第二讲生物材料的采集与制备
冬一)生物材料的采集 。在实验动物功能评价中，需要采集的生物样品主要是血 液和尿液及组织脏器，它是反映受试物的生物学效应和 物质在体内代谢情况的最为重要的途径。 1.采血 。2.采尿 ÷3.骨髓采集： 大动物骨髓采集与人相近，多采取活体穿刺，穿刺部 位一般是胸骨、肋骨、髂骨、胫骨、股骨，这些部位具 有造血功能。 小动物，一般处死后，取胸骨或股骨，用注射器吸取 定量的HanK'S液冲洗出
÷①选取原则：一般选取正常与病变组织交界处，如 果眼看不到明显变化，则各试验组标本部位应均匀 一致。 所选取组织应包括脏器的重要结构或全层，如肾皮 质，髓质和肾盂，选取时切勿挤压，应用手术刀， 少用剪。 ÷②大小：厚约3~5mm,大小为1.5~2cm2 ·③标记：每块标本应用铅笔在纸片上标记好，纱布 包扎，投入定液。 ④固定液：标本选取后应尽早浸入固定液，使组织 处于生前状态。 ·电镜标本取活体，1分钟内须浸入固定液
÷固定液视情况选用： 。a.中性福尔马林液： 40%甲醛100ml,酸性磷酸钠4g、磷酸氢二钠6.5g, 蒸馏水900l。此固定液穿透力强，固定均匀，对于 脑神经组织及某些酶均有良好的保存作用。一般固定 48h. b.Bouin固定液： ·饱和苦咪酸75份，36%甲醛20份，冰醋酸5份，混匀 后使用。特点：细胞收缩小，细胞核着色清晰，固定 时间24~48h。 。C.戊二醛固定液： 。用于固定电镜组织标本。 ÷1液：磷酸氢二钠35.61g,配成1000ml, 。2液：磷酸氢二钠27.61g,配成1000ml, ÷取1液40.5ml,取2液9.5ml,混匀，加2.5%戊二醛10ml,加双 蒸水至100ml
。（仁)生物材料的处理 1。血液标本选择 ①全血：即抗凝血，主要用于Hb、RBC、WBC、DC 测定一些生化指标。 ·②血浆：抗凝血离心分离，除去细胞成分所得。 主要用于凝血、纤维蛋白测定和分析用一些 生化指标。 ·③血清：不加抗凝剂，自然凝固后析出的澄清淡黄色 透明液体。 夏季一般在血凝后30min分离血清。 冬季应置37℃水浴促使血清析出。 ÷血清成分接近于组织液的化学组成，适于测定机体各 种生化指标，测定血清中有关物质含量比全血更能反 映机体情沉