基因库 基因文库 以游离的形式简单的混合 以统一的形式混合,易于独立基因的钓取 11
基因库 基因文库 以游离的形式简单的混合 以统一的形式混合,易于独立基因的钓取 11
g 基因文库就是随机克隆的集合 从构建方法来解释基因 这样每个细胞就包含 文库的建立: 了一个基因片段与载体 从特定个体分离出来的 重组DNA分子,许多这 一批基因,通过人工构 样的细胞一起就包含了 建的方式,使这些基因 该生物全部基因信息, 以克隆的形式存在(用 我们将这一个集合体 某种载体装盛导入某种 叫做基因文库。 宿主细胞)
基因文库就是随机克隆的集合 从构建方法来解释基因 文库的建立: 从特定个体分离出来的 一批基因,通过人工构 建的方式,使这些基因 以克隆的形式存在(用 某种载体装盛导入某种 宿主细胞)。 这样每个细胞就包含 了一个基因片段与载体 重组DNA分子, 许多这 样的细胞一起就包含了 该生物全部基因信息, 我们将这一个 。 12
g (a 举例: 某生物基因DNA片段(例如10n个)与载体分 子重组,重组DNA转化宿主细胞,转化细胞在 选择培养基上长出的单个菌落(或噬菌斑)即 为一个DNA片段的克隆。 条浓緊 全部片段克隆的集合即为该生物的基因文库。 13
举例: 某生物基因DNA片段(例如10 n个)与载体分 子重组,重组DNA转化宿主细胞,转化细胞在 选择培养基上长出的单个菌落(或噬菌斑)即 为一个DNA片段的克隆。 全部片段克隆的集合即为该生物的基因文库。 13
文库的构建过程: g STPE.05 文库的构建流程: 建库和库的鉴定 STPE.04 转化宿主细胞 STPE.03 STPE.02 酶切、连接载体 STPE.01 逆转录成cDNA mRNA的提取 14
文库的构建过程: 14 文库的构建流程: STPE.01 mRNA的提取 STPE.02 逆转录成cDNA STPE.03 酶切、连接载体 STPE.04 转化宿主细胞 STPE.05 建库和库的鉴定
g 2.按照构建对象可以分为: 01 02 03 基因组文库 cDNA文库 特殊序列文库 基因组文库是由 cDNA文库是利用 特殊序列文库是针 一种生物的所有 从RNA序列反转录 对某些特殊基因或 基因组DNA构建而 形成的所有cDNA 序列而建立的。 成的。 序列构建的。 (针对Ig基因,称 之为抗体库) 15
基因组文库是由 一种生物的所有 基因组DNA构建而 成的。 基因组文库 01 cDNA文库是利用 从RNA序列反转录 形成的所有cDNA 序列构建的。 cDNA文库 02 特殊序列文库是针 对某些特殊基因或 序列而建立的。 (针对Ig基因,称 之为抗体库) 特殊序列文库 03 2.按照构建对象可以分为: 15