第一爷初代培养 2外植体选择的要求 口材料部位的影响：对大多数植物来讲，茎尖是较好的 部位，茎段则是组织培养应用最广泛的材料。 口取材季节的影响：一般在生长旺盛季节取材所带杂菌 最少、成功率高。 口器官的生理状态和发育年龄：一般生理年龄越小，越 容易诱导根和芽的发生。 ▣材料大小的影响：材料越小，成活率越低、污染率越 低
《 第一节初代培养 3外植体的采集方法 ▣选择优良的种质：良好的性状或者特殊的基因型。 口选择健壮的母株：防治病毒病等。 口晴天早晨采集：雨后不宜采集。 口采集工具要消毒。 口枝条采集时剪去叶片。防治失水。 口低温保湿携带，不宜长距离运输。带回实验室应立即冲 洗消毒
第一节初代培养 三、外植体的表面灭菌 1.消毒剂 既要杀死材料表面的杂菌，又对外植体的损伤很小，使其正常生长。 外植体消毒常用灭菌剂 灭菌剂 使用浓度 持续时间(min) 去除的难易 灭菌效果 酒精 70-75% ≤0.5 中 好 84消毒液 15% 10~30 易消毒剂 好 氯化汞 0.1~0.2% 4~15 较难 最好 H202 3% 5~30 中 较好 次氯酸钠 2% 30~60 易 很好 次氯酸钙 0.1-1% 5-30 易 很好 抗茵素 9~10% 5~30 中 较好
第一爷初代培养 2外植体消毒程序 清洗与流水冲洗 消毒方法 基段消毒培养过用 剪切2cm 70%酒精≤30s D清洗与流水冲洗23h 70%酒精30S 表面消毒剂 无菌水冲洗3-5次 5%84消毒液 无菌水冲洗 或0.1%升汞 接种 35次 再生 培养 消毒剂消毒
第一爷初代培养 3接种 口每个培养容器只接1个外植体。 接的越多，污染率越高，成功率越低。 口按无菌操作要求进行。 口封口后转至培养室培养