Cg5.040 中华人民共和国国家标准 Ge4T50329a2099 食品中山梨酸、苯甲酸的测定 Determination of sorbic acid and benzioc acid in foods 2003-08-11发布 2004-01-01实施 中华人民共和国品告资发布 中国国家标准化管理委员会 231
GB/T5009.29-2003 前言 本标准代替GB/T5009.29一1996《食品中山梨酸、苯甲酸的测定方祛》. 本标准与GB/T5009.29-1996相比主要修改如下： 一修改了标准的中文名称，标准中文名称改为食品中山梨酸、苯甲酸的测定》 -按照GB/T20001.4一2001《标准编写规则第4部分：化学分析方法》对原标准的结构进行了 修改。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准第一法由卫生部食品卫生监督检验所负责起草 木标准第二法由天排食品卫生监督检验所，辽宁省食品卫生监督检验所，武汉市卫生防疫站断江 省卫生防疫站、四川省卫生防疫站负贵起草。 本标准第三法由卫生部食品卫生监督检验所负责起草， 本标准于1985年首次发布，1996年第一次悠订，本次为第二次修订 232
GB/T5009.29-2003 食品中山梨酸、苯甲酸的测定 1范固 本标准规定了酱油、水果汁、果酱等食品中山梨酸、苯甲酸含量的测定方法 本标准适用于酱油、水果汁、果酱等食品中山梨酸、苯甲酸含量的测定。 最低检出浓度：气相色谱法最低检出量为1g,用于色谱分析的试样为1g时，最低检出浓度 为1mg/kg. 第一法气相色谱法 2原理 试样酸化后，用乙醚提取山梨骸、苯甲骸，用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，与 标准系列比较定量， 3试剂 3.1乙醚：不含过氧化物。 3.2石油醚：沸程30℃~60℃ 3.3盐酸. 3.4无水硫酸钠 3.5盐酸(1+1)：取100mL盐酸，加水稀释至200mL. 3.6氢化钠酸性溶液(40gL):于氢化钠溶液(40g/L)中加少量盐酸(1+1)酸化 3.7山梨酸、苯甲酸标准溶液：准确称取山梨酸、苯甲酸各0.2000g,登于100mL容量瓶中，用石油 髓-乙醚(3十1)混合溶剂溶解后并稀释至刻度。此溶腋每毫升相当于2.0mg山梨酸或萃甲酸。 3.8山梨酸、苯甲酸标准使用液：吸取适量的山梨酸、苯甲酸标准溶液，以石油酷-乙酰(3十1)混合溶剂 稀释至每意升相当于50,100,150,200、250*g山梨酸或苯甲酸。 4位器 气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器。 5分析步骤 5.1试样提取 称取2.50g事先泥合均匀的试样，登于25mL带塞量筒中，加0.5mL盐酸(1+1)酸化，用15、 l0mL乙醚提取两次，每次振摇1mi,将上层乙醚提取液吸入另一个25mL带塞量简中，合并乙醚提 取液。用3mL氯化钠酸性溶液(40g/L)洗涤两次，静止15mi,用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤人 25mL容量瓶中加乙醚至刻度，混匀。准确吸取5mL乙酰提取液于5mL带塞刻度试管中，置40℃ 水浴上挥干，加人2mL石油酵-乙醚(3+1)混合溶剂溶解残渣，备用。 233
GB/T5009.29-2003 5.2色谱参考条件 5.2.1色谱柱：玻璃柱，内径3mm,长2m,内装涂以5%DEGS+1%裤酸固定液的60目~80目 Chromosorb W AW. 5.2.2气流速度：载气为氨气，50mL/min(氮气和空气、氢气之比按各仪器型号不同选择各自的最佳 比例条件)。 5.2.3温度：进样口230℃；检测器230℃：柱逛170℃。 5.3测定 进样2：L标准系列中各浓度标准使用被于气相色谱仪中，可测得不同浓度山梨酸、苯甲酸的蜂商， 以浓度为横坐标，相应的峰高值为纵坐标，绘制标准曲线 同时进样2L试样溶液，测得峰高与标准曲线比较定量 5.4结果计算 试样中山梨酸或苯甲酸的含量按式(1)进行计算。 X=- .(1) X一试样中山梨酸或苯甲酸的含量，单位为毫克每千克(mg/kg) A—一测定用试样液中山梨酸或苯甲酸的质量，单位为微克(g): 加人石油酵-乙醚(3+1)混合溶剂的体积，单位为毫升(mL) 测定时进样的体积，单位为微升(L): 试样的质量，单位为克(g): 5 蔺定时吸取乙避提取液的体积，单位为毫升(mL) 25—试样乙酰提取液的总体积，单位为毫升(mL)。 由测得苯甲酸的量桑以1.18，即为试样中苯甲酸钠的含量。 计算结果保阳两位有效数字】 5.5精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%. 5.6其他 山梨酸和苯甲酸的气相色谱图见图1。 山梨酸保留时间2min53s苯甲酸保留时间6min8s. 234
GB/T5009.29-2003 图1 第二法高效液相色谱法 6原理 试样加温除去二氧化碳和乙醇，调pH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根 据保留时间和峰面积进行定性和定量。 7试剂 方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸馏水或同等纯度水，溶液为水溶液。 7.1甲醇：经滤膜(0.5m)过滤. 7.2稀氨水(1+1)，氨水加水等体积混合 7.3乙酸铵溶液(0.02mol/L):称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL,溶解，经0.45m滤膜过， 7.4费酸氢钠溶液(20g/L):称取2g碳酸氢钠（优级纯），如水至100mL,振摇溶解， 7.5孝甲酸标准储备溶液：准确称取0.1000g苯甲酸，加碳酸氢钠溶液(20g/L)5mL,加热溶解，移 入100mL容量瓶中，加水定容至100mL,苯甲酸含量为1mg/ml,作为储备溶液。 7.6山梨酸标准储备溶液：准确称取0.1000g山樂酸，加碳酸氢钠溶液(20g/L)5mL,如热溶解，移 人100mL容量瓶中，加水定容至100mL,山梨酸含量为1mg/mL,作为储备溶液 乙7苯甲酸，山梨酸标准混合使用溶液：苯甲破、山梨酸标准储备溶液各10.0mL,放人100mL容 量瓶中，加水至刻度。此溶液合苯甲酸、山梨酸各0.1mg/mL,经0.45μm滤映过滤（同时测定糖精钠 时可加GB/T5009.28-2003中3.4糖精钠标准储备溶液)