,对我们的分析结果产生 影响。NSB管是用蒸馏水代替特异性抗体,在相同条件下反应后测 得的放射性。 3.总放射性管(T):反应后不分离就直接测得的放射性就是总放射 性。表示标记抗原抗体复合物和游离的标记抗原的总放射性。 4. 标准管(BB。):放有不同浓度的标准抗原,再加入相同量的标 记抗原和特异抗体。一般在反应后分离出沉淀, 测定沉淀的放射性 作为B。 5. 样品管(B,):用同剂量的样品代替标准管中的标准抗原,在相 同条件下反应和分离,同样取沉淀测得其放射性,就可以在绘制的 标准曲线上找到样品的浓度
在实际的操作中,我们一般要设立以下几个反应管: 1.最大结合管(Bo):标准抗原的量为0,只有标记抗原和特异性抗 体时,标记抗原与抗体充分反应后分离B和F,所测得的B的放射性 为Bo。这是没有标准抗原与之竞争时,标记抗原和抗体的结合达 最大值。 2.非特异结合管(NSB):标记抗原除了要和特异性抗体结合以外, 还要和一些杂质蛋白或容器的管壁等结合,对我们的分析结果产生 影响。NSB管是用蒸馏水代替特异性抗体,在相同条件下反应后测 得的放射性。 3.总放射性管(T):反应后不分离就直接测得的放射性就是总放射 性。表示标记抗原抗体复合物和游离的标记抗原的总放射性。 4.标准管(B1 ~Bn):放有不同浓度的标准抗原,再加入相同量的标 记抗原和特异抗体。一般在反应后分离出沉淀,测定沉淀的放射性 作为B。 5.样品管(Bx):用同剂量的样品代替标准管中的标准抗原,在相 同条件下反应和分离,同样取沉淀测得其放射性,就可以在绘制的 标准曲线上找到样品的浓度