第十章 一、液固吸附色谱 liquid-solid adsorption chromatograph 高效液相色谱分 二 液-液分配色谱 liquid-liquid partition chromatograph 析法 三，离子交换色谱 high performance liquid ion-exchange chromatograph 四、离子色谱 chromatograph ion chromatograph 五、离子对色谱 第二节 ion-pair chromatograph 主要分离类型与原理 六、排阻色谱 size-exclusion chromatograph basic principle and 七、亲和色谱(AC) main separating types Affinity chromatograph 下一页 2024/9/20
2024/9/20 第十章 高效液相色谱分 析法 一、液-固吸附色谱 liquid-solid adsorption chromatograph 二、液-液分配色谱 liquid- liquid partition chromatograph 三、离子交换色谱 ion-exchange chromatograph 四、离子色谱 ion chromatograph 五、离子对色谱 ion-pair chromatograph 六、排阻色谱 size- exclusion chromatograph 七、亲和色谱(AC) Affinity chromatograph 第二节 主要分离类型与原理 high performance liquid chromatograph basic principle and main separating types
液-固吸附色谱 liquid-solid adsorption chromatography 固定相：固体吸附剂为，如硅胶、氧化铝等，较常使 用的是5~10um的硅胶吸附剂： 流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。 基本原理：组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸； 适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有 官能团的化合物和异构体有较高选择性： 缺点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾； 2024/9/20 下
2024/9/20 一、 液-固吸附色谱 liquid-solid adsorption chromatography 固定相：固体吸附剂为，如硅胶、氧化铝等，较常使 用的是5～10μm的硅胶吸附剂； 流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。 基本原理：组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸； 适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有 官能团的化合物和异构体有较高选择性； 缺点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾；
三、 液-液分配色谱 liquid-liquid partition chromatography 固定相与流动相均为液体（互不相溶）； 基本原理：组分在固定相和流动相上的分配； 流动相：对于亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流 动相的极性小于固定液的极性（正相normal phase)，反之 ,流动相的极性大于固定液的极性（反相 reverse phase)。 正相与反相的出峰顺序相反； 固定相：早期涂渍固定液，固定液流失，较少采用： 化学键合固定相：（将各种不同基团通过化学反应键合 到硅胶（担体）表面的游离羟基上。C-18柱（反相柱）。 2024/9/20
2024/9/20 二、 液-液分配色谱 liquid- liquid partition chromatography 固定相与流动相均为液体（互不相溶）； 基本原理：组分在固定相和流动相上的分配； 流动相：对于亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流 动相的极性小于固定液的极性（正相 normal phase），反之 ，流动相的极性大于固定液的极性（反相 reverse phase）。 正相与反相的出峰顺序相反； 固定相：早期涂渍固定液，固定液流失，较少采用； 化学键合固定相：（将各种不同基团通过化学反应键合 到硅胶（担体）表面的游离羟基上。C-18柱（反相柱）
三、 离子交换色谱 ion-exchange chromatography 固定相：阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂； 流动相：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶 液；阳离子离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液； 基本原理：组分在固定相上发生的反复离子交换反应； 组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存 在形式等有关。亲和力大，保留时间长； 阳离子交换：R一SO,H+M=R—SO3M+H+ 阴离子交换：R-NROH+X=R—NRMX+OH 应用：离子及可离解的化合物，氨基酸、核酸等。 2024/9/20
2024/9/20 三、 离子交换色谱 ion-exchange chromatography 固定相：阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂； 流动相：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶 液；阳离子离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液； 基本原理：组分在固定相上发生的反复离子交换反应； 组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存 在形式等有关。亲和力大，保留时间长； 阳离子交换：R—SO3H +M+ = R—SO3 M + H + 阴离子交换：R—NR4OH +X- = R—NR4 X + OH- 应用：离子及可离解的化合物，氨基酸、核酸等
四、离子色谱 ion chromatography 离子色谱是在20世纪70年代中期发展起来的一中技术， 其与离子交换色谱的区别是其采用了特制的、具有极低交换 容量的离子交换树脂作为柱填料，并采用淋洗液抑制技术和 电导检测器，是测定混合阴离子的有效方法。 有关内容将在第十章第六节中讲授。 2024/9/20
2024/9/20 四、 离子色谱 ion chromatography 离子色谱是在20世纪70年代中期发展起来的一中技术， 其与离子交换色谱的区别是其采用了特制的、具有极低交换 容量的离子交换树脂作为柱填料，并采用淋洗液抑制技术和 电导检测器，是测定混合阴离子的有效方法。 有关内容将在第十章第六节中讲授