实验三:蛋白电泳
实验三：蛋白电泳
目的 ●掌握板状电泳分离血清蛋白的操作技术 ●熟悉聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理
目的： 掌握板状电泳分离血清蛋白的操作技术 熟悉聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理
电泳 带电粒子在电场的作用下,向着与其电 性相反的电极移动。 ●电泳技术一一利用电泳现象对混合物进 行分离分析的技术 °介质:聚丙烯酰胺凝胶 样品:血清蛋白
电泳 带电粒子在电场的作用下，向着与其电 性相反的电极移动。 电泳技术——利用电泳现象对混合物进 行分离分析的技术。 介质：聚丙烯酰胺凝胶 样品：血清蛋白
装置 垂直平板电泳槽的安装 ●把垂直平板电泳槽和两块玻璃板洗净、 晾干 将两块玻璃板紧贴于电泳槽(玻璃板之 间留有空隙),两边用夹子夹住 将玻璃板卡在配胶架上 ●加双蒸水检验是否漏水
装置 垂直平板电泳槽的安装 把垂直平板电泳槽和两块玻璃板洗净、 晾干 将两块玻璃板紧贴于电泳槽(玻璃板之 间留有空隙)，两边用夹子夹住 将玻璃板卡在配胶架上 加双蒸水检验是否漏水
凝胶制备 试剂分离胶(m)浓缩胶(m) 分离胶缓冲液125 单体交联剂 2.5 1.5 浓缩胶缓冲液 1.24 蒸馏水 6.15 16 催化剂(AP) 0.1 0.1 SDS 0.1 0.1 TEMED 0.008 0.006 总体积 10 10 丙烯酰胺浓度75 4.5
凝胶制备 试剂 分离胶（ml） 浓缩胶（ml） 分离胶缓冲液 1.25 － 单体交联剂 2.5 1.5 浓缩胶缓冲液 － 1.24 蒸馏水 6.15 7.16 催化剂(AP) 0.1 0.1 SDS 0.1 0.1 TEMED* 0.008 0.006 总体积 10 10 丙烯酰胺浓度 7.5 4.5